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阅读有关资料，回答有关微生物传染病和微生物培养的问题．肺结核是一种最常见的呼吸道传染病．目前世界卫生组织（WHO）统计表明，全世界每年有300万人死于该病，我国是世界上结核疫情最严重的国家之一．资料一：引起肺结核的结核分歧杆菌不分泌毒素，通过飞沫、尘埃等被吸入呼吸道并进入肺泡，被巨噬细胞吞噬，在巨噬细胞内繁殖，造成细胞崩溃，释放出大量结核分歧杆菌，由此引起肺泡炎症．资料二：人体感染结核分歧杆菌后3-6星期，产生细胞免疫，病灶出现干酪样坏死，并被上皮样细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、淋巴细胞包围，形成结核结节，其中的病原菌因缺氧而处于休眠状态．此时，约有90%以上的原发性感染形成钙化，病人不治自愈．（1）传染性肺结核病的传播途径主要是A&A．空气传播&& B．接触传播&& C．媒介物传播&& D．病媒传播（2）结核分歧杆菌不是通过分泌细菌毒素而引起感染者出现显性感染，那么该致病菌的致病机理是病原菌在组织中大量繁殖，引起炎症、损伤和破坏组织．&．（3）引起肺结核的结合双歧杆菌的代谢方式属于D&A．自养需氧型&& B．自养厌氧性&& C．异养厌氧型&& D．异养需氧型（4）人体主要通过细胞免疫抵抗肺结核病．该种免疫方式中针对病原菌的宿主细胞发挥作用的免疫细胞和免疫物质分别是致敏T淋巴细胞和淋巴因子&．资料三：由于抗生素的发现和应用，肺结核传染病曾受到控制．但是，由于抗生素的滥用和该种病原菌耐药性的提高，以及艾滋病的蔓延，20世纪90年代以来结核病有卷土重来之势．（5）你认为艾滋病的蔓延使肺结核传染病发病率提高的原因是艾滋病病毒主要侵染的是人体T淋巴细胞，大量T细胞的死亡使抵抗结核双歧杆菌的细胞免疫力减弱甚至丧失细胞免疫能力&．为探究结合双歧杆菌的耐药性，研究者首先对从患者体内提取的病原菌进行培养（如图甲）．（6）如图乙是经过过程①即细菌纯化培养结果．据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是①③②&（用编号表示）．研究者在图甲过程③的操作培养过程中，得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板．该接种方法是平板涂布法&；推测接种时可能的操作失误是涂布不均匀&．（7）每一次实验前实验室需要经过严格的消毒灭菌创造无菌条件外，为预防接种过程中研究者本身受病原菌感染，你认为研究者还应该采取的防护措施有戴好防护口罩、穿好防护工作服、实验结束用肥皂洗手并冲洗干净、脱下的工作服要消毒灭菌等&（至少写出实验前和实验后各一项措施）．
本题难度：一般
题型：填空题&|&来源：2014-崇明县一模
分析与解答
习题“阅读有关资料，回答有关微生物传染病和微生物培养的问题．肺结核是一种最常见的呼吸道传染病．目前世界卫生组织（WHO）统计表明，全世界每年有300万人死于该病，我国是世界上结核疫情最严重的国家之一．资料一：引起肺结...”的分析与解答如下所示：
