求助万友,“人与人之间的差别比闽北人和闽南人差别动物之间的差

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围产蒙古牛外周血中性粒细胞凋亡调控基因表达研究
目的:通过探讨围产蒙古牛外周血中性粒细胞p53,Bax,cyt-c,caspase-3和Bcl-2基因表达,为揭示和评价围产免疫抑制提供理论依据。  方法:试验选用经产蒙古牛(2~3胎次)10头,同期发情、配种,从中选取合适受孕牛3头(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ),于分娩前22,18,14,10,8,6,4和2天(-22d,-18d,-14d,-10d,-8d,-6d,-4d,-2d),生产当天(0d),产后2,4,6,8,10,14天(2d、4d、6d、8d、10d、14d)颈静脉采血。采用全自动动物血液分析仪检测外周血主要白细胞数量;分离血清,放射免疫法检测血清中雌二醇、孕酮及糖皮质激素浓度;分离中性粒细胞,RT-PCR和WesternBlot检测中性粒细胞p53,Bax,cyt-c,caspase-3和Bcl-2基因mRNA与蛋白表达。  结果:1.外周血白细胞总数、PMNs和MC总数的变化趋势是从-22d逐渐升高,-10d升至最高,0d时显著下降(P<0.05),2d时迅速升高(P<0.05),2~14d维持在正常水平;淋巴细胞-22~-8d变化不明显,-8~0d逐渐下降,0d降至最低,2d时显著升高(P<0.05),2~14d维持在正常水平;嗜酸细胞-22~-10d逐渐升高,-10d达到峰值,随后下降,在-6、-2d有所回升,0d最低,产后逐渐增加。  2.各受试牛E2从-22d逐渐升高,-2d升至最高,2d时显著下降(P<0.05),2~14d维持在基础浓度;P4浓度从-22d逐渐下降,2d降至最低,2~14d维持在基础浓度;GC浓度从-22d逐渐升高,0d升至最高,2d时迅速下降(P<0.05),2~14d维持在基础浓度。ERαmRNA丰度从-22d逐渐升高,-8d升至最高,-8~14d逐渐下降,而ERβ无明显变化。  3.p53,Bax,cyt-c和caspase-3mRNA丰度从-22d逐渐下降,0d降至最低,0~14d逐渐升高;抗凋亡基因Bcl-2mRNA丰度从-22d逐渐上升,0d升至最高,0~14d逐渐降低;凋亡相关蛋白表达与mRNA基本一致。  结论:围产蒙古牛外周血主要类固醇类激素(GC、P4和E2)水平的动态变化模式与PMNs凋亡基因(p53,Bax,cyt-c,caspase-3和Bcl-2)表达上/下调的规律性变化密切相关,并且E2-ERα途径可能在凋亡基因表达的信号调控中发挥重要作用。
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