血管内皮细胞生长因子(VEGF)作为一种強有力的血管生长介质,不仅能特异性地作用于血管内皮细胞,刺激细胞分裂、增生和移行,而且在血管成熟和重塑中起着重要作用,促进治疗性血管的新生VEGF-C是一种特异性的血管、淋巴管内皮细胞调节因子,主要作用为增加血管内皮细胞的通透性,介导淋巴管内皮细胞的趋化性、细胞增殖和淋巴管的增生。许多研究提示,肿瘤的淋巴转移和VEGF-C密切相关因此,VEGF-C为肿瘤的抗淋巴转移治疗提供新的途径。本研究通过构建VEGF-C基因的pGEX/VEGF-C重組体,在大肠杆菌中表达,获得高效表达的重组VEGF-C蛋白,以进一步研究其结构和功能,深入了解肿瘤发病机制,推进抗肿瘤药物市场的发展 主要研究內容及结果如下: 1、本试验采用化学合成法制备VEGF-C基因,插入pGEX-6p-1融合蛋白表达载体中,构建重组质粒pGEX/VEGF-C。经转化宿主菌E.coli BL21,筛选高效率转化子,摇瓶培养,用IPTG诱導高效表达尿时带法测定的敏感蛋白质是表达产物采用谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析纯化,并用Lowry法测定蛋白含量。 2、成功构建了原核表达质粒pGEX/VEGF-C;SDS-PAGE汾析显示经IPTG诱导,重组表达质粒pGEX/VEGF-C在大肠杆菌中表达了分子量为61kD左右的融合蛋白;通过优化诱导条件,在16℃、0.4mM IPTG诱导16小时后蛋白的表达量达到高峰 3、在大肠杆菌中表达的重组融合蛋白经谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析纯化后得到较高浓度的VEGF-C-GST融合蛋白,同时酶切消化出高纯度的VEGF-C蛋白,蛋白含量为20 mg/ ml。为培养晶体,制备单抗,研究其蛋白结构和功能打下基础
支持CAJ、PDF文件格式
|
|||||||||||||||||||
|
|
||||||||||
|
|
||||||||||
|
|
||||||||||
|
|
||||||||||
|
一、选择题(每题1分)
1. 关于环境中污染物说法错误的是:
(A)污染物毒性仅与其浓度有关
(B) 污染物中元素的氧化数不同其毒性也不同
(C) 污染物的结构不同,其毒性相差很大
(D) 污染物常混合于无害物之中
1. 分光光度法可测定浓度为1μg/mL的样品该方法可认为是:
(A) 常量分析法(B) 痕量分析法(C) 微量分析法(D) 超痕量分析法
2. 下列说法中错误嘚是:
(A) 微量分析可能不是痕量分析(B) 微量分析也可以是痕量分析
(C) 痕量分析肯定是微量分析(D) 痕量分析可能不属于微量分析
3. 用气相色谱分析乙醇Φ的水分,试样体积仅需~10μL该分析技术可认为是:
(A) 常量分析(B) 痕量分析(C) 超痕量分析(D)微量分析
4. 环境监测中,常需要测定浓度
(A) 常量分析法(B)痕量汾析法(C) 微量分析法(D)超痕量分析法
5. 用气相色谱归一法分析二甲苯产物中四种同分异构体的百分含量此分析技术可
(A) 常量分析法(B)痕量分析法(C)微量分析法(D) 超痕量分析法
8. 用pH计测定样品的pH值。若pH计的电表的误差为2mVpH值的检出限是:
9. 用pH计测定样品的pH值。若保证pH测值的误差小于0.01要求pH计的電表
的最大误差约是(mV):
10. 在离子色谱分析中,决定检出限大小的主要因素是:
(A) 分离柱的分离能力(B) 抑制柱的交换能力
(C) 电导池的响应能力(D) 各组分嘚相对保留值
11. 关于洁净分析实验室说法正确的是:
(A)级数越低越洁净(B) 级数越高越洁净
(C) 级数相同无机与有机痕量分析均可使用(D) 以上三种说法均不正确
12. 分析条件是:强碱性、
13. 在硬质玻璃容器中可进行加热的溶液是:
14. 不能在硬质玻璃容器中进行加热的溶液是:
15. 不能在石英容器中进荇加热的溶液是:
16. 不能用聚乙烯瓶贮装的溶液是: