MTT法和CCK8法检测细胞活性之测试条件比较_图文_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
MTT法和CCK8法检测细胞活性之测试条件比较
上传于||暂无简介
阅读已结束，如果下载本文需要使用1下载券
想免费下载本文？
定制HR最喜欢的简历
下载文档到电脑，查找使用更方便
还剩1页未读，继续阅读
定制HR最喜欢的简历
你可能喜欢问题标题回答数提问时间
Copyright (C) 1998 -
琼ICP备号-6 爱康版权所有
本网站敬告网民：身体若有不适，请及时到医院就诊。关注今日：22 | 主题：468975
微信扫一扫
扫一扫，下载丁香园 App
即送15丁当
【资源】常用细胞凋亡检测方法&[精华]
页码直达：
学习了~~请问各位大师们，做凋亡收集细胞时消化用的胰酶可以含EDTA吗？由于我做的是贴壁细胞，传代时试过用不含EDTA的0.25%胰酶消化，时间较长（至少15min）且消化不完全，很担心在做凋亡时消化时间过长引起假阳性。但是查看了资料说是EDTA会影响PI染料的效果，请问有什么解决方法吗？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
不错，谢谢！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
超级赞！对我们这些入门菜鸟帮助超大！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
另外。。希望主任能够帮忙指导一下。我目前在做microRNA对5FU的药效调控。做完CCK8得到了 control/mimic/inhibitor 三组的IC50想请问主任，接下来测细胞凋亡，加药的时候要按什么浓度来家？凋亡实验的搭配应该是怎么样的？TUNNEL目前已确定要做。。流式、western检测BCL2 BAX CASPASE3是否有必要一起做呢？是的话这些实验之间有什么相关性吗？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
你们看到材料了么？为什么我只看见大家讨论呢？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
灰常感谢！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
学习了！我现在也是正准备进行凋亡实验，半路出家，基础不扎实，才看到主任11年前发的帖子，相见恨晚啊！有几个问题想请教一下主任：我现在买了33258的染料和Annexin V-FITC early Apoptosis kit，准备先做个荧光观察，然后用流式检测，您看这样是否合适？另外，以您的经验，做凋亡一般需要做您上面提到的那些实验就比较完全了呢？
我的课题是药物抗肿瘤的机制研究，主要集中在凋亡和自噬方面，非常感谢！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
细胞凋亡的链接打不开哦！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我也是初学者，想观测线虫凋亡细胞，用了吖啶染色，但看不出凋亡细胞，想问问是否可以选用AO/EB或其他的染色剂？我是活体未进行解剖观察
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我也没看到材料呢，是什么情况，哪位老师指点一二，不胜感激。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
老师您好：
我做的是脓毒症造模
最后测脾细胞凋亡率的我想问，脓毒症造模成功后，本身不就是细胞的体内的凋亡吗？用Annexin V法可以吗？另外，要保证无菌的话，腹腔粪便感染本身就是污染的
再怎么提取也不能保证是无菌的。。。关键是我用Annexin V法操作，不知是不是本身的技术操作，用力过大，总之结果是失败的
，没有染上色请老师指点
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
老师您好：
我做的是脓毒症造模
最后测脾细胞凋亡率的我想问，脓毒症造模成功后，本身不就是细胞的体内的凋亡吗？用Annexin V法可以吗？另外，要保证无菌的话，腹腔粪便感染本身就是污染的
再怎么提取也不能保证是无菌的。。。关键是我用Annexin V法操作，不知是不是本身的技术操作，用力过大，总之结果是失败的
，没有染上色请老师指点
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
老师您好：
我做的是脓毒症造模
最后测脾细胞凋亡率的我想问，脓毒症造模成功后，本身不就是细胞的体内的凋亡吗？用Annexin V法可以吗？另外，要保证无菌的话，腹腔粪便感染本身就是污染的
再怎么提取也不能保证是无菌的。。。关键是我用Annexin V法操作，不知是不是本身的技术操作，用力过大，总之结果是失败的
，没有染上色请老师指点
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
有用，谢楼主
