茶树类黄酮合成转录因子筛选及ANR基因功能验证--《安徽农业大学》2013年博士论文
茶树类黄酮合成转录因子筛选及ANR基因功能验证
【摘要】：茶多酚是茶树[Camellia sinensis（L.）O. Kuntze]中主要的次生代谢产物，其含量可达鲜叶和嫩茎干重的18%～36%，包括酚酸、黄酮醇、黄烷-3-醇（儿茶素）、黄酮、花青素和原花青素等。不同酚类物质的生物合成主要途径基本相同，涉及到莽草酸途径、苯丙烷类代谢途径和类黄酮合成途径。花青素还原酶（anthocyanidin reductase，ANR）是控制儿茶素和原花青素合成的直接酶类，而苯丙烷类代谢途径和类黄酮合成途径中的许多酶促反应受到转录因子R2R3-MYB, bHLH和WD40蛋白的调控。有关茶树转录因子基因功能研究几乎未见报道，茶树ANR基因的功能也不能确定。本文重点对初步测得的茶树基因组中转录因子基因进行生物信息学分析，并利用烟草遗传转化体系对茶树ANR基因功能进行验证。
主要研究内容如下：
1.初步测得的茶树基因组中转录因子R2R3-MYB, bHLH和WD40蛋白的生物信息学分析。
从茶树基因组中127,094条单一基因中筛选转录因子基因，并逐一进行保守结构域鉴定，分别筛选得到73条R2R3-MYB基因，49条bHLH基因和134条WD40基因。
为了预测基因的功能，将73条茶树R2R3-MYBs和126条拟南芥R2R3-MYBs合并到一起构建进化树。进化树结果显示，拟南芥R2R3-MYB可分为25个亚组，茶树R2R3-MYB可分成27个亚组，茶树R2R3-MYB可以整合到拟南芥的进化枝中，但是比拟南芥多两个亚组。利用MEME网站软件，对茶树R2R3-MYB亚组的基序进行了重新定义。根据进化树分支和基序推测，6条第4亚组茶树R2R3-MYB可能参与负调控酚酸代谢和单宁合成，2条第5亚组茶树R2R3-MYB可能参与调控原花青素合成，1条第7亚组茶树R2R3-MYB可能参与调控黄酮醇合成。
同样，将拟南芥和茶树bHLH放在一起构建进化树。进化树结果显示，拟南芥bHLH可以分为32个亚组，茶树bHLH分布在其中9个亚组中。参照拟南芥的功能注释，茶树中2条第2亚组bHLH、5条第24亚组bHLH蛋白可能参与调控类黄酮合成途径。
基序分析还发现，CsMYB4-1、CsMYB4-2、CsMYB4-3、CsMYB4-4、CsMYB5-1和CsMYB5-2的序列中包含[DE]Lx2[RK]x3Lx6Lx3R基序，该基序特定结合bHLH，有助于形成稳定的MYB–bHLH复合物，提示这些MYB蛋白可能与bHLH一起发挥作用。
因存在较大的进化差异，茶树WD40蛋白无法构建进化树，然而从中我们也找到1条与AtTTG1高度同源的CsWD40-1，两者序列一致性为80.4%，提示它可能参与调控类黄酮的合成。
2. R2R3-MYB, bHLH和WD40转录因子基因的克隆和表达分析。
本论文对筛选出来的转录因子基因进行了全长序列的End-to-end PCR验证，部分基因通过了RACE-PCR验证。同时通过荧光定量PCR分析（qRT-PCR）技术分析了筛选出的转录因子基因在茶树不同发育阶段和不同处理条件下，包括ABA、GA及伤害处理条件下的表达差异。并预测了在类黄酮合成途径中可能的靶结合位点。
3.茶树基因组的ANR基因启动子克隆、生物信息学及其表达分析。
在茶树基因组中查找到2条与GU944768和JN024667一致的ANR基因，并命名为CsANR1和CsANR2。进化树显示CsANR1和CsANR2与VvANR和DkANR同源性最高，蛋白结构分析CsANR1和CsANR2与葡萄ANR的晶体结构3hfsB的一致性最高，并推测了茶树ANR的NADPH结合位点、底物结合位点及催化位点。克隆得到CsANR1和CsANR2的启动子，分别有2464bp和1500bp，发现两个ANR启动子中都存在很多响应光、激素、环境胁迫的顺式作用元件。qRT-PCR技术分析了CsANR1和CsANR2在茶树不同组织和不同处理中的表达模式，结果发现，CsANR1和CsANR2在芽、四叶和根中表达量比较高；对光照和蔗糖响应明显；对激素和伤害处理响应不明显。
4.茶树CsANR1和CsANR2基因的功能验证。
转CsANR1和CsANR2烟草植物花的花色出现不同程度的变浅，其中转CsANR1的烟草花变浅明显；同时发现，转基因烟草花中的花青素含量下降，而原花青素含量升高。通过qRT-PCR对转基因烟草中类黄酮合成途径相关基因进行分析，结果发现，在转CsANR1的烟草花中，CHS、CHI、F3’H基因都被下调，其中F3’H下调最为明显，ANS基因上调最为明显。在转CsANR2的烟草花中，CHS、CHI、F3H、ANS、DFR基因的表达量明显下降，F3’H的表达量明显升高。
5.可能参与调控茶树CsANR的转录因子CsMYB5-2的功能验证。
生物信息学分析表明，CsMYB5-2与DkMYB4（BAI49721）和PtMYB115（EEE81917）的亲缘关系较为密切。转CsMYB5-2的烟草植物花中DMACA显色的原花青素含量出现明显的提高。通过qRT-PCR对转基因烟草中类黄酮合成途径相关基因进行分析，结果显示，在转CsMYB5-2的烟草花中ANR基因的表达量明显上升。
【关键词】：
【学位授予单位】：安徽农业大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2013【分类号】：S571.1【目录】：
