做连接，载体和插入dna都dna去磷酸化化了，还能连上吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-07-25 04:38 标签： dna是遗传信息的载体
载体与目的基因的酶切与连接
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载体与目的基因的酶切与连接
1.末端结构
对载体进行酶切处理，要注意酶切片段的末端结构以及黏性末端的碱基组成，载体与插入DNA的连接方式有如下几种：
（1）用同一种限制酶切割载体和插入DNA，二者能正确连接，但不能确定方向(见图1）；
（2） 用不同限制酶切割（同尾酶），所得单链突起能互补，二者能正确连接，但不能确定方向（见图1）；
（3）&用不同或相同的限制酶切割载体和插入DNA形成平末端，能连接但连接效率低，而且不能确定方向（见图2）；
（4）&用不同的限制酶（非同尾酶，双酶切）切割载体和插入DNA，而且形成不同的黏性末端，能连接，也能确定方向，这种模式被广泛应用（见图3）。
2.脱磷酸化处理（防止载体自连的一种方法）
如果载体仅仅用一种限制酶切，在与插入DNA连接的时候，也能进行自我连接，因此有必要将载体DNA末端进行脱磷酸化处理，以防止载体自连。当脱磷酸化的载体与插入DNA连接后，磷酸部位不能形成磷酸二酯键而产生缺口，具有这种缺口的质粒转入大肠杆菌后，利用大肠杆菌修复酶系统修复完成。对于双酶切形成不同黏性末端结构的载体和DNA连接，可不进行脱磷酸化处理。
【参考文献】
现代分子生物学实验原理与技术.陈德富.陈喜文.北京，科学出版社.
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载体处理去磷酸化
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＞＞＞有关DNA的叙述，正确的是A．生物的DNA只存在于细胞核中B．DNA是遗传..
有关DNA的叙述，正确的是A．生物的DNA只存在于细胞核中B．DNA是遗传物质用载体C．人的体细胞核中DNA成对存在D．DNA上的片段都能控制生物性状
题型：单选题难度：偏易来源：不详
C试题分析：A、DNA大部分位于细胞核中，细胞质中同样具有，细胞质中有大量的细胞器，细胞器中具有部分遗传物质，A错误；B、细胞核中能被碱性染料染成深色的物质叫做染色体，它是由DNA和蛋白质两种物质组成，DNA是主要的遗传物质，它的结构像一个螺旋形的梯子，一条染色体上包含一个DNA分子，一个DNA分子上包含有多个基因，基因是染色体上具有特定遗传信息的DNA片段，因此，染色体是遗传物质的载体，B错误；C、染色体是细胞内具有遗传性质的物体，易被碱性染料染成深色，所以叫染色体，由蛋白质和DNA组成，是遗传物质基因的载体，染色体在体细胞内成对存在，C正确；D、基因要通过表达成蛋白质才能进而控制生物体性状，但是有的DNA上的某些片段根本不会发生表达，D错误；故选C。
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据魔方格专家权威分析，试题“有关DNA的叙述，正确的是A．生物的DNA只存在于细胞核中B．DNA是遗传..”主要考查你对&&基因控制生物的性状&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下：
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因为篇幅有限，只列出部分考点，详细请访问。
基因控制生物的性状
主要的遗传物质：&&& 现代遗传学研究认为，控制生物性状遗传的主要物质是DNA(脱氧核糖核酸)。DNA位于染色体上，染色体位于细胞核内，因此，细胞核是遗传信息的中心，DNA是遗传信息的载体。染色体由蛋白质和DNA组成。 DNA在染色体中的含量比较稳定，是主要的遗传物质。由于DNA大部分在染色体上，所以说染色体是遗传物质的主要载体。基因控制形状基因： 基因是控制生物性状的遗传物质的基本结构单位和功能单位；基因是有遗传效应的DNA片段，每个DNA分子上有许多个基因；基因在染色体上呈线性排列(指细胞核内染色体上的基因)。①控制生物同一性状的基因，在体细胞中与染色体一样，是成对存在的。 ②在生物的配子(精子、卵细胞)中，控制同一性状的基因成单存在。 ③在生物传种接代的过程中，传下去的是基因。基因、DNA、染色体之间的关系： (1)DNA存在于细胞核中的染色体上，呈双螺旋结构，是遗传信息的载体。 (2)染色体存在于细胞核中，由DNA和蛋白质等组成，DNA是染色体的主要成分。 (3)基因是DNA上有特定遗传信息的片段。控制生物性状的基冈有显隐性之分，它们控制的生物性状就有显性性状和隐性性状之分。三者的包含关系，如图特别提醒：①每种生物都有一定的稳定不变的染色体数；体细胞中染色体成对存在，基因也成对存在。 ②在形成生殖细胞时，成对的染色体要分开，分别进入新形成的生殖细胞中。因此，在生殖细胞中染色体成单存在，即只有每对染色体中的一条，染色体上的基因也是成单存在的，即只有每对基因中的一个。
发现相似题
与“有关DNA的叙述，正确的是A．生物的DNA只存在于细胞核中B．DNA是遗传..”考查相似的试题有：
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