死体积 - 搜狗百科
当柱外体积很小时，可以忽略不计
dead space
3部分体积应尽量减小
死体积不被保留的组分通过色谱柱所消耗的流动相的体积，可由死时间确定：死体积本意是指色谱柱中未被固定相占据的空隙体积，也即色谱柱内流动相的体积。但在实际测量时，它包括了柱外死体积（色谱仪中的管路和连接头间的空间以及进样系统和检测器的空间）。当柱外体积很小时，可以忽略不计。
死体积(dead volume，V0)——由进样器进样口到流动池未被所占据的空间。它包括4部分：进样器至 管路体积、柱内固定相颗粒间隙（被流动相占据，Vm）、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只有Vm参与色谱平衡过程，其它3部分只起峰扩展作用。为防止峰扩展，这3部分体积应尽量减小。V0=F×t0（F为流速）
保留值用来表示色谱峰在中的位置。保留值是试样中各组分在色谱柱中滞留时间（retentiontime）的数值，反映了组分分子与固定相分子间作用力的大小。保留值通常用时间、距离或用将组分带出色谱柱所需要的流动相体积来表示。保留值是由色谱分离过程中的热力学因素所决定的。因此，在一定色谱条件下保留值是特征的，可作为色谱定性的参数术语一）色谱参数1、：不被固定相滞留的组分，从进样到出峰最大之所需的时间。2、保留时间：组分从进样到出峰最大之所需的时间。2.1：减去死时间保留时间。2.2校正保留时间：用压力梯度校正因子修正的保留时间。2.3净保留时间：用压力梯度校正因子修正的调整保留时间。3、死体积：不被固定相滞留的组分，从进样到出峰最大之所需的载气体积。4、：组分从进样到出先峰最大之所需的载气体积。4.1调整保留体积：减去死体积的保留体积。4.2校正保留体积：用压力梯度校正因子修正的保留体积。4.3净保留体积：用压力梯度校正因子修正的调整保留体积。5、比保留体积：每克固定液校正到273K时的净保留体
词条标签：
合作编辑者：
搜狗百科词条内容由用户共同创建和维护，不代表搜狗百科立场。如果您需要医学、法律、投资理财等专业领域的建议，我们强烈建议您独自对内容的可信性进行评估，并咨询相关专业人士。
点击编辑词条，进入编辑页面关注今日：0 | 主题：296263
微信扫一扫
扫一扫，下载丁香园 App
即送15丁当
【求助】高效液相的死体积，滞后时间怎么测？？？
页码直达：
这个帖子发布于9年零303天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位大侠：
请问高效液相的死体积，滞后时间怎么测定啊？最好是Waters()的。不胜感激！
不知道邀请谁？试试他们
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
sunbian2008 各位大侠：
请问高效液相的死体积，滞后时间怎么测定啊？最好是Waters()的。不胜感激！楼主是想研究理论问题呢还是研究试验问题？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
看了这贴，我想知道试验问题！谢谢
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
关于丁香园液相色谱（LC）
主题：【讨论】你注意到HPLC的延迟体积了吗
浏览 |回复19
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：zhoujin83
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
发表于： 12:26:51
延迟体积的概念是梯度混合点到柱头之间的管道体积，比如agilent四元泵，其延迟体积为比例阀到色谱柱柱头间的体积。因为存在延迟体积的存在，在运行梯度方法时，一开始会运行一段等度。因此，其可能会对分离度及保留造成影响，并进一步可能会对方法转移或验证造成影响。延迟体积越大，可能造成的影响也越大。但是延迟体积是一定存在的，agilent的一般可能达到500uL-1ml，岛津的可能要大些延迟体积的大小应该是HPLC的一个很重要的性能指标。最近我在开发一个HPLC的方法时，因为保留很弱，所以我尝试保持5%乙腈运行5min，期望能增加保留，结果是失望了，因为仪器延迟体积大，其保留只增加了0.5min，与我之前用agilent的一般能增加2min以上的情况大不一样。不知道还有坛友有类似的经历吗，大家一起交流交流。
