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上海川翔生物科技有限公司
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试剂名称：细胞分离液Percoll pharmacia
英文名称：
国产/进口：进口
产地/品牌：GE
：17-0891-01&
参考报价：
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本半年点击数：83
产品类别：
Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(&20mosm/kg H2O), 粘度也很小，可形成高达1.3g/ml密度，采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200～1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于Percoll扩散常数低，所形成的梯度十分稳定。此外，Percoll不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒，还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。
二、操作方法及注意事项
1. 不同浓度(密度)Percoll溶液的制备: 先用9份Percoll与1份8.5%NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压，然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。
Percoll浓度(%)　　70　　 　& 60　　　& 　50　　　& 40　　& 　 30　　　 　　20
　比重g/ml　　 　 1.090&&&& 1.077&&&& 1.067&&&& 1.056&&&& 1.043&&&&&& 1.031
2. 不连续密度梯度Percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润，除去多余血清，这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下，使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置，有时相邻两层Percoll比重相差不大时，可将Percoll液放入注射器中，小针头斜面紧贴管壁，任其自然慢慢流下。
3. 装样：样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异，一般加样体积不宜过大，细胞浓度也不可过高，否则会影响细胞的分离和回收。
4. 离心：一般采用离心力为400g，时间20～25min。由于多层Percoll之间密度差别不大，因此离心机加速、降速时要慢，要平稳。
5. 取样：当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时，可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞；有时大部分细胞位于Percoll层中，则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。
三、分离纯化细胞举例
1. 富含NK活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化:按顺序由下向上逐层加50%、47.5%、45%、42.5%和40%五种不同密度的Percoll,如用10ml试管(或塑料管)分离,每层Percoll约1.2～1.5ml，初步从外周血中分离的PBMC细胞1&108悬于1ml培基中，按要求装样、离心和取样。一般富含NK杀伤活性的LGL细胞位于42.5%与45%Percoll界面以及上下二层的Percoll液中。
2. 纯化淋巴母细胞和除去死细胞：分别叠加50%和30%Percoll液。收取经PHA(或其它抗原、有丝分裂原)刺激PBMC,或含有较高比例异型的PBMC(如肾综合征出血热患者)，按要求装样、离心和取样。位于管底的淋巴细胞为小淋巴细胞；两层Percoll之间为淋巴母细胞，纯度和回收率在80%以上，位于30%Percoll表面是死细胞。收获淋巴母细胞可进行表型、结构以及功能的研究。
四、人不同血细胞的漂浮密度
1.052-1.077
嗜酸性粒细胞
1.09-1.095
1.062-1.075
嗜中性粒细胞
1.080-1.085
1.065-1.077
1.050-1.066
淋巴母细胞
1.065-1.077
1.030-1.060
自然杀伤细胞
1.050-1.070
五、percoll分离液相关问题　
percoll连续梯度怎么配制？比如15%---75%的percoll连续梯度?根据实验需要的具体密度梯度决定的，根据要分离的不同细胞种类，数量等等，也有用原液配的。也有用80%配的，不一定的。另外，percoll本身是低渗透压的，要用高渗透压溶液配成生理等渗透压溶液，然后使用，不然，细胞容易破裂。一般是先用9份Percoll与1份8.5%NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压，然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。即取Percoll原液与10倍浓缩的PBS以9:1的比例混合，此时溶液为100%Percoll，比重是1.127，毫克分子渗透压浓度为
290mOsmol/kg&
Percoll浓度(%)& 70&&&& &60&&&&&& 50&&&&& &40&&&&& &30&&&&& & 20&
