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【求助】小鼠取血问题
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这个帖子发布于7年零119天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
大家好，制备单抗已经免疫过第二次了，很快就要取血测效价。为了练手，买了几只普通小白鼠，采取断尾取血，但是根本就取不到几微升，而且很快就凝了。又不敢采用眼球取血，生怕失血过多导致死亡，而且总共就两只眼，就只能测两次。大家都是怎样开展的呢？需要加抗凝剂么？除了这两种方法还有更好的方法么？谢谢
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另外饲养细胞必须用BABL/C小鼠吗？普通小鼠可以吗?
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还是眼球取血比较方便，不会死掉的。方法是左手抓紧小鼠颈部皮肤，使眼球凸出，右手用一次性采血管扎小鼠内眼角，一次可以取200微升左右不会影响视力，取完后赶紧松开左手，用干棉花止血。饲养细胞可以用昆明鼠的，便宜细胞量又多。
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同意楼上，也可以把小鼠尾巴用热水泡一下，让血管充血，然后拿刀片在尾巴尖附近上割个小口，用手一撸，呵呵。
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ethel533533 大家好，制备单抗已经免疫过第二次了，很快就要取血测效价。为了练手，买了几只普通小白鼠，采取断尾取血，但是根本就取不到几微升，而且很快就凝了。又不敢采用眼球取血，生怕失血过多导致死亡，而且总共就两只眼，就只能测两次。大家都是怎样开展的呢？需要加抗凝剂么？除了这两种方法还有更好的方法么？谢谢Have a try on saphenous vein.It works very well for my purpose.Anaesthesia is not required Accurate venepuncture Remove of enough blood up to 150 ul Repeated/serial sampling is possible (at least once every two weeks)
Low tissue damage ~ 5 min are needed to remove blood from one mouse Increased animal distress
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热水泡尾巴的方法我也试了，不知道是我的问题还是老鼠的问题，咋就那么一滴滴点血呢、谢谢大家
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剪尾取血的话呢，每次挤一滴血出来，用枪吸到EP管里，然后把老鼠放松，等看到尾巴用充血的时候，从前往后撸，再取一点，反复几次应该能取到20ul左右，不过你要检测效价的话能得到几微升的血清足够了啊。真的要很多血清的话还是眼眶静脉窦取血吧
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血太少的话，血清也很少，用枪吸血清的时候好吸么？
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凝固很快的是个别高血脂的老鼠。正常的采个20ul就足够了。用手把尾巴摸红再剪了挤血。
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曾经看到有位朋友用这种方法：把取出的血放在少量的PBS液中，之后直接离心，取上清，这样等于把血清进行了若干倍的稀释，到时候稀释血清的时候算上就OK了这种方法我觉得很棒，但是我有个question：全血是定量的，但是血清是未知的啊，怎么知道把血清稀释了多少倍呢？另外，楼上几位朋友说20ul就足够了，但是吸出的血清很少，用移液器好吸么？
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1、用酒精棉球擦拭，起到毛细血管扩张作用2、可以用热水预热3、剪掉的尾巴梢多一些，有助于出血4、顺着尾巴向下捋5、捋出来一些，就用EP管内壁蘸下来6、分离血清时间把握好祝顺利
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ethel533533 曾经看到有位朋友用这种方法：把取出的血放在少量的PBS液中，之后直接离心，取上清，这样等于把血清进行了若干倍的稀释，到时候稀释血清的时候算上就OK了这种方法我觉得很棒，但是我有个question：全血是定量的，但是血清是未知的啊，怎么知道把血清稀释了多少倍呢？另外，楼上几位朋友说20ul就足够了，但是吸出的血清很少，用移液器好吸么？对地，，，俺们就是用这种方法，根据以往经验，全血一般可以析出来1/10的血清，。。。俺们一般从小鼠的尾巴里采出10uL的全血再加入90uL的生理盐水或者PBS。进行离心，这样算出来的的话其实是把血清已经稀释了100倍。。。。。。。。。
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我也顺便请教高手们，如果取小鼠血做肝功指标，怎么才能取到多哦，取多少才能测啊，采用什么方法取血？谢谢高手们！
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回楼上的：测肝功的话，需要的血清会比较多。建议眼眶取血。1.5-2cm长的采血管，约呈45度角边转边插入眼眶。一定要攥紧小鼠并使其眼球充分暴露。取400ul全血，37度保温2h左右，析出血清，大概能拿到150ul血清。祝好。