该帖子作者被版主
武灵 加 3 积分，
2经验，加分理由：话题奖励
e_liang369
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：v2821515
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_2821515 jietielvname_v0%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
做液相检测室物质的保留时间不能靠仪器的死体积时间来调节，也没有太大意义。
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：zhoujin83
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由 e_liang369(v2821515) 发表:做液相检测室物质的保留时间不能靠仪器的死体积时间来调节，也没有太大意义。确实不能靠仪器的死体积来调整保留。但我这是说延迟体积，或者说是死体积的大小对保留和分离情况确实有影响。如果延迟体积太大，可能保留较弱的两个峰能达到基线分离，但是这个方法转移到延迟体积小的仪器上，就不一定能达到基线分离。从方法的可靠性上来说，延迟体积越小当然是越好。
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：emoc98311
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_1608710 jietielvname_emoc9%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
延迟体积其实是一个很重要的指标，很多厂家都在追求这个低标准
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：zhoujin83
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:延迟体积其实是一个很重要的指标，很多厂家都在追求这个低标准是的。我现在用的这台shimadzu LC-20AT，不是专业人士安装的，延迟体积太大了，所用的管线加起来应该有1米长。
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：zhoujin83
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
可惜我这边只有一台HPLC，要不我会把不同仪器上的图谱传上来。
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：cdl1568
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_2280064 jietielvname_cdl%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
延迟体积对在一台仪器上出的结果没有什么影响的，它在方法转移到不同品牌的仪器上时会有很大的影响，甚至会出现分不开的情况
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：emoc98311