比重g/ml&&&&&&& 1.090&& 1.077&&& 1.067&&& 1.056&&& 1.043&&&& 1.031
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Percoll淋巴细胞分离液
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Percoll淋巴细胞分离液
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Percoll淋巴细胞分离液
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【求助】对percoll液进行过滤，会不会影响它的分离效果呢？
我在配制用于分离间充质干细胞的密度为1.073的percoll分离液时，可能有一点污染，而且保存的时间也比较长了，大概有两三个月，如果用滤器对percoll进行过滤，会不会影响它的分离效果呢？保存两三个月一般不会有问题，过滤可能会影响，你可以用低一点的温度和压力灭菌，说明书上是这样说的。说明书上是这样说的：Percoll PLUS may be resterilized by autoclaving at 120°C for30 minutes. Percoll PLUS can also be resterilized after addition of salts withoutany gelling!After opening, Percoll can be resterilized by autoclaving at 120°C for 30 minutes.This must be performed without the addition of salts since these cause gellingof Percoll under the above conditions. Sucrose must not be added prior toautoclaving since caramelization will occur at 120°C.也就是说，Percoll　PLUS液可以在加液稀释后耐受高压灭菌；而普通的Percoll液则必需原液高压灭菌，稀释后高压可能导致其形成沉淀物或凝集物，高压前加蔗糖可使蔗糖变能焦糖，因此也不可以加！以上说明来自GE公司的Percoll说明书！
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100ml，细胞分离液，Pharmacia[分]
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[细胞分离液，Pharmacia[分]:JM-17-ml]&&详细信息：
产品名称：细胞分离液，Pharmacia[分]
产品编号：JM-17-ml
产品类型：进口试剂
规格：100ml
[英文名]英文名称Percoll [包装]1EA [细胞分离液，Pharmacia[分]:JM-17-ml]供应公司：J&S巨能世纪信息科技（苏州）有限公司 巨能供应各类阿莫西林对照品、盐霉素标准品、安普霉素标准品、盐酸大观霉素标准品、泰乐菌素标准品等对照品、标准品。氯霉素对照品200mg，含量99.5%。公司经营各种实验试剂，规格多样，为您提供***的产品及服务。欢迎来电咨询和订购！ 细胞分离液，Pharmacia[分]:JM-17-ml相关产品信息： 胰蛋白酶1:250，Amresco[分]25g聚乙二醇 12000，Sigma[分]500g吐温-80，Sigma[分]100mlN,N-二甲酰胺，Amresco[分]500ml琼脂糖，国产100g细胞色素C[马心]，Sigma[分]25mg链脲佐菌素，Japan[分]1g3-(N-啉)乙磺酸，Amresco[分]100g利福平，Sigma250mg典代乙酰胺，Sigma[分]5gF12液体培养基，HyClone500mlL-半胱氨酸盐酸盐，Amresco[分]25gL-谷氨酸，USB[分]500g多粘菌素B硫酸盐，USB[分]100mg氧化型辅酶I，Roche[分]250mg噻孢霉素，Japan[分]5g台牛***，国产400mla-淀粉酶，Sigma100mgG-418，Amresco[分]100mg维生素C[抗球血酸钠]，Sigma[分]25g过硫酸铵，Amresco[分]25gL-苏氨酸 ，Sigma[分]25g苯磺酰氟，Sigma[分]5gL-缬氨酸，USB[分]25gL-缬氨酸，Sigma[分]100g一步法总RNA提取试剂，Invitrogen200mlL-色氨酸，Sigma[分]10g羧苄青霉素，Japan[分]100mga-淀粉酶，Sigma1g维生素B1[盐酸噻胺]，Sigma[分]100g赤霉素，Sigma[分]1g聚乙烯吡咯烷酮，Sigma[分]100g一步法总RNA提取试剂，国产100ml透明质酸酶，Sigma[分]100mg维生素B1[盐酸噻胺]，USB[分]10g植物凝胶，Sigma[分]100g可溶性两性霉素B（水溶），Sigma[分]25mg牛***白蛋白[组份五]，Sigma[分]100g潮霉素B，Roche1gL-异亮氨酸，Sigma[分]100G琼脂糖，Oxoid100gD-葡萄糖[无水]，Sigma[分]500g3-(N-啉)乙磺酸，Sigma[分]25g，Sigma[分]100ml顺丁烯二酸[马来酸]，Sigma[分]100g链脲佐菌素，Japan[分]100mg潮霉素B，Roche1g硫酸庆大霉素，Sigma[分]100mgL-丙氨酸，USB[分]25g胰蛋白酶1:250，Amresco[分]100g 巨能世纪信息科技（苏州）有限公司以***的价格提供给广大客户!细胞分离液，Pharmacia[分]，欢迎来电咨询购买。
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