肺结核是呼吸道传染病，主要通过飞沫和尘埃传播，由结合双歧杆菌引起，其代谢方式从同化作用看为异养型，从异化作用看属于需氧型，结核分歧杆菌在组织中大量繁殖，引起炎症、损伤和破坏组织．在细胞免疫中，起主要作用的为T淋巴细胞及其分泌的淋巴因子．培养微生物接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线时每一次都应从上一次的末端开始，从而达到分离菌种的目的，为预防接种过程中研究者本身受病原菌感染，要严格遵守无菌操作．
（1）肺结核是呼吸道传染病，结核杆菌主要通过呼吸道传染，肺结核的传播主要是通过飞沫和尘埃传播．（2）由于结核分歧杆菌不是通过分泌细菌毒素而引起感染者出现显性感染，故应为病原菌在组织中大量繁殖，引起炎症、损伤和破坏组织．（3）结合双歧杆菌的代谢方式从同化作用看为异养型，从异化作用看属于需氧型．（4）细胞免疫主要是T淋巴细胞和靶细胞结合裂解的过程，故在细胞免疫中，起主要作用的为致敏T淋巴细胞及T淋巴细胞分泌的淋巴因子．（5）由于艾滋病病毒主要侵染的是人体T淋巴细胞，故艾滋病患者T细胞大量死亡，使细胞免疫功能降低，从而使抵抗结核双歧杆菌的细胞免疫力减弱甚至丧失．（6）平板划线时每一次都应从上一次的末端开始，且划完后要灼烧接种针，以保证每次的菌种来自上次的末端，从而达到分离菌种的目的，故划线顺序为①③②，图丙菌落分布不均匀，很可能是由于平板涂布不均匀造成的．（7）为预防接种过程中研究者本身受病原菌感染，要严格遵守无菌操作，需采取的防护措施有戴好防护口罩、穿好防护工作服、实验结束用肥皂洗手并冲洗干净、脱下的工作服要消毒灭菌等．故答案为：（1）A（2）病原菌在组织中大量繁殖，引起炎症、损伤和破坏组织（3）D（4）致敏T淋巴细胞和淋巴因子（5）艾滋病病毒主要侵染的是人体T淋巴细胞，大量T细胞的死亡使抵抗结核双歧杆菌的细胞免疫力减弱甚至丧失细胞免疫能力（6）①③②平板涂布法&&涂布不均匀（7）戴好防护口罩、穿好防护工作服、实验结束用肥皂洗手并冲洗干净、脱下的工作服要消毒灭菌等
本题综合考查了肺结核的致病原因和机理以及微生物的培养，考查了学生综合运用知识和理解能力，试题难度中等．
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肺结核结核病是由引起的慢性传染病，可累及全身多个脏器，但以肺结核（pulmonarytuberculosis）最为常见。排菌病人是社会 。人体感染结核菌后不一定发病，仅于抵抗力低时方始发病。本病病理特点是结核结节和干酪样坏死，易于形成空洞。除少数可急起发病外，临床上多呈慢性过程。常有低热、乏力等全身症状和咳嗽、咯血等 表现。20世纪50年代以后，中国结核病总的疫情虽有下降，但由于人口众多，各地区控制疫情不均衡，它仍为一个重要的公共卫生问题，是全国十大死亡病因之一。