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_1608710 jietielvname_emoc9%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由 cdl1568(cdl1568) 发表:延迟体积对在一台仪器上出的结果没有什么影响的，它在方法转移到不同品牌的仪器上时会有很大的影响，甚至会出现分不开的情况你说的也没错，这也是我们有些方法用不同的仪器无法重现的原因
tigertooth
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：tigertooth
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
若果认为延迟体积那么重要，自己改管路呀，用更细内径更短的管子。
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：yelev1
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由 zhoujin83(zhoujin83) 发表:延迟体积的概念是梯度混合点到柱头之间的管道体积，比如agilent四元泵，其延迟体积为比例阀到色谱柱柱头间的体积。因为存在延迟体积的存在，在运行梯度方法时，一开始会运行一段等度。因此，其可能会对分离度及保留造成影响，并进一步可能会对方法转移或验证造成影响。延迟体积越大，可能造成的影响也越大。但是延迟体积是一定存在的，agilent的一般可能达到500uL-1ml，岛津的可能要大些延迟体积的大小应该是HPLC的一个很重要的性能指标。最近我在开发一个HPLC的方法时，因为保留很弱，所以我尝试保持5%乙腈运行5min，期望能增加保留，结果是失望了，因为仪器延迟体积大，其保留只增加了0.5min，与我之前用agilent的一般能增加2min以上的情况大不一样。不知道还有坛友有类似的经历吗，大家一起交流交流。其实影响延迟体积最主要是混合器的混合体积，管路的影响倒是其次（0.3内径的10cm也就7ul左右），岛津LC-20A以前标配的混合器是2.6ml，可以改1.7ml和0.5ml，这是老混合器。现在又出了20ul 40ul 100ul 180ul的高效混合器。
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：zhoujin83
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由 秦时明月(yelev1) 发表:原文由 zhoujin83(zhoujin83) 发表:延迟体积的概念是梯度混合点到柱头之间的管道体积，比如agilent四元泵，其延迟体积为比例阀到色谱柱柱头间的体积。因为存在延迟体积的存在，在运行梯度方法时，一开始会运行一段等度。因此，其可能会对分离度及保留造成影响，并进一步可能会对方法转移或验证造成影响。延迟体积越大，可能造成的影响也越大。但是延迟体积是一定存在的，agilent的一般可能达到500uL-1ml，岛津的可能要大些延迟体积的大小应该是HPLC的一个很重要的性能指标。最近我在开发一个HPLC的方法时，因为保留很弱，所以我尝试保持5%乙腈运行5min，期望能增加保留，结果是失望了，因为仪器延迟体积大，其保留只增加了0.5min，与我之前用agilent的一般能增加2min以上的情况大不一样。不知道还有坛友有类似的经历吗，大家一起交流交流。其实影响延迟体积最主要是混合器的混合体积，管路的影响倒是其次（0.3内径的10cm也就7ul左右），岛津LC-20A以前标配的混合器是2.6ml，可以改1.7ml和0.5ml，这是老混合器。现在又出了20ul 40ul 100ul 180ul的高效混合器。是这样的，我用的应该是老式的，很有可能是标配的2.6ml混合器。至于管线，虽然对延迟体积的贡献不大，但是我这个我再仔细看了看，其长度达到了2米啊，这就不小了。小木虫 --- 500万硕博科研人员喜爱的学术科研平台
&&查看话题
【求助】请教 滞后体积 延迟体积 死体积
请教 液相指标 滞后体积 延迟体积 死体积 有什么区别 怎么测啊？