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小鼠采血，我们推荐使用眼睑采血方式。即用手的大拇指和食指的第三关节抓住小鼠颈后部皮毛（多抓些，但别抓脖子），向后抻，使得小鼠眼睛突鼓，头部不能自由旋转（防止被咬）。再用小拇指（如若手小，可以和无名指和中指一起用）和小鱼际肌肉夹住小鼠尾部，或尾部和后肢（不让它自由晃动，防止其挣扎），将其头部倚靠并简易固定在比较重的物体上（如鼠笼的一角）。待其眼球突鼓后，用另一只手持毛细玻璃管（或采血管等）直接插入其眼睑部位采血。有可能血流非常快，也有可能很慢，但总的原则是，尽量采集到2/3-1管血，且无气泡。然后，把小鼠放回鼠笼，将毛细玻璃管倒至于0.5ml离心管中，使其全部流出（90%以上也可，再不行就用嘴吹，不过别沾到嘴上）。将离心管在室温条件静置1小时，然后3000r/min离心15min即可，最好的情况下，用0.1到10微升的移液器可以得到30-40微升血清。那可是原倍的。祝好运
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很简单，直接剪掉1cm的尾巴用Ep管取血，如果在广州可以联系我哦
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左手拇指和食指抓紧小鼠颈部皮肤，中指按住小鼠头部，使眼球凸出，右手拿200ul的Tip倾斜插入小鼠内眼角，轻轻转动，血很快就会上来，采取完后稍松一下，用干棉花止血，带血的Tip放到EP管里用枪打下去（最好又另一人完成，动作要快，防止凝血）。一只小鼠不要时间太长，也不要太用力捏，防止小鼠窒息死亡。一次一两百微升没问题，也不会影响视力，一周即可恢复。
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本人采用的是断尾采血，一次采血10微升就够了，如果是一个人，就把小鼠放入50ml离心管中，把盖剪一个口，尾巴拉出来，可以搓一搓让其充血，然后剪掉一小截，把尾巴撸两下就可以挤出一滴血，然后用10微升的枪吸起打入pcr管中，管越小越好，一定要打在管底，然后正常分离就可了，其实测效价一两微升就够了，这种方法一般可以获得4微升左右
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Agree!It's faster. You can bleed one mouse in 1 min.Here is the information of this method. you can use needle instead of lancet. conanthird wrote:Have a try on saphenous vein.It works very well for my purpose.Anaesthesia is not required Accurate venepuncture Remove of enough blood up to 150 ul Repeated/serial sampling is possible (at least once every two weeks)
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眼球采血快，不会死的，不要抓的太紧了·~方法楼上有人介绍了，我就不说了~~~为采慢一些，每次都要反复的律一下尾巴~~~泡热水的效果会好一些如果采到的血少的话，可以用生理盐水做缓冲液稀释10倍，10ul的血够检测好几次的了ethel533533 wrote:大家好，制备单抗已经免疫过第二次了，很快就要取血测效价。为了练手，买了几只普通小白鼠，采取断尾取血，但是根本就取不到几微升，而且很快就凝了。又不敢采用眼球取血，生怕失血过多导致死亡，而且总共就两只眼，就只能测两次。大家都是怎样开展的呢？需要加抗凝剂么？除了这两种方法还有更好的方法么？谢谢
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这个主要看你需要的血量，如果只要10微升的话，每次取血只要剪掉一小段尾巴，还是可以的眼睛取血的话，有两种办法，一种是楼主所说的只能用两次的摘掉眼球，这个的取血量很大，基本可以把小鼠的血取掉一大半；另外一种就是眼眶静脉丛取血，用一个较细的玻璃吸管（最好带有斜面）扎入眼眶静脉丛，这样血量也可以取得较多，而且，让小鼠休息几天之后可以反复取血。
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ethel533533 热水泡尾巴的方法我也试了，不知道是我的问题还是老鼠的问题，咋就那么一滴滴点血呢、谢谢大家你的问题
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可以试试采血前一天断粮，只喂水，断尾采血时多捋几下。我试了几次，还是可以的，多的时候能采十几微升，少也有5微升。
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可以腮部取血，具体的就不细说了，这样采血对小鼠的伤害也小，手法不熟练的话可能会扎成面瘫
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zzsong1984
很简单，直接剪掉1cm的尾巴用Ep管取血，如果在广州可以联系我哦 您好，用EP管采血的话怎么进行保存？
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50ml 离心管盖上弄个洞，小鼠放进去，尾巴从洞里伸出来，尾尖端剪去2-3mm，用手从尾根部捏住往尖端推，血一滴一滴蹭到 0.65ul
EP管内壁，10滴左右就够，离心后能得到5ul 以上血清，测效价从1：100开始，2-3ul就够了。
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你要那么多干嘛！只要三四滴就可以了！
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您好，用EP管采血的话怎么进行保存？
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