肝脏组织匀浆液制作为什么用丙酮洗

为什么高中生物中实验提取叶绿素要用丙酮不用其他有机溶剂
阿生哥00274
叶绿素的提取 ▲ 将新鲜菠菜(Spinacia)叶片洗净擦干,去叶柄及叶脉.称取样品 8g,剪碎置研钵内,加入 8cm3丙酮及少许固体碳酸钠,迅速研磨成匀浆;然后再加入 20cm3丙酮充分研磨.▲ 在一玻璃漏斗底部垫一小团脱脂棉,将匀浆通过脱脂棉过滤至已装有 20cm3石油醚的分液漏斗中,再用少量的丙酮冲洗叶片残渣及研钵,合并滤液.▲ 沿分液漏斗的壁小心加入 40cm3蒸镏水,轻轻摇动,使色素转移到上面的石油醚层静置数分钟,待分层清楚后弃去下面的丙酮一一水层.如发生乳化现象可加入 2-3cm3饱和NaCl 溶液.▲ 在分液漏中再加入 40cm3蒸镏水,轻轻摇动,以洗去石油醚中残留的丙酮,共洗两次.然后将叶绿素的石油醚提取液放入具塞锥形瓶中,置暗处或用黑纸包好备用.
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生化2实验(1-3实验)
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你可能喜欢肌肉组织如何进行匀浆
在液氮中用杵和臼研磨至粉状,然后粉末加入裂解液中(多少粉末用多少裂解液需要用预实验优化) ,用超声波粉碎机粉碎.我的实验室用以上办法提取心肌组织的蛋白和核酸都取得良好结果.两个办法必须合起来使用,单做液氮研磨或单做超声都不能达到合用之一半的效率.
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【求助】组织匀浆
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这个帖子发布于9年零246天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位大侠,我要测肝脏组织中的SOD 超氧化物歧化酶和MDA,冻存-20五个月的标本还能测出来吗?估计希望不大了.弱弱的再问一句匀浆介质选用什么?谢谢各位!
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冻存-20五个月的标本也未必就测不出来。按理说-20标本可以保存半年到一年的,SOD和MDA应该变化不是很大。不过你还是应该试试看,比较一下文献结果。另外即使结果略有降低(估计变化不会太大),对于你的所有实验样品,进行组间比较也还是有意义。匀浆介质我记得好象是选用丙酮,
你再查查文献。
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谢谢了!我试做一下,看结果怎样.
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五个月可以的,,我的实验部分都保存了6个月左右我才检测的。。结果和我有部分在采样后24小时左右测定的结果一样没,说明1年左右都不影响结果。我当时做的:小块组织器官用冷生理盐水反复冲洗后,滤纸吸干表面水分,称重后研磨,10倍稀释以测定组织中的SOD和MDA含量(按南京建成生物制品研究所提供的组织匀浆制备方法操作)。
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匀浆介质要预冷处理,主要是(pH7.4, 0.01mol/LTris-HCl, 0.0001mol/LEDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖 0.8%的氯化钠溶液 )或者干脆就用0.86%冷生理盐水。 &摘自南京建成提供匀浆方法&个人经验:我做的是小鼠皮肤组织的匀浆,直接用冷的0.9%的生理盐水。预先放在4度冰箱中预冷,用时将一定量的冷生理盐水倒于烧杯之中,随手将余下的放入冰箱。在匀浆中关键是要保持降温,备冰盒于实验台,匀浆中用于随时降温处理。匀浆方法,我有用手工匀浆和机器匀浆两种,需要时愿与你分享经验。
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这段时间做了几次SOD,MDA。有的是给别人做的,昨天是给自己做的,用的试剂盒都是南京建成的,因为前几次给人家做的结果不好,就特意多打了几次电话仔细询问,结果做出来结果还是不好,我做的是小鼠肝组织的。以前测sod都太小,昨天用的是0.1%的匀浆,结果光密度值又太大了。更讨厌的是MDA,标准对照和标准空白作出来都不和说明书上一致。是不是用的东西都应该是消毒的。我现真的怕了做这个实验了,本来是很不屑于的一个指标,但是必须要做,确又没作好,希望大家提供一下建议。万分感谢!!!!!!!顺便问一下,南京建成的产品怎么样啊,我是因为便宜才买的。
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请分享一下你的匀浆方法怎么样,我先用手工研磨,再用细胞超声破碎,感觉太浪费时间的。想寻找更好的方法。谢谢。
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我的标本比较多,手工研磨很费事,最后找地方帮做了,用的也是南京建成试剂盒,结果马马虎虎吧。
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