关于滞后体积 那为什么不是从 泵头开始算呢……泵头开始泵液到混合器也有一段距离啊 谢谢
研究生必备与500万研究生在线互动！
扫描下载送金币
浏览器进程
打开微信扫一扫
随时随地聊科研液相色谱培训总结
篇一：液相培训总结 Agilent 1260 液相色谱培训总结 我来公司已经一年多，在质量部做QC工作，做基本实验操作，主要负责液相， 测定产品中含量，如维生素E、苯并芘、β-胡罗卜素、毛蕊花糖苷、松果菊苷等项目，为了严格保证产品质量，必须以严谨科学的态度对待，从制备样品过程到仪器采集过程都要非常谨慎、认真，确保测定结果的准确性和真实性。 以往的操作都是由有经验的操作人指导传授，再结合仪器操作规程来做，只是简 单普通的做样，没有对检测结果很好的分析总结。这次有幸得到公司提供的培训机会，去成都Agilent科技大学培训中心参加了为期四天（日―日）的液相色谱培训。培训期间老师讲述了从硬件、软件及维护保养各个方面的问题，让人一下充沛了不少。 典型的C1260液相色谱的堆积模块方式自上而下为溶剂柜、脱机机、泵、自动进样器、柱温箱、检测器。各个模块由CAN 线进行通讯连接，使得各个模块形成一整套系统。化学工作站和仪器系统之间用LAN线连接。 一、硬件: 1、Agilent 1260在线脱气机 真空脱气内部管路使用半透材料，允许气体分子通过，液体分子无法通过。我公司为四元泵内嵌式真空脱气机，可以避免繁琐的操作，提高仪器稳定性，便于快速进行溶剂切换，降低噪音，保证样品保留时间的稳定性。 2、Agilent 1260泵
我公司为四元泵VL:G1311C型。在四元泵中，当使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到四元比例阀下面的通道上（A或D），有机溶剂接到上面的通道上（B或 C）。如果经常使用盐溶液，建议定期用水冲洗所有的通道以去除阀口上可能出现的盐沉淀。 3、Agilent 1260进样器 我公司为标准自动进样器：G1329B。进样体积重复性高，进样动态范围宽，连续冲洗流路并有洗针功能，降低样品残留，可以容纳不同规格的样品瓶。灵活的进样程序编程可以进行样品前处理，使用旁路可以降低延迟体积。 4、Agilent 1260柱温箱 我公司为标准柱温箱：G1316A 。做样品时保留时间的再现性及如果需要高于或低于室温进行分离操作时，都需要使用柱温箱，这款柱温箱大空间，可以容纳三根长色谱柱，降温非常方便，可以进行程序升温。对于经常频繁更换柱子的，建议使用柱切换阀，方便柱子的切换。我们还没有配备，在以后建议储备。 5、Agilent 1260检测器
我公司为二极管阵列检测器（DAD）:G1315D VL 和荧光检测器（FLD）： G1321C 。VWD检测器用于产品开发及质量控制，需要高灵敏度检测器的应用。DAD检测器用于研究及方法开发、多波长检测、色谱峰纯度检查、色谱峰确认定性。FLD检测器用于检测能产生荧光的物质，包括氨基酸、多肽、维生素、生物碱和甾类化合物等。RID检测器灵敏度不好，只适用于等度洗脱，适合于食品分析（如糖类、脂类物质）和聚合物分析。ELSD检测器适合于无紫外吸收、无电活性和不发荧光的样品的检测。二、OpenLAB
CDS： OpenLAB
CDS控制面板提供了用于访问OpenLAB
CDS共享服务的用户界面。 功能为： 1、仪器管理 ①创建/编辑仪器和仪器访问 ②仪器状态概述、包括活动日志 2、角色权限管理 3、诊断日志 软件诊断和追踪；可以集中访问由注册模块创建的所有日志文件、追踪文件等 4、许可证管理 ①对仪器模块和附加项所需的全部许可证进行管理 ②添加或删除许可证及查看所有许可证的状态 三、化学工作站 1、方法的编辑和保存 方法的组成： 方法信息（描述性的文字信息，可以按照自己的需求来输） 仪器参数/采集条件 数据分析参数 运行时间对照表 2、谱图处理及优化 3、积分参数优化 化学工作站以当前色谱图为基础，自动优化积分事件表中的积分参数。如果自动积分的结果不能够满足需要，可以自行设置积分参数，重新积分。 掌握熟练积分事件：斜率灵敏度、基线连到此点、谷底基线、峰面积相加、积分打开/关闭、负峰。