结核病是古老的疾病，至少可溯至新石器时代，在世界各地的历史上都不乏有死于肺结核的名人，比如发明听诊器的法国医师雷纳克、演出电影《乱世佳人》的英国演员费雯丽、日本作家石川啄木以及台湾早期小说家钟理和等。历代名医对结核病都有深刻的认识。明代的李梃《医学入门》指出肺痨六大主症为：“潮、汗、咳嗽，或见血，或遗精”。清朝人李用粹《证治汇补》对结核病的描述：“痨瘵外候，睡中盗汗，午后发热，烦躁咳嗽，倦怠无力，饮食少进，痰涎带血，咯唾吐衄，肌肉消瘦”。1882年，德国医师柯霍（Robert&Koch）首次发现结核菌。1921年，爱伯特·卡脉特与介岚发明了卡介苗（BCG），用来预防肺结核，但其成效在近三十年来倍受质疑。1944年链霉素（Streptomycin）发明，是为第一个有效的抗结核药物。虽然新的抗结核药物陆续被发展出来，然而结核病仍然是棘手的公共卫生问题。全球现有6亿人，感染有结核杆菌。大多数的受感染者没有病症，称为潜伏结核感染（latent&TB&infection），但其中约5-10%的潜伏感染者会发展至活动性结核；若无适当治疗，一个活动病例平均每年可使10～15人新受感染，病例本人的死亡率则超过50%。若潜伏感染者同时罹患免疫抑制，如爱滋病，每年就有10%的病发机率。2005年全球有880万新发结核病例，160万结核死亡病例。大多数结核病例在发展中国家，其中非洲的人均发病率最高，在28%；但半数以上的病例在6个亚洲国家：、中国、、孟加拉、、菲律宾（以上依照总病例数排序；若依人均发病率排序，则为、印度尼西亚、孟加拉、巴基斯坦、印度、中国）。在撒哈拉以南非洲及某些已发展国家，患结核病的人数有上升趋势，因为不少人的免疫系统因抑制免疫力药物、物质滥用或爱滋病而受损。爱滋病的蔓延及忽视结核病控制工作令结核病再次成为一种主要的传染病。此外，多抗药性结核及广泛抗药性结核正在蔓延。世界卫生组织在1993年宣布结核病是一件全球健康紧急事件，而“终止结核伙伴”（Stop&TB&Partnership）提出“全球结核病防治计划”，其中一个目标是在2015年前把结核病死亡人数及流行程度减至1990年水平的一半。
发病机制/肺结核
结核菌入侵宿主体内，从感染、发病到转归均与多数细菌性疾病有显著不同，宿主反应具有特殊意义。结核菌感染引起的宿主反应分为4期。起始期肺结核发病机制入侵呼吸道的被肺泡巨噬细胞吞噬。因菌量、毒力和巨噬细胞非特异性杀菌能力的不同，被吞噬结核菌的命运各异。若在出现有意义的细菌增殖和宿主细胞反应之前结核菌即被非特异性防御机制清除或杀灭，则不留任何痕迹或感染证据。如果细菌在肺泡巨噬细胞内存活和复制，便扩散至邻近非活化的巨噬细胞和形成早期感染灶。T细胞反应期由介导的（CMI）和迟发性反应（DTH）在此期形成，从而对结核病发病、演变及转归产生决定性影响。共生期生活在流行区的多数感染者发展至T细胞反应期，仅少数发生原发性结核病。大部分感染者结核菌可以持续存活，细菌与宿主处于共生状态。纤维包裹的坏死灶干酪样中央部位被认为是结核杆菌持续存在的主要场所。低氧、低PH和抑制性脂肪酸的存在使细菌不能增殖。宿主的免疫机制亦是抑制细菌增殖的重要因素，倘若免疫损害便可引起受抑制结核菌的重新活动和增殖。细胞外增殖和传播期固体干酪灶中包含具有生长能力、但不繁殖的。干酪灶一旦液化便给细菌增殖提供了理想环境。即使功能健全的宿主，从液化干酪灶释放的大量结核杆菌亦足以突破局部免疫防御机制，引起播散。
疾病类型/肺结核
