荧光pcr出现荧光定量pcr扩增曲线线的明显下降,这是什么原因

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荧光pcr扩增曲线有点趴">荧光pcr扩增曲线有点趴
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红包雨下完了,下次早点来噢~穆棱steponeplus型pcr仪,荧光pcr扩增曲线,产业的发展
公司名称:
联系电话:86-
联系地址:河北省邢台市
电子邮件:
联系人:李佳&先生&&&&
发布时间: 0:33:05
光波网会员信息
认证信息:已认证
光波指数:10&&分
会员评价总数:0&&条
公司经营模式:生产商
◆&&规格说明:
◆&&产品说明:
产品简介:邢台润联公司提供的9700 R仪 采用先进的制造技术,性能稳定可靠可更换样品基座:96×0.2ml(有铝质、银质及银质镀金、基座可选配);60×0.5ml反应管;2×384(0.02ml双384孔,可运行768个样品);2×96微孔板(0.2ml双96孔,可运行192个样品);★图形化液晶显示界面,闪烁图形提示温度变化当前状态,清晰直观,操作简便★温度范围:4℃~99℃★温度显示:显示经计算机计算的实际样品温度,到0.1℃★升降温速度:3.5℃~5℃/秒(不同材质的样品基座)★温度重现性:达到设定温度的时间误差<5秒★热盖:维持105℃温度,满足无油操作★温度校正:符合美国国家标准技术局标准(NIST)★功能强大的软件:循环时间和温度自动延伸/自动下降,温度验证功能,可储存100个程序★自动计算Tm值★断电自动恢复:恢复供电后自动执行未完成循环★可选配盖与机器人联机操作★可连接计算机实现网络控制经典的9700型PCR仪,通量灵活的多样品基座,性能极其优越,对于所有的PCR应用领域是一种完美的仪器,对于一些特定的领域(人类身份识别、HLA分型)是认证的仪器。
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型号:JX211305STEPONE荧光定量PCR仪STEPONE型号:JX211278基因扩增仪hema型号:JXPCR仪9700
【穆棱steponeplus型pcr仪,荧光pcr扩增曲线,产业的发展一共有★★30★★多种型号以上只显示1-3种型号,如没有合适您的产品请咨询 河北润联机械公司】3、穆棱steponeplus型pcr仪,荧光pcr扩增曲线,产业的发展多种型号内容型号:JX211305STEPONE荧光定量PCR仪STEPONEStepOne是ABI“第四代”实时荧光定量PCR仪的创新产品。技术指标:★样品模块升降温速度:≥4.6℃/秒★样品升降温速率:≥2.2℃/秒(快速模式)★样品模块容量和反应体系:48×0.1ml,反应体系为10~30μl★灵敏度:在单一报告基因Taqman分析的30ul体系中检测10个拷贝RNaseP模板★准确性:使用Taqman RNaseP仪器验证反应板,可以分辨个拷贝(置信区间为99.7%)★动态范围:9个数量级的线性动态范围★温度范围:4.0℃ - 100℃ ★温度度:±0.25℃设定值/显示温度(35℃ - 95℃)★温度均一性:±0.50℃ ,温度范围(35℃ - 95℃)★熔融曲线温度分辨率低于0.1℃促销赠送:★ABI原装试剂耗材包★台式品牌电脑1套
栏目页面:仪来源网址:荧光定量PCR仪STEPONE型号:JX211278基因扩增仪hema邢台润联提供的基因扩增仪采用电加热升温及制冷降温技术方案,同时吸收PCR仪经典产品-9600型的技术和工艺,具有灵敏度高,特异性强,升降温快,性能稳定等特点。因此,即使是难度较大的RNA PCR,STR-PCR复合扩增,5~40kb的大片段PCR扩增,原位PCR扩增,Hema 型基因扩增仪均能轻松胜任。技术指标:●技术方案:电加热升温,压缩机制冷降温●实验方式※:传统和原位PCR(若做原位PCR,需增加附件一套)●温度设定范围:-5℃~100℃,增量为1℃●温度准确度:33℃至100℃之间为±0.5℃●温度均匀度:±0.5℃●样品温度上冲量:不超过0.5℃●样品温度下冲量:不超过2℃●升温或降温速度:大于1℃/秒●热盖温度:98℃开/关状态可设●存贮程序:120●连续工作时间:无限●工作寿命:10年   专业的润联公司提供专业的产品、专业的售前、售中、售后 ,将使您的工作能够收到事半功倍的效果。