对所有信号都适用的积分事件： ①拖尾峰撇去高度比、前伸峰撇去高度比、撇去峰/谷比 ②切线撇去模式、基线校正、峰谷比 4、光谱功能 光谱功能使用的前提条件是已经购买了DAD检测器及光谱分析软件，并且在“配置仪器”窗口的“选项”项下选择“3D光谱评估”。工作站的“数据分析”界面中会多出一个“光谱”菜单。光谱功能可以进行峰纯度检测。 5、校正表建立，设定报告，报告设计 样品分析时，先进行积分优化，再建立校正表，输入化合物名称、含量等，设定报告，报告设计，最后报告出所测定样品含量。 工作站提供的六种计算方法，根据实际的计算要求加以选择。 6、UHPLC介绍 UHPLC是超高效液相色谱，它是基于亚二微米填料颗粒技术的液相色谱分离技术。 四、日常维护和常见色谱故障 1、溶剂准备：溶剂过滤是要防止固体颗粒损伤仪器或柱头。常用0.45um的滤膜，使用色谱纯的溶剂。定期更换溶剂，避免溶剂瓶直接日照，每两天更换或过滤溶剂，用滤膜过滤溶剂去除微生物，在使用时一定要脱气。 下列对不锈钢有腐蚀性的溶剂避免使用： ①卤化物碱金属溶液和相应的酸溶液 ②高浓度的无机酸例如：硝酸或硫酸③能够形成卤素自由基或酸的氯化试剂及其混合物 ④含有过氧化物的色谱级醚必须用氧化铝干燥 ⑤在有机溶剂中一定浓度的有机酸溶液 ⑥含有强络合物的溶液 ⑦四氯化碳和异丙醇或四氢呋喃混合液 2、保护色谱柱 ①过滤所有的溶剂和样品 ②使用保护柱 ③仪器在使用完毕，要冲洗整个系统，移走系统中缓冲液 ④在适当的溶剂中保存柱子 ⑤柱子在不使用时，两端密封保存 ⑥注意色谱柱的pH值使用范围 ⑦不要高压冲洗柱子 ⑧不要高温下过长时间使用硅胶键合相 3、常见色谱故障 ①
双峰 原因：柱头塌陷或柱床运动、柱前滤芯堵塞、样品量过大、进样器流路存在分叉流路 ②
基线噪音、基线漂移 原因：检测池脏、灯能量下降、流动相脏、温度不稳定 ③
鬼峰、柱外扩散、峰扩展、拖尾峰、前伸峰、负峰 原因：流动相尤其水脏、连接接头不匹配、进样体积大、色谱柱过载、溶解样品溶剂通过色谱柱时平衡破坏 ④
压力过高、压力过低、压力波动篇二：Agilent1200 高效液相色谱仪工作站学习总结 Agilent1200 高效液相色谱仪工作站学习总结 开首语 本人在2008年 本人在日至1月11日参加广州 日至1 11日参加广州 安捷伦科技有限公司的1200高效液相色谱仪 安捷伦科技有限公司的1200高效液相色谱仪 化学工作站的学习培训，几天学习培训，使 我对1200液相色谱仪的硬件及软件有了更全 我对1200液相色谱仪的硬件及软件有了更全 面的了解和更多的认识，现在做个总结向大 家介绍如下。 硬件篇 安捷伦高效液相色谱仪1200由几部分 组成，脱气机，泵、进样器、柱温箱和检测器。 安捷伦1200HPLC系统采用积木式堆积结构，方 便用户按照自己的需要配置不同的的系统，整 个系统的流路自上而下设计、连接，减小了系 统的死体积和延迟体积。 Agilent 1200HPLC系统堆叠方式 脱气机 安捷伦1200系列在线脱气机有，微量真空 脱气机G1379B、标准真空脱气机G1322A。原理 基本相同，就是使用半透膜管路，允许气体分 子通过，液体分子无法通过。A型用的是微渗 管，B型用的是滤膜。流路A型是左进右出，而 B型为下进上出，本科室使用的为A型G1322A。 使用真空脱气机可以降低噪声，保证保留时间 的重现性，与He脱气相比，更方便，更节省费 用。 真空脱气机脱气原理泵 安捷伦1200系列泵有： 单元泵：G1310A、 四元泵：G1311A、 二元泵：G1312A、 二元泵SL型：G1212B。 单独一个泵腔 泵腔无法满足溶剂传输系统的要 泵腔 求：连续性、稳定性都不符合标准，现在新购 仪器中已很少考虑。 单元泵，按溶剂的传输系统有两种，一种是并 联柱塞泵，另一种是串连柱塞泵。并联柱塞泵 由于两个泵的相位不同，可以补偿流量脉冲， 但由于单向阀的数量增多，所以容易造成泄漏， 增加了维护使用的难度。串连柱塞泵左泵腔的 活塞运动速度为右泵腔活塞的2倍，因此，相同 时间内，左泵提供的流量为右泵的两倍，左泵 提供的溶剂一半直接供给系统，另一半被右泵 吸入，稍后供给液相系统，减少了单向阀的用 量，可以使用压缩因子补偿。 