原发性肺结核原发性肺结核本病初期，多无明显症状。或起病时略有发热、轻咳或食欲减退；或发热时间可达2～3周，伴有精神不振、盗汗、疲乏无力、饮食减退、体重减轻等现象；也有的发病较急，尤其是婴幼儿，体温可高达39℃～40℃，持续2～3周，以后降为低热。儿童可伴有神经易受刺激、容易发怒、急噪、睡眠不好，甚至腹泻、消化不良等功能障碍表现。肺部检查多无明显的阳性体征，只有在病灶周围有大片浸润或由于支气管受压造成部分或全肺不张时可叩出浊音，听到呼吸音减低或局限性干湿罗音。血行播散性肺结核急性患者起病多急，有高热（稽留热或），部分病例体温不太高，呈规则或不规则发热，常持续数周或数月，多伴有寒战、周身不适、精神不振、疲乏无力及全身衰弱；常有咳嗽，咳少量痰，气短，肺部结节性病灶有融合趋向时可出现呼吸困难；部分病人有胃肠道症状，如胃纳不佳、腹胀、腹泻、便秘等；少数病人并存结核性脑膜炎，急性粟粒性肺结核并存脑膜炎者可占67.7%，常有头疼、头晕、恶心、呕吐、羞明等症状。亚急性血行播散性患者的症状不如急性显著而急骤；不少病人有反复的、阶段性的发热畏寒，或者有慢性结核中毒症状，如微汗、失眠、食欲减退、消瘦等；有些病人有咳嗽、胸痛及血痰，但均不严重。慢性血行播散性肺结核由于病程经过缓慢，机体抵抗力较强，代偿功能良好，症状不如亚急性明显。继发性肺结核发病初期一般可无明显症状。病变逐渐进展时，可出现疲乏、倦怠、工作精力减退、食欲不振、消瘦、失眠、微热、盗汗、心悸等结核中毒症状。但大多数病人因这些症状不显著而往往察觉不到。如病变不断恶化，活动性增大，才会出现常见的全身和局部症状，如发烧、胸痛、咳嗽、吐痰、咯血等。大叶性干酪性肺炎发病很急，类似大叶性肺炎。患者有高热、恶寒、咳嗽、吐痰、胸痛、呼吸困难、痰中带血等现象，可呈39℃～40℃的稽留热，一般情况迅速恶化，并可出现紫绀。胸部阳性体征可有胸肌紧张、浊音、呼吸音粗糙或减弱，或呈支气管肺泡音，背部尤其间部有大小不等的湿罗音等。慢性病例多数表现为慢性病容，营养低下；一般有反复出现的结核中毒症状及咳嗽、气短或紫绀等；慢性经过，病变恶化、好转与静止交替出现，随着病情的不断演变，代偿机能逐步丧失。体征可见胸廓不对称，气管因广泛纤维性变而移向患侧。患侧胸廓凹陷，肋间隙狭窄，呼吸运动受限，胸肌萎缩，病变部位叩浊，而其它部位则有肺气肿所致的“匣子音”。局部呼吸音降低，可听到支气管呼吸音或空洞性呼吸音，并有干湿罗音，肺下界可降低，心浊音界缩小。肺动脉第二音可因肺循环压力增高而亢进。有的病人可出现杵状指。 结核性胸膜炎（Ⅳ型）病侧积液，小量为肋膈角变浅，中等量以上积液为致密阴影，上缘呈弧形。活动性肺结核随访中病灶增多增大，出现空洞或空洞扩大，痰菌检查转阳性，发热等临床症状加重。随访中病灶吸收好转，空洞缩小或消失，痰菌转阴，临床症状改善。空洞消失，病灶稳定，痰菌持续转阴性（1个月1次）达6个月以上；或空洞仍然存在，痰菌连续转阴1年以上。
临床表现/肺结核
肺结核知识肺结核临床表现可因病型、病期、病变范围和患者反应性不同而异。一般说来常见的症状包括：咳嗽、咳痰、发热（多为午后低热）、咯血（自少量至大咯血）、胸痛、乏力、食欲不振、盗汗，病程长的可有消瘦，病变广泛而严重的可有呼吸困难，女性患者可有。肺部体征可因病型、病变性质、范围及有无合并症而异。原发综合征多无明显体征；急性粟粒型肺结核早期胸部无异常发现‘或仅有少量干罗音，后期可听到湿罗音，肝脾肿大；浸润型肺结核病灶范围小时常无异常体征，病变范围较大时局部可有叩浊，呼吸音减低或支气管呼吸音，病灶溶解时可有湿罗音；慢性纤维空洞型肺结核患者体检时患侧胸廓塌，陷肋间隙变窄，气管向患侧移位。病变局部叩诊浊音，呼吸音减低，有肺泡呼吸音或支气管呼吸音，并有干湿罗音。