摘要3-5Abstract5-8目录8-10第一章 文献综述10-19 1.1 茶树的类黄酮化合物及其生物合成途径10-14 1.2 与类黄酮合成相关的转录因子14-15 1.3 类黄酮合成途径中 ANR 基因的研究进展15-18 1.4 本研究的目的及意义18-19第二章 茶树中与类黄酮合成相关的转录因子生物信息学分析19-44 引言19-20 1 材料和方法20-23
1.1 序列来源20
1.2 同源结构域搜索与进化树构建20
1.3 植物材料及 RNA 提取20-21
1.4 基因全长克隆及分析21-22
1.4.1 RACE PCR21-22
1.4.2 RACE-PCR 产物测序22
1.4.3 序列全长的高保真 PCR 验证22
1.5 荧光定量 PCR22-23 2 结果与分析23-39
2.1 茶树 R2R3-MYB, bHLH 和 WD40 基因的筛选23
2.2 茶树 R2R3-MYBs 的基序及分组23-29
2.3 茶树 bHLH 的分组和基序预测29-35
2.4 预测参与茶树类黄酮合成调控的 WD40 基因35-37
2.5 与茶树类黄酮合成相关的候选基因序列全长验证以及表达差异检测37-39 3. 讨论39-44
3.1 R2R3-MYB 第 4、5、7 亚组的基因筛选和功能预测39-41
3.2 bHLH 第 2、24 亚组的基因功能预测41-42
3.3 WD40 基因功能预测42-44第三章 花青素还原酶基因的功能研究44-67 引言44-45 1 材料和方法45-50
1.1 材料45
1.2 主要仪器45
1.3 部分试剂配方45
1.4 实验方法45-50
1.4.1 茶树基因组中 ANR 基因的查找、克隆及生物信息学分析45-46
1.4.2 CsANR1 和 CsANR1 启动子序列获得及生物信息学分析46-47
1.4.3 CsMYB5-2 基因全长克隆47
1.4.4 植物表达载体的构建与转基因47-49
1.4.5 转基因烟草花花青素与原花青素测定方法49
1.4.6 转基因烟草花 RT-PCR49-50
1.4.7 茶树及转基因烟草中相关基因的荧光定量 PCR50 2 结果与分析50-64
2.1 茶树中两条 ANR 基因全长信息及进化树分析50-53
2.1.1 茶树基因组中 ANR 基因分析50-51
2.1.2 茶树 ANR 基因生物信息学分析51-53
2.2 茶树 ANR 基因启动子序列及顺式作用元件分析53-57
2.2.1 茶树 ANR 基因启动子的克隆53
2.2.2 启动子的序列的信息学分析53-57
2.3 茶树 ANR 基因的功能验证57-61
2.3.1 茶树不同组织 ANR 基因的表达差异57
2.3.2 茶树 ANR 基因的诱导表达差异57-58
2.3.3 利用烟草遗传转化体系验证茶树 ANR 基因的功能58-61
2.4 可能调控茶树 ANR 基因表达的转录因子 CsMYB5-2 的功能验证61-64
2.4.1 CsMYB5-2 基因信息学分析61-62
2.4.2 茶树不同组织 CsMYB5-2 基因的表达差异62-63
2.4.3 利用烟草遗传转化体系验证 CsMYB5-2 基因63-64 3. 讨论64-67
3.1. ANR 反应机理64-65
3.2 茶树 ANR 蛋白序列及高级结构65-66
3.3 茶树 ANR 的调控66-67结论67-69参考文献69-75附件75-98致谢98-100作者简介及成果清单100-101
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36-1&新的水稻胚乳表达序列标签及其构成的基因芯片99-2&编码zwa2基因的新核苷酸序列49-3&一类水稻叶片特异表达序列标签及其构成的基因芯片68-4&一种新的微生物及其基因片段序列和应用89-5&一种基于rRNA基因种专一序列的非酶扩增检测基因芯片、检测系统及检测方法25-6&花_肌动蛋白的基因序列68-7&西瓜隐性核雄性不育基因序列72-8&月季eIF5A基因的编码序列及其应用82-9&转基因油菜Ms8_外源插入载体旁侧序列及其应用82-10&欧米加－海螺毒素变体多肽的基因序列、_酸序列以及它们的制备方法和医药用途50-11&人hp52－ap基因序列、其编码蛋白及制备方法87-12&转基因油菜Topas19 2_外源插入载体旁侧序列及其应用19-13&猪脂肪细胞定向和分化因子1的基因序列82-14&遗传基因序列分析系统32-15&用于改进植物基因表达的核酸序列和方法68-16&发热伴血小板减少综合征_的全基因序列及应用31-17&基于特征的基因组序列数据库的搜索方法24-18&水稻脂肪酸去饱和酶基因OsFAD6编码序列及其应用03-19&_功能基因Rd-RNase2序列、构建方法及其_酸序列和用途67-20&一种新的人基因编码序列、其编码的多肽及制备方法33-21&牦牛的七种乳蛋白基因序列44-22&一种新型γ-醇溶蛋白基因的核酸序列及其应用39-23&从真核生物基因组中去除核酸序列的_系统和方法24-24&胰高_素受体基因的RNA_序列67-25&丹参_肉桂酰转移酶基因序列和编码的_酸序列及其应用37-26&适于表达用于基因治疗的编码序列的表达载体33-27&编码1ysR1基因的新核苷酸序列97-28&一种人工合成的对_翅目害虫表达高毒力蛋白的基因序列及其应用20-29&花_凝集素基因序列21-30&长叶红砂耐盐特有基因序列Rt-st11787在植物抗盐基因工程中的应用16-31&黄瓜TTG1-like基因的蛋白编码序列66-32&耐高温三_鸟苷环式水解酶基因序列及编码的多肽和制备方法53-33&一类新的水稻叶片表达序列标签及其构成的基因芯片34-34&云南高原湖泊中铜绿微囊藻_