四元泵，其实就是比单元泵多了四元比例阀。 由单元泵可以升级到四元泵，除了要加上四元 比例阀外，还要更换主板。需要注意的是，当 使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到 四元比例阀下面的通道上，有机溶剂接到上面 的通道上。如果经常使用盐溶液，建议定期用 水冲洗所有的通道以去除阀口上可能出现的盐 沉淀。 四元泵的工作原理 二元泵，有两个泵头，特点是高压混合，无需 脱气；对于有强紫外吸收的流动相，使用静态 混合器可以降低基线噪声；可以选择溶剂切换 阀自动进行溶剂切换；对于高盐流动相，可选 择泵头密封垫清洗装置。所以脱气机不是标准 配置，但增加真空脱气机，流量范围可以从 0.5～5ml/min扩展至0.05～5ml/min；加入静态 混合器，使流动相混合更加均匀；如果配置 溶剂切换阀，则两个泵头可分别控制两种溶剂， 类似四元比例阀，但并不完全一样，只能同时 混合两种溶剂，不可实现四种溶剂的同时使用。 二元泵为高压泵，为后混合式，精度更高， 而且由于为高压混合，产生的气泡也更少，所 以价格也比四元泵贵得多。四元泵为低压泵， 流速稳定性相对较差，低压混合容易产生气泡， 在实验中常会遇到这样的问题，多元 混合中出现流动相不稳定的现象，特别是流动 相配比较低的如小于1%，其多元混合效果难以 达到我们的要求，造成保留时间漂移，甚至得 不到我们预期的色谱峰。明白四元泵的低压混 合的道理，实际操作中我们发现问题时，有助 于我们对原因的分析。 必要时泵可以拆御，更换密封垫及滤芯。 对容易出故障部位及处理方法，比如宝石 活塞杆是不能超声的部件，泵头密封垫要成对 更换，实验室中至少应备有一付 号泵头密封 室中至少应备有一付4号泵头密封 室中至少应备有一付 垫，部件号为：（用于反相色谱）； 部件号为： （用于反相色谱）； （用于正相色谱）。同时实验室应备 （用于正相色谱）。同时实验室应备 ）。 过滤芯， 有5-10个PTFE过滤芯，以备日常所需。判断方 个 过滤芯 以备日常所需。 法为，打开冲洗阀，以水为溶剂， 法为，打开冲洗阀，以水为溶剂，流速 5ml/min，系统压力大于10bar就应更换过滤白 ，系统压力大于 就应更换过滤白 头了。 头了。 二元泵的工作原理 进样器，安捷伦1200系列进样器有： 标准自动进样器G1329A、 高性能进样器G1367A、 高性能进样器SL型G1367B、 手动进样器G1328B。 自动进样器的特殊功能，洗针功能可以把 样品残留降低到最小限度；多次吸液用于进样 量大于100μl的情况；程序进样可以非常灵活 地执行用户的进样程序要求，如多种样品自动 混合，自动进样等高级功能的自由设置，但是， 由于进样针的扩散，所以进样量越小，受到扩 散的影响也越大，所以自动混合的准确度还是 难以达到容量瓶的混合方式。这在做标准由线 时得注意的问题，如为定量则不推荐小样量的 混合方式。 程序进样方式设置如下图： 第一步：设置进样 第一步： 器 第二步： 第二步：使用进样器程 序（U） 第三步：更多信息（功能项） 第三步：更多信息（功能项） 对于手动进样器，必须了解六通阀的工作原理， 应特别注意的是进样量少于定量环的50%或大 于定量环的3-5倍量是比较准确的，不过，大家 用自动进样器已经习惯了，如果再用回手动进 样器会不会有些郁闷？会不会有一种坐惯了宝 马又要回到踩单车的感觉？ 柱温箱，使用安捷伦柱温箱可以保证柱的稳 定性，从而保证了保留时间的重现性。恒定的 柱温特别是日温差大的时候更为必要。 检测器，安捷伦1200系列检测器有，可 变波长检测器G1314B、二极管阵列检测器 G1315B、二极管阵列检测器SL型G1315C、示 差折光检测器G1362A、荧光检测器G1321A。 本所用的是VWD的G1314B型，DAD型及FLD的就 不多说了。对VWD型检测器应了解它的工作原 理，氘灯的使用维护及更换。需要注意的是， 使用中不要频繁的开关氘灯，否则影响氘灯 的寿命。 可以利用诊断方式来检测氘灯的能量，当然， 发现氘灯能量降低时不要马上得出氘灯应该更 换的结论，这也许是流通池脏或有气泡造成的 能量降低，所以必须用诊断方式检测流通池。 