栏目页面:仪来源网址:基因扩增仪hema型号:JXPCR仪9700邢台润联公司提供的9700 PCR仪 采用先进的制造技术,性能稳定可靠可更换样品基座:96×0.2ml(有铝质、银质及银质镀金、基座可选配);60×0.5ml反应管;2×384(0.02ml双384孔,可运行768个样品);2×96微孔板(0.2ml双96孔,可运行192个样品);★图形化液晶显示界面,闪烁图形提示温度变化当前状态,清晰直观,操作简便★温度范围:4℃~99℃★温度显示:显示经计算机计算的实际样品温度,到0.1℃★升降温速度:3.5℃~5℃/秒(不同材质的样品基座)★温度重现性:达到设定温度的时间误差<5秒★热盖:维持105℃温度,满足无油操作★温度校正:符合美国国家标准技术局标准(NIST)★功能强大的软件:循环时间和温度自动延伸/自动下降,温度验证功能,可储存100个程序★自动计算Tm值★断电自动恢复:恢复供电后自动执行未完成循环★可选配电动机盖与机器人联机操作★可连接计算机实现网络控制经典的9700型PCR仪,通量灵活的多样品基座,性能极其优越,对于所有的PCR应用领域是一种完美的仪器,对于一些特定的领域(人类身份识别、HLA分型)是认证的仪器。
栏目页面:仪来源网址:仪9700联系方式:张经理电话:QQ:温馨提示:润联为您提供详细的产品价格、产品图片等产品介绍信息,您可以直接联系厂家获取产品的具体资料,联系时请说明是在润联看到的,并告知型号
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【求助】求助实时荧光PCR的问题
最近做实时荧光PCR发现扩增曲线并没有呈现所谓的“S"曲线 而且ct值都较靠后
刚开始以为是模板量少了 但是加大几倍后 结果并没有多大变化 是否由于反应液中的酶活不够 导致扩增效率差
亦或者是由于探针标记的荧光物质效率太差(结果见附图) 请高手帮忙分析 (偶是新手) 谢了
(缩略图,点击图片链接看原图)从你的CT值来看,都在30以后,可能是你的模板浓度太低了,建议你再增加模板的浓度,且模板浓度每增加10倍,在酶扩增效率是100%情况下,CT值大概减少3.3左右,所以虽然你加大了几倍,CT值大概减少1,效果就不明显。还有你怀疑探针有问题,建议先对定量的PCR产物进行凝胶电泳,看有没有目的条带。如果有的话,那么可能是你的探针设计方面或者是探针质量方面有问题。谢谢。刚开始阶段的杂乱带是什么原因引起的呢?今天将模板浓度用量加大了,并做成标准曲线,如图。1、模板量分别为0.01、0.1、0.2、0.4、0.5ug,这个浓度应该不算低了吧,可为什么Ct值还是偏大的,是否由于酶活不行,还是探针质量差,或是其他什么原因呢?2、低模板量的扩增曲线似乎没有到平台期,可否增多循环至45?3、关于加样的问题。加样过程中特别注意保证加样的均一性,但是老是会有个别加样孔的数值偏差较大,如图中去掉偏差较远的点时(右上),标准曲线的相关系数r=0.998,扩增效率为92.6%。请问大家在加样时有什么好的经验可以共享,特别是在制备标准浓度时?4、请问图中红色圈起部分的杂带是什么原因引起的,怎么消除?或者无关紧要呢?恳请经验丰富的高手能够指导下新手,谢谢。
(缩略图,点击图片链接看原图)雁过留声啊我想应该是控针的问题,要不怎么会荧光曲线怎么是断的?最近也在做定量PCR,是做细菌的,已经做了快一个月了,极度郁闷中,只是我用的是荧光染料,而非探针,和楼主出现了同样的问题,峰值不高,效率太低,而Ct值很高 ,不过融解曲线还好,计算相对定量后发现和表形不一致,请高手指点,不胜感激!请问怎么增加模版浓度啊?我也在做荧光定量,测mRNA的表达,用takara的盒子,说明书上说反转录体系的加入量不能超过pcr反应体系的1/10。看来大家都很多问题 恳请高手们指点指点啊晕倒,问你们一个最原始的问题,你所做的目的基因片段在你所做的摸班里面有表达吗?如果ct值大于30了你还相信他有扩增出来吗?有没有想过或许根本就没有表达呢?如果这个答案是肯定的的话,那或许探针有问题吧.溶解曲线好只代表里面有比较纯的东西在,可能是非特意扩增产物,说不定还是引物二聚体呢,不好意思,泼冷水了我相信各位在做定量之前是有通过普通PCR摸过条件并得到过很好的结果后才开始做定量的. 不然你们也太有钱了,哈哈有个问题需要说明下 我的模板不是mRNA反转录的 本身就是基因组DNA(不一定是基因 甚至是内含子或其他非编码序列) 所以该基因是否有表达 并不影响我的结果 另我所用的探针是Taqman探针 所用引物和探针是公开发表过的 应该说比较可靠 现在的问题应该是模板量少了(这经过几次实验已经证明) 不过我想知道的是怎样才能保证加样的均一性 特别是在稀释制备梯度模板时 这个问题就显的非常重要 希望大家有什么好的建议和方法提供 谢谢了明天ABI在广州举办实时荧光PCR培训这两天参加了实时荧光PCR培训 收获不小感觉你的是对数曲线,不是线性曲线线性曲线是S型的
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