诊断判别/肺结核
白细胞计数正常或轻度增高，血沉增快。痰结核菌采用涂片、集菌方法，抗酸染色检出阳性有诊断意义。也可行结核菌培养、动物接种，但时间长。结核菌聚合酶联反应（PCR）阳性有辅助诊断价值。结核菌素试验旧结核菌素（OT）或纯化（PPD）皮试，强阳性者有助诊断。抗体测定酶联吸附试验，血中抗PPD-IgG阳性对诊断有参考价值。胸腔积液检查腺苷脱氨酶（ADA）含量增高有助于诊断，与癌性胸腔积液鉴别时有意义 。影像学检查胸部X线检查为诊断肺结核的必备手段，可判断肺结核的部位、范围、病变性质、病变进展、治疗反应、判定疗效的重要方法 。体格检查早期病变范围小或位于肺组织深部，可无异常体征。病变范围较大，患侧呼吸运动减低。叩诊呈浊音。&
治疗措施/肺结核
药物治疗肺结核 知识应坚持早期、联用、适量、规律、全程五项原则。一线药物指用于初治病人的药物，有异烟肼、链霉素等；二线药物基本用于复治病人，包括利福平、吡嗪酰胺等。（1）早期治疗&一旦发现和确诊后立即给药治疗；（2）联用。根据病情及抗结核药的作用特点，联合两种以上药物，以增强与确保疗效；（3）适量。根据不同病情及不同个体规定不同给药剂量；（4）规律。患者必须严格按照治疗方案规定的用药方法，有规律地坚持治疗，不可随意更改方案或无故随意停药，亦不可随意间断用药；（5）全程。乃指患者必须按照方案所定的疗程坚持治满疗程，短程通常为6～9个月。一般而言，初治患者按照上述原则规范治疗，疗效高达98%，复发率低于2%。手术治疗外科手术已较少应用于治疗。对大于3厘米的结核球与难以鉴别时，复治的单侧纤维厚壁空洞、长期内科治疗未能使痰菌转阴者，或单侧的毁损肺伴支气管扩张、已丧失功能并有反复咯血或继发感染者，可作肺叶或全肺切除。结核性脓胸和（或）支气管胸膜瘘经内科治疗无效且伴同侧活动性肺结核时，宜作肺叶-胸膜切除术。手术治疗禁忌证有：黏膜活动性结核病变，而又不在切除范围之内者全身情况差或有明显心、、、功能不全。只有药物治疗失败无效时才考虑手术。手术前后病人无例外也要应用抗结核药。1993年我国胸外科在肺结核、肺癌外科手术适应证学术研讨会上，提出肺结核手术适应证如下：（1）空洞性肺结核手术适应证&①经抗结核药物初治和复治规则治疗（约18个月），空洞无明显变化或增大，痰菌阳性者，尤其是结核菌耐药的病例；②如反复咯血、继发感染（包括感染）等，药物治疗无效者；③不能排除癌性空洞者；④非典型分枝杆菌，肺空洞化疗效果不佳或高度者。（2）结核球手术适应证&①结核球经规则抗结核治疗18个月，痰菌阳性，咯血者；②结核球不能除外肺癌者；③结核球直径&3厘米，规则化疗下无变化，为相对手术适应证。（3）毁损肺手术适应证&经规则抗结核治疗仍有排菌、咯血及继发感染者。（4）肺门纵隔结核手术适应证&①经规则抗结核治疗，病灶扩大者；②灶压迫气管、支气管引起严重呼吸困难者；③病灶穿破气管、支气管引起肺不张，干酪性肺炎，内科治疗无效者；④不能排除纵隔者。（5）大咯血急诊手术适应证&①24小时量&600毫升，经内科治疗无效者；②出血部位明确；③心肺功能和全身情况许可；④反复大咯血，曾出现过窒息、窒息先兆或低血压、休克者。