诊断结果大于0.6说明流通池很干净，小于0.2则 说明流通池该清洗了。更换氘灯后要在诊断日 志中填写更换氘灯，这样氘灯的使用时数便从 零开始。 这里还有一点得注意的是流通池的后压力非常 重要，一定要使用适当出口连接管，出口管线 要使用专用废液管为系统提供适当的后压，不 得私自将废液管截短，以防气泡进入流通池。 但如果压力过高，流通池的石英窗片可能破裂。 在这里我要说的是，对安捷伦1200高效液 相色谱仪正确的操作方法和定期的维护保养的 是很重要的。篇三：液相色谱培训讲义(good) 液相色谱培训讲义(五)
发布日期： 第五章 输液泵
概述 高压输液泵是液相色谱仪的关键部件，其作用是将流动相以稳定的流速或压力输送到色谱系统。对于带在线脱气装置的色谱仪，流动相先经过脱气装置再输送到色谱柱。输液泵的稳定性直接关系到分析结果的重复性和准确性。 1、对输液泵的基本要求 流量准确可调。对于一般的分析工作而言，流动相的流速在0.5～2mL/min，输液泵的最大流量一般为5～10mL/min。输液泵的流量控制精度通常要求小于±0.5%。输液泵必须能精确地调节流动相流量，这可以通过电子线路调节电机转速或冲程长短来实现。流量的测定通常采用热脉冲流量计。 耐高压。高效液相色谱柱是将很细颗粒（3～10μm粒径）的填料，在高压下填充到柱管中的，为了保证流动相以足够大的流速通过色谱柱，需要足够高的柱前压。通常要求泵的输出压力达到30～60MPa的高压。 液流稳定。输液泵输出的液流应无脉动，或配套脉冲抑制器。 泵的死体积小。为了快速更换溶剂和适于梯度洗脱，泵的死体积通常要求小于0.5mL。泵的结构材料应耐化学腐蚀。 2、输液泵分类 输液泵按输出液恒定的因素分恒压泵和恒流泵。对液相色谱分析来说，输液泵的流量稳定性更为重要，这是因为流速的变化会引起溶质的保留值的变化，而保留值是色谱定性的主要依据之一。因此，恒流泵的应用更广泛。 输液泵按工作方式分为气动泵和机械泵两大类。机械泵中又有螺旋传动注射泵、单活塞往复泵、双活塞往复泵和往复式隔膜泵。几种输液泵的基本性能总结于表5-1。 表5-1 几种高压输液泵的性能比较 第二节
各种泵 一、 活塞型往复泵 活塞型往复泵是液相色谱仪中使用最广泛的一种恒流泵。 单活塞往复泵：如图5-1所示，在活塞柱的一端有一偏心轮，偏心轮连在电动机上，电动机带动偏心轮转动时，活塞柱则随之左右移动。在活塞的另一端有上下两个单向阀（图5-3），各有1～2个蓝宝石或陶瓷球，由其起阀门的作用。下面的单向阀与流动相连通，为活塞的溶液入口；上面的单向阀与色谱柱相连，为活塞的溶液出口。活塞柱与活塞缸壁之间是由耐腐蚀材料制造的活塞垫，以防漏液。活塞向外移动时，出口单向阀关闭，入口单向阀打开，溶液（流动相）抽入活塞缸。活塞向里移动时，入口单向阀关闭，出口单向阀打开，流动相被压出活塞缸，流向色谱柱。这种单纯往复式单活塞泵构造简单、价格便宜。活塞的移动距离是可变的，流量由活塞的移动距离所决定。因为偏心轮一般每分钟转50～60次，也就是流动相的抽入和吐出以每分钟50～60次的频率周期性变化，所以，产生的脉冲很显著。减缓脉冲的办法就是在泵出口与色谱柱入口之间安装一个脉冲阻尼器。脉冲阻尼器的种类很多，但其共同特征是具有一定的容积和弹性。最常见和最简单的脉冲阻尼器是将内径0.2～0.5mm的不锈钢管绕成弹簧状，利用其绕性来阻滞压力和流量的波动，起到一定的缓冲作用。为了减小谱带展宽，也为了便于清洗和更换流动相，阻尼器的体积应尽可能小。
图5-1单柱塞泵系统图5-2 SERIES III 泵 图5-3 单向阀示意图 双活塞往复泵： 如图5-4所示，双活塞往复泵有一个精心设计的偏心凸轮，用同步电机或变速直流电机驱动偏心凸轮，偏心凸轮再推动两活塞作往复运动。偏心凸轮短半径端所对应的活塞向外伸，使该活塞的下单向阀打开吸入流动相，与此同时，偏心凸轮的长半径端所对应的另一活塞被推入，使其上单向阀打开，并将流动相送至色谱柱。于是，两活塞交替伸缩，往复运动，获得的排液特性具有稳定的输出流量，这样就能避免单活塞泵液流脉冲的问题。图5-4 双柱塞泵系统