藻体尾鞘蛋白编码基因g91核酸序列及其制备方法和其应用63-35&_基因序列与药物药理反应的相关性的方法及系统69-36&黄地老_颗粒体_基因组全序列77-37&_丸特异蛋白基因序列引物和非电泳检测鉴定奶牛胚胎性别的方法43-38&内皮素配体和基因调节序列介导的特异性基因转移技术93-39&使用短dsRNA序列在植物中进行有效的基因沉默50-40&一类新的水稻叶片表达序列标签及其基因芯片79-41&通过基因沉默来产生不育雄花和单性果实的方法、相关序列和包含所述序列的载体80-42&一种筛选基因组DNA中差异位点及其侧翼序列的方法48-43&用于生产偶姻的方法,其适用的_酸脱羧酶,以及两者的制备,和编码PDC基因的DNA序列07-44&耐高温DNA聚合酶基因序列及编码的多肽和制备方法87-45&一种_内切几丁质酶基因序列及其_载体74-46&_β-actin基因远端调控序列及其应用60-47&水稻胚乳特异表达序列标签及其构成的基因芯片28-48&猪肉质性状相关基因TRIM54的分离核酸序列01-49&小麦脱水应答转录因子DREB基因cDNA序列08-50&黄瓜侧枝抑制基因cls的蛋白编码序列92-51&基于梯状回收的基因_数鉴定和各_序列获得的方法88-52&转基因油菜T45_外源插入载体左边界旁侧序列及其应用41-53&荧光PCR定量检测含有Cry1A(b)基因转基因玉米探针序列及试剂盒10-54&一种编码人溶菌酶的基因的DNA序列及其应用73-55&一种抑制bax基因表达的siRNA序列84-56&荧光标记短串联重复序列基因座的复合扩增检验系统50-57&荧光PCR定量检测含有EPSPS基因转基因大豆探针序列及试剂盒82-58&甘蔗蔗糖转运蛋白ShSUT4基因序列52-59&一类新的水稻叶片特异表达序列标签及其基因芯片44-60&5-_乙酰_合酶基因的增强子序列92-61&应用SNP阵列测量染色体、基因或特定核苷酸序列_数的方法05-62&编码pfk基因的新核苷酸序列11-63&人_素α2b基因cDNA编码修饰_序列75-64&检测T细胞增殖的基因序列方法73-65&一组用于检测HBV基因突变的核苷酸序列及其应用60-66&_抗真菌蛋白基因序列、工程菌及其产物制备方法16-67&切割来自小_ROSA26基因座之DNA靶序列的大范围核酸酶变体及其用途25-68&一种鉴定黑木耳菌株185的方法及用于鉴定黑木耳菌株185的基因序列92-69&RNA_的目标碱基序列的搜索方法,导致RNA_的多核苷酸的碱基序列的设计方法,双链多核苷酸的制备方法,抑制基因表达的方法,碱基序列处理装置,操作碱基序列处理方法的计算机程序,记录介质,以及碱基序列处理系统29-70&鸡骨骼肌表达序列标签基因芯片的制备方法64-71&人hNit3-ase基因序列、其编码蛋白及制备方法75-72&小麦籽粒质地编码基因的核酸序列、表达载体和应用13-73&编码zwal基因的新核苷酸序列30-74&斑马鱼卵黄蛋白原-1基因调控序列72-75&长春花脂质转移蛋白的基因序列37-76&脂肪酶基因序列及其在酵母中的应用66-77&人高效淋巴细胞趋化因子基因组序列、其编码的多肽及制备方法60-78&编码rpsl基因的核苷酸序列49-79&羟苯_酸双加氧酶基因的DNA序列以及含有羟苯_酸双加氧酶基因的抗特定除草剂植物的获得32-80&含有pat基因转基因作物核酸扩增用引物序列27-81&一种转基因水稻品系的外源插入片段的旁侧序列46-82&针对HA基因检测甲型H1N1流感_2009变异株的核苷酸序列和试剂盒90-83&针对HCMVUL86基因的siRNA序列及应用51-84&山羊F_基因cDNA编码区核苷酸序列50-85&甲胎蛋白基因表达的调控序列及其应用71-86&用于测定甲型H1N1流感_全基因序列的引物及测定方法33-87&奈瑟球菌基因组序列及其用途75-88&一种马铃薯HPL酶基因的cDNA编码区核苷酸序列24-89&针对SARS冠状_基因的反义核酸序列及其药物用途08-90&麻疯树八氢番茄红素合成酶基因序列及在植物中的应用94-91&抗HCMVUL122基因的siRNA序列及应用44-92&多肿瘤抑制因子基因、其突变和用该基因序列诊断癌肿的方法09-93&用于基因沉默的HBV和HCV保守序列67-94&人hNGT基因序列、其编码蛋白及制备方法89-95&编码_pF基因的新核苷酸序列12-96&针对乙型流感_膜蛋白基因的siRNA序列及其应用09-97&新型戊型肝炎_基因序列及其应用51-98&编码显性失活查耳酮合成酶的基因序列及其用途24-99&_滑假丝酵母CCTCCM203011的(S)-羰基还原酶的基因序列和_酸组成05-100&一种基因结构和功能研究相关的序列拆解技术50-101&一种新型麦类钾通道β亚基KTB和KHB基因的核酸序列及其应用07-102&鉴别冬虫夏草的基因序列及方法77-103&猪核受体辅激活因子1基因的蛋白编码序列15-104&石斑鱼下丘脑富含的一个生殖调控因子的基因序列及其用途53-105&心锚蛋白重复蛋白基因上游序列、含有该序列的载体及其用途44-106&一类新的水稻叶片特异表达序列标签及构成的基因芯片62-107&检测靶DNA序列的方法_用该方法的基因芯片及应用01-108&来源于玉米自交系18-599编码多药物及毒素外排蛋白的基因序列34-109&含有花椰菜花叶_35s启动子转基因作物核酸扩增用引物序列59-110&正蚓科双胸蚓属蚯蚓纤溶酶基因核苷酸序列及其_方法79-111&提高外源基因在植物体内表达水平的核苷酸序列10-112&用于转基因马铃薯实时荧光PCR检测的探针序列和试剂盒48-113&真_菇热激