如何用紫外吸收法测定DNA固含量测定仪

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-06-06 03:40 标签： 紫外吸收法测定蛋白质
[紫外吸收法测定DNA含量]&（一）原理&组成核酸分子的碱基，均具有一定的吸收紫外线特性，最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大吸收波长是260nm，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。&在波长260nm紫外线下，1OD值的光密度相当于双链DNA浓度&[DNA&紫外&含量&组成&吸收&核酸&蛋白质&紫外线]
（一）原理 组成核酸分子的碱基，均具有一定的吸收紫外线特性，最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大吸收波长是260nm，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。 在波长260nm紫外线下，1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml；单链DNA或RNA为20μg/ml。可以次来计算核酸样品的浓度。 分光光度法不但能确定核酸的浓度，还可通过测定在260nm和280nm的紫外线吸收值的比值（A260/A280）估计核酸的纯度。DNA的比值为1.8，RNA的比值为2.0。若DNA比值高于1.8，说明制剂中RNA尚未除尽。RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。当然也会出现既含蛋白质又含RNA的DNA溶液比值为1.8的情况，所以有必要结合凝胶电泳等方法鉴定有无RNA。或用测定蛋白质的方法检测是否存在蛋白质。紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液。对于很稀的溶液可采用荧光光度法。 （二）操作 取DNA样品作适当稀释，配制成5~50ug/ml的溶液，用紫外测定260nm处的光密度值（OD260），按下列公式计算，求出该样品的DNA含量。 DNA浓度（ug/ml ）=OD260/0.02×L×稀释倍数 （L为的厚度（光径），一般为1cm。）
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等你回答的问题：利用紫外分光光度计进行DNA含量测定的原理是 A．紫外线能使DNA复制差错 B．DNA分子不吸收紫外线 C．紫外线下容易观察到DNA分子的结构 D．DNA能强烈吸收260nm的紫外线 题目和参考答案——精英家教网——
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利用紫外分光光度计进行DNA含量测定的原理是（&&& ） A．紫外线能使DNA复制差错&&&&&&&&&&&&&&& B．DNA分子不吸收紫外线 C．紫外线下容易观察到DNA分子的结构&&&&& D．DNA能强烈吸收260nm的紫外线
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科目：高中生物
来源：学年湖北孝感高三第二次统一考试生物试卷（解析版）
题型：综合题
利用发光细菌，对海水是否受到重金属污染及其污染程度，可以进行生物监测。请完善下列实验设计，并回答问题。（一）实验原理：生活在海洋中的发光细菌，当海水受到重金属污染时，其代谢会受到影响，导致发光受到抑制，其抑制的程度可用抑光率（发光被抑制的百分率）来表示。（二）实验材料及器具：发光细菌悬液、受重金属污染的海水水样、３％ＮａＣｌ溶液、荧光分光光度计（用于测定细菌发光强度）、试管等。（三）实验步骤：（１）按下表配制各组溶液：（２）完善实验步骤：１号试管中应加入：３％ＮａＣｌ溶液、海水水样、发光细菌悬液分别为???????? 、??????? 、???????? ｍＬ。（３）各试管摇匀，培养１５ｍｉｎ后，利用荧光分光光度计进行测定。（４）记录????????????????????????????? 。（四）实验结果处理：（１）计算相对抑光率。按照公式：相对抑光率＝??????????????????????????????????
计算各组相对抑光率。（２）假如实验结果如图所示，则直角坐标系的横坐标名称是???????????????????? ，纵坐标名称是　　　　　　　　。（３）根据坐标图，填写表格如下：（五）结论：根据表格所示的假设实验结果，可以得出的结论是：海水水样　　　　　　　　　　　　　　　。&#xa0;
科目：高中生物
来源：学年浙江衢州一中高三上期期中考试生物卷（解析版）
题型：综合题
（10分）绣线菊是一种常见的园林栽培灌木，花色绚丽，品种繁多。为研究金山绣线菊和金焰绣线菊对弱光照的耐受能力，研究者完成实验得到如下结果。（1）研究者利用遮荫网控制不同组别的透光程度，对照组应采取的处理是&&&&& 。各处理条件下，图中所示有机物积累量最多的时刻是&&&&& 。（2）处理条件为&&& 时，两种绣线菊光合速率在全天只出现一次高峰，此条件主要影响光合作用发生在& &&&&部位的&&&&& 阶段。（3）恢复处理是指撤掉遮荫网，常规条件培养15天后测定的指标。从图1两种绣线菊恢复处理的曲线可知，对弱光耐受能力更强的是&&&&& 绣线菊，理由是&&&&& 。（4）本实验每种处理条件几乎都在12:00左右出现“低谷”，此时细胞间隙中的&& 不足，直接产物&&&&&&&&&&下降。（5）若想进一步研究不同透光处理是否影响叶片中光合色素的种类和含量，实验操作步骤应包括&&& （填选项前的符号）。a．称取等量各组叶片分别加入等量无水乙醇，用研磨过滤法获取色素提取液b．制作各组叶片临时装片放在显微镜下观察c．用紫外分光光度计测定色素提取液的紫外吸收光谱d．利用毛细吸管反复多次向滤纸条上转移色素提取液e．利用移液管在无菌条件下向滤纸条上转移色素提取液f．将带有色素提取液的滤纸条底端浸于层析液中一段时间g．比较各组滤纸条上色素条带的数量、宽度和颜色差异&
科目：高中生物
来源：2013届浙江省高二上学期期中考试生物（理）试卷
题型：综合题
研究发现，酸雨除了破坏叶绿体的结构外，还能破坏叶绿体中的色素。为了比较不同色素对酸雨的敏感程度，科研人员设计了如下实验。请完善实验过程并回答相关问题：实验器材：长势相同的2年生龙眼植株、质量分数为98%的硫酸、蒸馏水、722分光光度计、研钵、试管、滴管等实验步骤：⑴模拟酸雨处理叶片：①利用质量分数98%的硫酸和蒸馏水配置PH分别为4.5、4.0、3.5、3.0、2.5的模拟酸雨。②取6支试管，编号，分别加入10ml不同PH的模拟酸雨和&&&&&&&&&&&&&&&&&&。③用打孔器取龙眼叶圆片若干，然后向每支试管中各加入圆片50片。④在适宜光照和温度下处理适宜时间后，取出叶圆片，用蒸馏水冲洗3次后待用。⑵色素的提取和含量测定：①将每支试管中的50片叶圆片放入研钵中，向研钵中加入&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&，再各加入10ml&&&&&&&&&&&&&，进行迅速、充分的研磨。②将研磨液迅速倒入基部放有单层尼龙布的漏斗中过滤，将滤液分别收集到另6支试管中，试管口用棉塞塞严，以防&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。③利用722分光光度计分别间接测定6支试管滤液中相关色素的含量，并记录在表中。实验结果：
模拟酸雨的pH值
各种色素的含量（ug.cm-2）
类胡萝卜素
分析结果得出结论：&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。&
科目：高中生物
如果使用紫外分光光度计对蛋白质和核酸进行定性或定量分析，需要将波长调到： A．蛋白质是260nm，核酸是280nm B．蛋白质是280nm，核酸是260nm C．都是260nm D．都是280nm
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