（6）自发性气胸手术适应证①气胸多次发作（2～3次以上）者；②胸腔闭式引流2周以上仍继续漏气者；③液气胸有早期感染迹象者；④血气胸经胸腔闭式引流后肺未复张者；⑤气胸侧合并明显肺大疱者；⑥一侧及对侧有气胸史者应及早手术 。对症治疗肺结核要积极预防1、发热：主要用抗结核药物，体温太高时可酌情给小剂量退热剂。有继发感染时可适当选用抗生素。2、盗汗：临床睡前可服阿托品或汗定片。3、咳嗽、咯痰：刺激性干咳选用、等。4、咯血 ：小量咯血严密观察，无需特殊处理。中或大量咯血时可采用如下措施：（1）一般处理：病人应取半卧位或卧向患侧，并指导病人轻轻将血咯出，不让血滞在气道。精神紧张可给镇静药。剧咳者可给，或在血咯出后，临时给可待因15mg，1~2次。（2）止血药的应用
（3）输血：反复大咯血可少量输鲜血。（4）手术治疗：反复大咯血未能控制者，如病人情况许可，在了解出血部位时可手术治疗。（5）咯血窒息：应立即采取措施恢复呼吸道通畅。应速取头低脚高体位，轻轻拍背，以利血块排出，并尽快挖出或吸出口、咽、喉及鼻部血块。必要时做气管插管或气管切开，解除呼吸道阻塞。（6）呼吸困难&&给予低流量氧气吸入。有继发感染时应用抗生素。有支气管痉孪时用支气管解痉剂。并发气胸或渗出性时给予抽气或抽液。
预防措施/肺结核
肺结核预防宣传预防结核病的发生，应做到以下几点：&1、养成不随地吐痰的良好卫生习惯。对结核病患者的痰要焚烧或药物消毒。&2、要定时进行体格检查，做到早发现、早隔离、早治疗。除此之外，还要按时给婴幼儿接种，以使肌体产生免疫力，减少结核病的发生。&3、发现有低热、盗汗、干咳嗽、痰中带血、乏力、饮食减少等症状要及时到医院检查。确诊结核病以后，要立即进行治疗，同时还要注意增加营养，以增强体质。&
病原/肺结核
在分类学上属于、、，分人型、牛型、非洲型和鼠型四型。对人类致病的主要为人型结核菌，牛型菌很少。结核菌生长缓慢，在改良罗氏上培养需4－6周才能繁殖成明显的菌落。涂片染色具有抗酸性，亦称抗酸杆菌。镜检为细小、稍弯的杆菌，对外界抵抗力较强，在阴湿处能生存5个月以上；但在烈日曝晒2小时，5％－12％来苏接触2－12小时，70％酒精接触2分钟，或煮沸1分钟，均能被杀灭。将痰吐在纸上直接烧掉是最简易的灭菌方法。结核菌含有类脂质、和多糖类。在人体内，类脂质能引起、上皮样细胞和淋巴细胞浸润而形成结核结节；蛋白质可引起过敏反应，中性粒细胞和大单核细胞浸润；多糖类则引起某些免疫反应（如凝集反应）。病灶中菌群常包括数种不同生长速度的。代谢旺盛不断繁殖的结核菌（A群）致病力强，传染性大，也易被抗结核药物所杀灭；在吞噬细胞内的酸性环境中受抑制的结核菌（B群）和偶尔繁殖菌（c群）只对少数药物敏感，可为日后复发的根源；休眠菌（D群）一般耐药，逐渐被所消灭。耐药为结核菌重要生物学特性，与治疗成败关系极大。根据耐药性的获得方式可分为天然耐药和获得性耐药。从流行病学角度则可以分为原发耐药和继发耐药，前者指从未接触过药物治疗的病人其野生结核菌株对某药不敏感，后者则指接受过药物治疗的结核病病人出现的结核菌耐药 。
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