蛋白HmHSP70的_酸序列、基因序列及其表达载体28-114&用于检测基孔肯雅和登革热的基因序列74-115&一种同时检测靶基因序列及已知点突变的新技术11-116&针对乙型流感_多聚酶基因的siRNA序列及其应用22-117&长叶红砂耐盐特有基因序列Rt-st14173在植物抗盐基因工程中的应用78-118&Nogo基因的核苷酸序列和蛋白序列以及基于其的方法45-119&_核酸序列和检测样品的基因毒性与诱变性以及基因毒性的动力学的方法98-120&水稻抗逆相关基因-锚定序列重复蛋白基因及其应用85-121&代谢产物的发酵制备方法及编码sod基因的核苷酸序列83-122&Nogo基因的核苷酸序列和蛋白序列以及基于其的方法97-123&黄瓜谷胱甘肽硫转移酶基因CsGSTZ及其编码的_酸序列86-124&一种编码双齿围沙蚕半胱氨酸蛋白酶_的基因序列及其_酸序列与应用38-125&人hARPP-21基因序列、其编码蛋白及制备方法40-126&人源基因引导序列、基因载体及基因表达方法65-127&一种含重复序列基因的合成方法03-128&卡他摩拉克菌外膜蛋白-106多肽及其基因序列和用途03-129&脱氧羟腐胺赖氨酸合酶编码基因及其反义核苷酸序列63-130&人的乳铁蛋基因全序列及其调控元件96-131&角毛壳菌几丁质酶基因及其编码的_酸序列和用于_的引物35-132&一种基于重复序列_的全基因组测序数据的拼接方法25-133&针对引起SARS冠状_基因的siRNA核酸序列及其药物用途48-134&_曹鱼MHC-Ⅱβ基因序列14-135&山羊TNNC1基因和_山羊TNNC1基因编码区全序列的方法69-136&按植物偏爱_子的hHscFv基因序列49-137&一种甲状腺髓_化物酶基因外显子I的基因序列39-138&人自吞_基因Beclin1启动子序列及其应用58-139&一类水稻胚乳表达序列标签及其构成的基因芯片70-140&一种新的人基因序列、其编码的多肽及制备方法61-141&鉴定地衣芽孢杆菌BL63516菌株的专用RAPD引物、鉴定方法及鉴定用基因序列95-142&人粒细胞巨_细胞集落_因子特异性表达的基因序列25-143&奈瑟球菌基因组序列及其用途05-144&来自棉花恢复系中含有26SrRNA序列的基因75-145&一种新的人基因序列、其编码的多肽及制备方法29-146&编码mdhA基因的新核苷酸序列61-147&水稻胚乳特异表达序列标签及其基因芯片17-148&一种牛bLATS1基因、核苷酸和蛋白的编码序列，及其制备与用途57-149&卡他摩拉克菌外膜蛋白-106多肽及其基因序列和用途12-150&日本血吸虫中国_株抱雌沟蛋白的基因序列18-151&基于16SrDNA基因种专一序列的临床常见病原菌诊断的生物芯片86-152&一种来源于垫状卷柏的海藻糖-6-_合成酶基因序列及其_方法00-153&甘蔗水分胁迫相关锌指蛋白ShZFP1基因序列26-154&新序列人_-Ⅰ基因的_及其高效表达48-155&荧光PCR定量检测含有花椰菜花叶_35S启动子转基因大豆探针序列及试剂盒69-156&人hNmrr基因序列、其编码蛋白及制备方法19-157&牙鲆FOLLISTATIN基因序列及其编码蛋白质序列40-158&人L_基因序列、其编码的多肽、制备方法及应用10-159&山羊mTOR基因cDNA编码区3’端核苷酸序列71-160&棉花GhZFP1基因序列及其_与应用55-161&绒山羊VEGF164基因cDNA核苷酸序列及其毛囊特异性表达载体36-162&草鱼胸腺素β11基因序列04-163&_功能基因Rd-RNase3序列、构建方法及其_酸序列和用途52-164&编码类黄酮途径酶的基因序列及其用途38-165&一类新的水稻胚乳特异表达序列标签及构成的基因芯片27-166&采用碱基序列测定法比较同一基因在不同来源中的表达量的方法47-167&与早老性痴呆病有关的基因序列和蛋白及其用途35-168&有利于高通量基因序列标签测序的DNA粘端接头与应用55-169&_核酸序列和检测样品的基因毒性与诱变性以及基因毒性的动力学的方法30-170&一种人白血病相关逆转录_基因组编码的蛋白质与多肽序列及其应用36-171&编码1ysR3基因的核苷酸序列46-172&荧光PCR定性检测含有NOS终止子转基因作物探针序列及试剂盒10-173&针对乙型流感_核壳蛋白基因的siRNA序列及其应用45-174&一种荧光PCR定性检测含有Pat基因转基因作物探针序列及试剂盒38-175&含有NptⅡ基因转基因作物核酸扩增用引物序列89-176&降钙素基因相关肽与鲑鱼降钙素融合多肽转基因序列及其转基因工程菌株73-177&一种新的人基因编码序列、其编码的多肽及制法71-178&蝴蝶兰光周期相关基因Phal_L的序列及其应用57-179&猪肉质性状相关基因TRIM63的分离核酸序列27-180&一种中华蜜蜂头部表达序列基因芯片及其用途81-181&用于询问功能性基因组区域中序列变异的方法,组合物和计算机_产品54-182&类黄酮3’,5’羟化酶基因序列及其用途20-183&4连体胸腺素α1基因序列及转基因番茄的制备方法52-184&一段天花_基因组特异的核苷酸序列34-185&衣原体蛋白、其基因序列及用途72-186&胃癌辅助诊断的基因序列及其应用90-187&牙鲆MYOSTATIN基因序列53-188&人hILF-1-iso基因序列、其编码蛋白及制备方法59-189&假单胞菌M18中藤黄绿菌素生物合成调控因子的基因序列97-190&弥漫性_细胞淋巴瘤相关抗原特异TCRVα6亚家族的MR基因序列及应用06-191&西尼罗热_基因组序列的合成及_检_剂盒35-192&编码海岛棉防卫反应基因的核苷酸序列、含有该序列的植物表达载体及植物细胞93-193&一种耐高温L-_伯糖异构酶及其基因序列23-194&胰高_素受体基因的RNA_序列57-195&铂类药物疗效相关基因SNP检测特异性序列、液相芯片及检测方法17-196&草鱼肠道细胞胞质苹果酸脱氢酶基因序列09-197&一种大豆基因启动子序列及其应用17-198&从蝴蝶兰_出的类黄酮-3 