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
大赞,经典的帖子永远景点，我辈初出茅庐，真的太需要大师们的指点了，不胜感激。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
马克。。。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]是存在于真核细胞中催化聚ADP核糖化的细胞核酶，其参与的聚ADP核糖化是真核细胞中蛋白质翻译后的重要修饰方式之一。PARP-1在DNA修复和细胞凋亡中发挥至关重要的作用。在凋亡过程中，PARP-1由116 kDa被切割成85 kDa，催化NAD-依赖的多聚（ADP-核糖）（PAR）往各自质膜以及核蛋白上的聚合。总而言之，PARP在DNA损伤修复与细胞凋亡中发挥着重要作用。**捷向您推荐美国Trevigen的一款通用检测试剂盒。该试剂盒是检测凋亡前与凋亡中细胞提取液中PARP活性的理想方案，操作简单，重复性高。其通过检测96孔板上生物素标记的多聚ADP核糖聚合到邻近组蛋白的反应，从而确定已知的或可能的PARP抑制剂。试剂盒中的依托泊苷（Etoposide）是拓扑异构酶Ⅱ抑制剂，在拓扑异构酶Ⅱ切割完DNA后能够稳定该酶。在试剂盒中，依托泊苷作为凋亡诱导的对照参与检测。产品名称及描述品牌货号产品说明HT Colorimetric PARP Apoptosis Assay KitTrevigen-KHT Chemiluminescent PARP/Apoptosis Assay KitTrevigen-K 通量PARP/凋亡分析试剂盒可广泛应用于1）检测原代、肿瘤等细胞的PARP活性；2）检测凋亡前后的PARP活性；3）利用细胞裂解液筛选PARP抑制剂。试剂盒特色比色法/化学发光法，无放射性输出。96well，高通量检测。极大地节省了分析时间，提高了使用效率。高敏感性。能够检测到500个细胞中低至0.1mU的PARP。检测范围广。0.1-10mU。样本用量少。仅仅需要10-100ng的提取物。检测时间短。仅需要3h即可完成检测。**捷向您提供一站式的PARP相关实验解决方案，除了高通量PARP/凋亡分析试剂盒，还有(PDAII)和通用PAPR分析试剂盒外(含组蛋白包被可拆卸板)，以及相关抗体和重组蛋白。Trevigen是一家快速成长的美国生物技术公司，专注于细胞凋亡、DNA损伤和修复、肿瘤细胞功能与行为等方面研究的肿瘤研究产品和服务。作为 Trevigen在中国区域的总代理，**捷与Trevigen一道为中国的科研工作者提供最好、最新的氧化应激、细胞损伤和肿瘤细胞行为研究等领域内的 优质产品和技术服务。如果您对上述产品及方案感兴趣，请致电400-至**捷科技有限公司 垂询血管生成研究的相关实验解决方案，或索取最新的产品资料。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
谢谢，动画好形象
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
太好了，很受用,
。赞。。。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
很全面，学习了！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
学习了，谢谢楼主，你是我的天使
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
yj1984ren edited on
学习了，感谢分享
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
收藏了，谢谢
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
好厉害 总结很好
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
学习啦，讲的太好啦
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
丁香园准中级站友
学到了，有用！！！！太感谢各位战友了！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
楼主，您好。想咨询一下：凋亡诱导增加的情况下，t-caspase3 就应该减少，而cleaved caspase3 增加，对吗？然而我的实验目前的结果是使用药物干预神经细胞后，t-caspase3 和cleaved caspase3 表达均下调。结合您上面所说的，我可不可以理解为药物干预后我的细胞处于凋亡晚期或者已经死亡？因为没有做CCK检测细胞活性。我计划缩短药物干预时间再检测t-caspase3 和cleaved caspase3 表达的变化，您觉得可行吗？还想请教您，当细胞处于凋亡晚期或者已经死亡时，cleaved caspase3 表达下调时，t-caspase3 的表达情况会改变吗？谢谢您，盼回复！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我这里有流式电子书