5 -羟化酶基因,其编码序列和应用64-199&发酵制备L－_酸的方法及编码accDA基因的核苷酸序列55-200&人hRAB-14基因序列、其编码蛋白及制备方法06-201&长春花金属硫蛋白Ⅱ型的基因序列46-202&与虫草素生物合成相关的基因序列42-203&耐高温_乙二醛合酶基因序列及编码的多肽和制备方法55-204&一种小麦低分子量麦谷蛋白亚基基因及其胚乳特异表达启动子的连续核酸序列及其应用97-205&结合白细胞介素2受体α基因负调控元件三联体序列的人类蛋白cDNA_pTCF4L15-206&山羊TNNT3基因及_山羊TNNT3基因编码区全序列的方法81-207&基因或核酸序列的酶切-连接长序列半合成方法75-208&一种抑制耐药基因盒整合的siRNA序列75-209&红树植物木榄金属硫蛋白基因及其编码的序列06-210&编码pfkA基因的新核苷酸序列25-211&绒山羊4E-BP1基因cDNA编码区核苷酸序列16-212&采用碱基序列测定法比较同一基因在不同来源中的表达量的方法62-213&针对TRAP-1样蛋白基因的siRNA序列及其用途42-214&冰草P基因组特异序列77-215&切割来自β-2-微球蛋白基因之DNA靶序列的大范围核酸酶变体及其用途87-216&从植物基因组中切除核酸序列的方法11-217&对虾白斑杆状_基因组DNA序列及cDNA序列00-218&抑制PCNA基因表达的siRNA序列及其应用47-219&转基因高油酸油菜W-4_外源插入左边界旁侧序列及应用95-220&用可逆2’-修饰的核苷酸进行的序列测定和基因分型54-221&O型__NY00株的全基因组序列84-222&弥漫性_细胞淋巴瘤相关抗原特异TCRVα23亚家族的P基因序列47-223&体内抑制在灵长类亨廷顿基因表达的方法和序列12-224&一种高温角质酶及其基因序列55-225&抑制人bFGF基因表达增殖的siRNA序列及其表达载体和应用31-226&含有SARS-CoV_核苷酸序列的基因修饰的植物和使用它进行免疫抗SARS的方法76-227&乙型肝炎_前S1区多表位抗原的基因_及其编码序列59-228&一种检测茄科植物_的基因芯片、核苷酸序列及试剂盒56-229&人hZNF216-iso基因序列、其编码蛋白及制备方法38-230&长-47麻疹_非编码区和P、M基因序列及载体构建43-231&一种用短串联重复序列位点等位基因阶梯的个体_DNA鉴定方法及其检_剂盒58-232&中国葡萄属_种秦岭葡萄抗黑痘病候选基因序列及应用29-233&石斑鱼垂体富含的一个生殖调控因子的基因序列及其用途21-234&一种植酸酶基因序列及其在酵母中的应用32-235&一种_表达载体的基因序列及其构建方法33-236&一种镰形扇头蜱的抗凝血分子Rhipilin-1的基因序列和_表达与应用77-237&一种蝴蝶兰查尔酮合酶基因,其编码序列和应用43-238&水稻叶片表达序列标签及构成的基因芯片38-239&基因的人工合成方法及SARS_保护性抗原_酸序列61-240&包含基因转录调节特性的DNA序列及检测和应用这些DNA序列的方法15-241&编码glk基因的新核苷酸序列90-242&草鱼白细胞化学吸引素2基因序列53-243&人Corin基因的控制序列93-244&奈瑟球菌基因组序列及其用法71-245&一类水稻胚乳特异表达序列标签及其构成的基因芯片07-246&转基因水稻品系科丰6号的外源插入片段的旁侧序列21-247&花_白细胞介素8基因序列10-248&一种人类胶原蛋白片段的基因及其编码的_酸序列05-249&碱菀液泡膜Na+ H+反向转运蛋白的基因和_酸序列及基因制备方法和扩增引物59-250&一类新的水稻叶片表达序列标签及构成的基因芯片23-251&用于在植物胚_中进行基因表达的调节序列39-252&人hNP25基因序列、其编码蛋白及制备方法78-253&辛德毕斯_毒株全基因组序列及其_方法02-254&编码_pC基因的核苷酸序列及生产L－赖氨酸的方法02-255&切割来自着色性干皮病基因的DNA靶序列的大范围核酸酶变体及其应用57-256&猪解耦联蛋白基因2核苷酸序列及其多态性的检测方法67-257&一种β-甘露聚糖酶基因及其编码产物的_酸序列和制备方法83-258&弥漫性_细胞淋巴瘤相关抗原特异TCRVβ13亚家族的Y基因序列62-259&中国葡萄属_种华东葡萄芪合成酶基因序列及其应用91-260&玉米品系MON863的外源插入载体的旁邻基因序列12-261&编码poxB基因的新核苷酸序列12-262&一种含有CpG序列的PRRSVORF5基因核酸_的制备方法04-263&斑节对虾热休克蛋白90基因序列48-264&鹅细小_VP1与VP3基因非重叠序列原核表达蛋白及其制备方法98-265&哲罗鲑线粒体全基因组序列及其扩增引物16-266&_子优化的艰难梭菌外毒素B_端基因序列及其核酸_76-267&羊草Na+ H+反向转运蛋白基因序列及其_和应用88-268&莲多酚氧化酶的基因序列及用途35-269&一种茶树表达序列标签构成的基因芯片10-270&一种黄斑蓝子鱼L-_酸氧化酶的基因全序列及其用途63-271&人hN_4-iso基因序列、其编码蛋白及制备方法85-272&_子优化的HIV-1gp120基因共有序列及gp120核酸_76-273&一种新的人基因序列、其编码的多肽及制法和用途87-274&长白猪肥胖候选基因SOCS-3序列及其应用96-275&具有抗肿瘤作用的文蛤蛋白、基因序列及其制备方法43-276&蛋氨酸裂解酶的基因序列及真核表达34-277&丙型肝炎_多表位抗原的基因_及其编码序列09-278&山羊S6K1基因cDNA编码区核苷酸序列22-279&柞蚕溶菌酶的基因序列及其表达产物的制备方法37-280&CC(A+T)6GG串联序列在肿瘤基因-放射治疗中的应用99-281&弥漫性_细胞淋巴瘤相关抗原特异TCRVα6亚家族的MS基因序列及应用56-282&水稻叶片特异表达序列标签及其构成的基因芯片68-283&ZNRD1基因的小_RNA序列及其真核表达载体11-284&蝴蝶兰成花相关基因FVE的编码序列及应用97-285&一种含有菊粉外切酶基因序列的基因工程菌株及其用于制备菊粉外切酶的方法17-286&转基因水稻科丰6号的旁侧序列及定性PCR检测方法67-287&一种靶向c-myc癌基因的外指引序列42-288&针对乙肝_基因的siRNA序列及其用途56-289&节节麦高分子谷蛋白Dtx1.5亚基编码基因的核酸序列、表达载体和应用22-290&一种用于筛选小麦抗叶锈病基因的引物序列及其应用57-291&人hZNFshgc基因序列、其编码蛋白及制备方法30-292&一种_植物减数_基因的方法和一种植物减数_基因的cDNA序列96-293&对与家族性高胆固醇血症有关的分离的低密度脂蛋白受体(LDL-R)的基因序列中的突变进行检测的方法和装置78-294&山羊皮肤表达基因探针序列及其构成的基因芯片13-295&与虫草素生物合成相关的基因序列52-296&猪肉质性状相关基因TRIM54的分离核酸序列28-297&一种具有溶栓活性的沙蚕激酶的编码基因序列及其_酸序列85-298&鉴别诊断_的表位抗原的基因序列86-299&香蕉束顶_中国漳州分离物基因组1和4的全序列01-300&编码ptsH基因的新核苷酸序列40-301&人hMnk2基因序列、其编码蛋白及制备方法59-302&中国葡萄属_种毛葡萄抗黑痘病候选基因序列及应用36-303&含有Cry1A(b)基因转基因作物核酸扩增用引物序列41-304&乙型肝炎_单_抗体可变区序列以及含有所述可变区的基因工程抗体及其用途25-305&组装基因组序列的方法和装置23-306&与大__发生相关的基因序列90-307&转基因油菜Ms1_外源插入载体旁侧序列及其应用05-308&抑制SMAD4基因表达的小_RNA及其编码序列与应用56-309&miR169d前体序列改造及其在基因沉默中的用途42-310&荧光PCR定性检测含有Cry3A基因转基因作物探针序列及试剂盒14-311&水稻脂肪酸脱氢酶基因OsFAD2编码序列及其功能应用11-312&慢性轻度苯中毒相关抗原特异TCRVα12亚家族的Y基因序列03-313&鱼类精_发育因子的基因序列及其用途65-314&人hLDP基因序列、其编码蛋白及制备方法24-315&编码底物专一性_黄酮醇4－还原酶的基因序列及用途43-316&大黄鱼__化物酶体增殖物受体PPAR的α和γ基因序列54-317&一种羊驼的酪氨酸酶相关蛋白-1基因及其编码的_酸序列02-318&对双标记序列进行处理和 或基因组定_方法13-319&抑制血管内皮生长因子基因表达的siRNA靶基因序列80-320&斯达油脂酵母菌内醚糖激酶基因的_方法及其基因序列和用途65-321&_lectin样功能基因Rdr-lec序列、构建方法及其_酸序列和用途62-322&一种高分子量谷蛋白亚基基因及其启动子核酸序列与应用60-323&一种编码钠氢泵蛋白基因的核苷酸序列及其应用90-324&一种人固氮基因同源蛋白及其编码序列21-325&拟_青蟹胰蛋白酶基因cDNA序列及其_方法和应用04-326&小麦细胞_素氧化酶基因TaCKX1序列及其_与应用72-327&人hlipase基因序列、其编码蛋白及制备方法联20-328&长叶红砂耐盐特有基因序列Rt-st14081在植物抗盐基因工程中的应用系99-329&冰凌花低温胁迫转录因子AaCBF基因序列及其_和应用电06-330&利用具有3 至5 外切酶活性的多聚酶进行基因序列分析话07-331&一种用于基因序列差异测定的方法032-332&一种亚洲璃眼蜱的组胺结合蛋白HaHBP的基因序列和_表达与应用211-333&一种来源于苹果的编码5-烯醇_莽草酸-3-_合成酶的基因序列884-334&通过轻度的低温促进基因表达的序列|08-335&一种编码人类白细胞抗原A*11的新等位基因A*110104全长多核苷酸序列及其用途895-336&一种铁氢化酶基因及其编码的_酸序列和异源表达系统119-337&用于基于溶液的序列富集和基因组区域分析的方法和系统556-338&中国葡萄属_种山葡萄抗黑痘病候选基因序列及应用030-339&菜豆几丁质酶基因及其编码产物的_酸序列495-340&一种抑制caspase-3基因表达的siRNA序列480-341&合成核苷酸序列及获得转基因植物的方法113-342&苯致再生障碍性贫血相关抗原特异TCRVα19亚家族的Y基因序列628-343&具有改变的根构造的植物、涉及编码富含亮氨酸重复序列激酶(LLRK)多肽及其同源物的基因的相关构建体和方法70-344&嗜线虫致病杆菌拒食蛋白质及其基因序列和该拒食蛋白及其基因的用途128-345&一种肿瘤相关多肽及其编码基因序列842-346&调控植物中基因表达的核酸启动子序列944-347&荧光PCR定性检测含有NptⅡ基因转基因作物探针序列及试剂盒832-348&NYGGF4基因序列在制备影响脂肪细胞增殖药物中的应用201-349&编码类黄酮途径酶的基因序列及其用途100-350&乙肝_基因的小_核糖核酸序列及制备方法979-351&一种新的人基因编码序列、其编码的多肽及制备方法036-352&编码草菇真菌免疫调节蛋白的基因序列281-353&肺炎衣原体的基因组序列和其多肽、片段以及其用途特别是用于诊断、预防和治疗感染356-354&一种新的生长因子和编码这种生长因子的基因序列035-355&含有EPSPS基因转基因作物核酸扩增用引物序列69-356&一种淋巴_特异性基因表达调控序列43-357&荧光PCR定性检测含有Bar基因转基因作物探针序列及试剂盒73-358&小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因的核酸序列及其应用04-359&一种昆虫抗冷冻蛋白基因序列及其表达纯化方法26-360&用于转基因玉米实时荧光PCR检测的探针序列和试剂盒84-361&衣原体蛋白、其基因序列及用途07-362&葡萄抗_病转录因子基因VpRFP1启动子序列及其应用41-363&人hPTP基因序列、其编码蛋白及制备方法09-364&用于转基因油菜籽实时荧光PCR检测的探针序列和试剂盒64-365&用于在细菌细胞中表达基因的修饰型信使RNA稳定化序列69-366&一种新的人基因编码序列、其编码的多肽及制备方法70-367&棉花金属硫蛋白基因GhMT1序列及其_与应用46-368&柽柳铁蛋白基因的cDNA序列及其编码的_酸序列96-369&用于蛋白质生产和传递的G－C_基因编码区上游的基因组序列95-370&编码pck基因的新核苷酸序列87-371&突变的_苯_酸双氧化酶、基DNA序列和含该基因且耐除草剂的植物的分离99-372&一种基因组短序列映射的快速处理方法及系统66-373&hHscFv-Rcr基因序列及转基因_的制备方法80-374&一种新的人基因序列、其编码的多肽及制法和用途91-375&人巨细胞_UL54基因的siRNA序列及应用84-376&麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因序列及其_蛋白制备方法09-377&葡萄芪合成酶基因病原菌诱导型启动子序列的应用28-378&编码抗肌萎缩蛋白小基因的DNA序列及其使用方法63-379&基因靶向序列盒51-380&人hGPR－iso基因序列、其编码蛋白及制备方法34-381&奈瑟球菌基因组序列及其用法54-382&人hTCRrp基因序列、其编码蛋白及制备方法13-383&切割来自谷氨酰胺合成酶基因的DNA靶序列的大范围核酸酶变体及其用途32-384&莲藕查尔酮合酶的基因序列及其用途04-385&遗传修饰的编码雪花莲凝集素的DNA序列及抗蚜转基因植物65-386&耐高温_乳清酸脱氢酶基因序列及编码的多肽和制备方法27-387&5’-RACE接头序列添加方法及接头序列和5’端未知基因完整编码序列的扩增方法69-388&牙鲆弹状_的全基因组序列及其测定方法27-389&连接豌豆营养生长特异因子基因序列和启动子的方法17-390&通过MAR序列的多次转染过程在哺乳动物细胞中实现高效基因转移和表达98-391&大豆7S球蛋白(α+β)亚基缺失型种质的α-亚基基因的特异性序列片断45-392&抗人活化血小板单_抗体可变区基因序列10-393&一种转sck cry1Ac双价抗虫基因水稻品系科丰8号外源插入片段旁侧序列及应用23-394&一种抗血液肿瘤的反义VEGF基因序列及其_真核表达载体67-395&盐藻26S蛋白酶体亚基RPT2基因的cDNA序列、其编码蛋白及其全长基因序列和_方法45-396&黄_鲷肌动蛋白的基因序列54-397&中国辽宁省__岛蝮_毒液中类凝血酶基因cDNA序列及其_76-398&一种诱导植物抗病促生的抑制素蛋白及基因序列81-399&甲型肝炎_基因组全序列00-400&编码基因sdhA,sdhB和sdhC的新核苷酸序列80-401&鹅源免疫球蛋白轻链Igλ全基因序列及_方法49-402&_曹鱼免疫球蛋白κ链的基因序列60-403&中国葡萄属_种麦黄葡萄抗_病候选基因序列及应用66-404&_onconase样功能基因Rdr-onc序列、构建方法及其_酸序列和用途78-405&斑节对虾延伸因子基因序列08-406&特异_猪瘟_基因组序列及高效治疗猪瘟_感染的方法99-407&调节基因表达的核苷酸序列和构建体及其使用方法61-408&一种新型α-醇溶蛋白基因的核酸序列及其应用51-409&茶树顶端幼芽中冬眠期间所表达和阻抑的新的基因序列的_39-410&一种人白细胞介素－10基因序列及含该基因序列的大肠杆菌51-411&将预定改变引入有核细胞基因组的靶序列中的方法37-412&人heIF2a基因序列、其编码蛋白及制备方法93-413&针对HCMVUL122基因的siRNA序列及应用97-414&用于产生和传递蛋白的IFN－α2基因编码区上游的基因组序列89-415&蝴蝶兰PhPI9基因编码序列及其应用93-416&编码类黄酮途径酶的基因序列及其用途21-417&带有棉铃虫单粒包埋核型多角体_基因和P10基因启动子序列的快速供体质粒及构建方法60-418&山羊S_3基因cDNA编码区核苷酸序列63-419&一种人基因表达调节因子相关蛋白及其编码序列50-420&茶树顶端幼芽中冬眠期间所表达和阻抑的新的基因序列的_20-421&调控基因的花药特异性表达的序列及