可以到我的帖子里留言索取 ,跟交流。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我这里有凋亡的相关资料哦，方便的话加我QQ，私发给你们哦！！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
关于丁香园细胞表现出凋亡那么它的cck8值会有改变吗
做个实验看看吧
为您推荐：
其他类似问题
扫描下载二维码关注今日：22 | 主题：468975
微信扫一扫
扫一扫，下载丁香园 App
即送15丁当
【求助】cck8实验问题
页码直达：
这个帖子发布于6年零191天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我做了一次，因为我的细胞增殖速度很慢，培养24h基本没有增殖。所以我铺板的细胞密度挺大的，每孔3*10五次。铺板后第二天换低血清培养基，1%浓度，饥饿培养24h。第三天，配好药物浓度梯度，加药。培养24h。第四天，因为我的药物是重金属离子，跟CCK8会有强烈的反应，我就先把原培养液吸出，很小心的尽力吸干净，我没有用PBS冲洗，因为我怕冲洗会冲洗掉细胞。接着加入100ul培养基每孔，再加入10ulCCK8每孔。孵育后半个小时，1个小时，2小时，4小时都在酶标仪上检测了。我的第一个问题是：我的药物是致细胞凋亡的，有没有饥饿培养的必要呢？第二个问题是：我的检测结果正常组OD值在0.5~0.4之间，加药组最低0.29，空白（只有培养基和CCK8）是0.27左右。这样的实验结果可信么？OD值范围是多少比较合适呢？必须要做OD和细胞数的标准曲线么？
不知道邀请谁？试试他们
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
有没有人能帮帮我啊，很着急啊，谢谢啦！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
其实我觉得不需要饥饿，你换低血清培养基和饥饿，细胞状态也会不好的，贴壁细胞用PBS洗不太容易洗掉细胞的 还有你的OD值 太低了 试着加细胞浓度 或者你看看你的细胞状态吧 OD值太高或太低都不是很可信得
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我在镜下观察看到细胞是很多的，但是不知道为什么检测出来的OD值就很低了……
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
药物跟CCK8反应，没洗板子。 致使显色太低？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
diablohtj 药物跟CCK8反应，没洗板子。 致使显色太低？但是我的正常组也是0.4-0.5之间的啊。我想可能是细胞种的太多了，密度太大，导致细胞状态不好。我再铺了一块板，这次没有饥饿培养的过程，加药24小时后镜下观察发现，加药组从低到高跟正常对照组基本没有变化。现在只能继续再放一会，明天很早去看看，会不会是作用时间不够啊……细胞饥饿培养会有这么大的影响么？我想了又想，这次跟上次的实在是无差别，只有去掉了饥饿培养这一步。那我的药对细胞的杀伤作用岂不是很小？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
还有，我这次铺板的密度是10四次方/孔。镜下观察细胞占了孔面积的约60%。希望各位有经验的帮帮我啦。多谢！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
有么有人能帮帮我啊，求助！
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
nichn 我做了一次，因为我的细胞增殖速度很慢，培养24h基本没有增殖。所以我铺板的细胞密度挺大的，每孔3*10五次。铺板后第二天换低血清培养基，1%浓度，饥饿培养24h。第三天，配好药物浓度梯度，加药。培养24h。第四天，因为我的药物是重金属离子，跟CCK8会有强烈的反应，我就先把原培养液吸出，很小心的尽力吸干净，我没有用PBS冲洗，因为我怕冲洗会冲洗掉细胞。接着加入100ul培养基每孔，再加入10ulCCK8每孔。孵育后半个小时，1个小时，2小时，4小时都在酶标仪上检测了。我的第一个问题是：我的药物是致细胞凋亡的，有没有饥饿培养的必要呢？第二个问题是：我的检测结果正常组OD值在0.5~0.4之间，加药组最低0.29，空白（只有培养基和CCK8）是0.27左右。这样的实验结果可信么？OD值范围是多少比较合适呢？必须要做OD和细胞数的标准曲线么？我想请教下你是如何很小心的尽力洗干净的而减少细胞丢失的呢？谢谢哈
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
你那个细胞增殖慢的话可以把细胞多培养两天，这样细胞状态也更好，不妨试下
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
30万细胞od值才才那么……太小了吧
不知道楼主后期做的结果怎么样？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
关于丁香园