其在生产雄性不育植物和_种子中的应用18-422&猪5羟色胺4受体b亚型的基因序列44-423&斑节对虾细胞周期蛋白B的基因序列46-424&一类水稻叶片表达序列标签及其构成的基因芯片54-425&花器特异性基因及其启动子序列22-426&狂犬病街毒株HN10全基因组序列及其制备方法和用途05-427&获取细菌16SrRNA基因的V3区核苷酸序列的方法及其专用引物37-428&肠道_71型基因组的序列及其应用57-429&水稻叶片特异表达序列标签及构成的基因芯片42-430&编码候选可塑性相关基因-1神经多肽的DNA序列以及所编码的多肽04-431&鱼类精_发育因子的基因序列及其用途20-432&牛催乳素基因组序列、含其基因的载体及其应用23-433&茄子花青素合成_黄酮醇4-还原酶的基因序列23-434&短小芽孢杆菌的基因启动子及其多核苷酸序列73-435&长春花第三组晚期胚胎丰富蛋白的基因序列58-436&一种检测豆科植物_的基因芯片、核苷酸序列及试剂盒18-437&编码tal基因的核苷酸序列40-438&水稻胚乳特异表达序列标签及构成的基因芯片94-439&番茄PG基因启动子反向重复序列及其载体和工程菌株45-440&α-半乳糖苷酶基因的优化序列及高效表达菌株72-441&新的_型抗体及其CDR_酸序列和编码它们的基因50-442&NRG1基因编码序列及其用途59-443&日本沼虾线粒体基因组全序列扩增的方法31-444&含有NOS终止子转基因作物核酸扩增用引物序列15-445&从粘质沙雷氏菌分离的S-腺苷高半胱氨酸核苷酸酶基因序列及表达_菌株41-446&一个胡杨NAC蛋白、其基因编码序列与应用48-447&一种乙肝_的逆转录酶基因的序列及应用28-448&人同源盒基因LHX4全长cDNA序列37-449&含有Cry3A基因转基因作物核酸扩增用引物序列09-450&切割来自人血红蛋白β基因的DNA靶序列的大范围核酸酶变体及其用途88-451&一种_湖羊肌细胞_素基因编码区全序列的方法18-452&白菜脱水应答转录因子BpDREB-1基因序列74-453&选择性控制基因表达的植物调节序列70-454&茶树顶端幼芽中冬眠期间所表达和阻抑的新的基因序列的_68-455&一种突变的人基因核苷酸序列编码多肽07-456&增强有用基因表达的核酸序列和方法63-457&一种基于_基因组序列的微小核糖核酸基因从头_控制方法94-458&与硫氧还蛋白或硫氧还蛋白还原酶基因互补的寡核苷酸序列以及将其用于调节细胞生长的方法15-459&红树植物秋茄金属硫蛋白基因及其编码的序列14-460&从粘质沙雷氏菌分离的S-腺苷_氨酸合成酶基因序列及表达_菌株71-461&栽培小麦Brock中一个受_菌诱导应答的基因cDNA序列及其获得方法52-462&人ad-ZNF127-xp基因序列、其编码蛋白及制备方法64-463&一种消除基因组重复序列的新方法及其在FISH探针制备中的应用98-464&花_凝集素基因序列13-465&一种与植物配子发育相关基因的cDNA序列及其应用73-466&用于增强编码序列基因表达的分离的DNA分子，包含所述分子的片段、基因变体、表达盒、载体、细胞、植物和种子49-467&抑制人RabJ基因表达的反义寡核苷酸序列及其应用89-468&转基因油菜T45_外源插入载体右边界旁侧序列及其应用22-469&基因_乙肝_表面抗原的基因修饰序列及其产物84-470&转基因油菜Oxy-235_外源插入载体右边界旁侧序列及其应用19-471&_子优化的艰难梭菌外毒素A羧基端基因序列及其核酸_30-472&P基因的_靶位点序列和小_核酸及组合物和应用66-473&人hMSC基因序列、其编码蛋白及制备方法80-474&小麦体细胞_类似13谷蛋白亚基基因的核酸序列及应用19-475&利用3-_-5-__酸(AHBA)合酶基因保守序列筛选安莎类_的方法29-476&人参液泡膜水孔蛋白基因、其编码的_酸序列和应用70-477&一种植物抗_基因的特异核苷酸序列及其应用21-478&一种棉纤维特异表达基因GhRLK1的cDNA序列及用途75-479&突变的SHV型β-内酰胺酶、其基因序列及应用65-480&一种消除基因组重复序列的新方法及其在基因组芯片中的应用39-481&含有玄参花叶_35S启动子转基因作物核酸扩增用引物序列78-482&用于转基因油菜(籽)实时PCR检测的引物序列和试剂盒88-483&一种检测转基因品系特异性时品系特异性序列的扩增方法08-484&编码基因sucC和sucD的新核苷酸序列78-485&包含向日葵Hahb-10基因编码序列的DNA构建体、包含该序列的转基因植物及该植物的制备方法29-486&__脂酰转移酶基因启动子区序列在作物遗传改良中的应用26-487&青斑肌动蛋白的基因序列49-488&荧光PCR定性检测含有花椰菜花叶_35S启动子转基因作物探针序列及试剂盒60-489&检测人K-ras基因外显子12、13突变的核苷酸序列、方法及试剂盒86-490&转基因油菜Rf2_外源插入载体旁侧序列及其应用02-491&MlrA基因cDNA序列、编码_酸和水体中微囊藻毒素的检测方法96-492&_葡萄泛素结合酶基因序列79-493&一种对胃肿瘤细胞有特异性作用的雷丸蛋白及其基因序列47-494&一类新的水稻胚乳表达序列标签及构成的基因芯片18-495&一种转基因番茄特异性检测靶序列、质粒标准分子及其检_剂盒08-496&耐高温纤维素酶基因序列及编码的多肽和制备方法64-497&一种L-乳酸脱氢酶基因及其编码的_酸序列和制备过程中设计的引物38-498&肺癌分型的基因序列及其应用39-499&一类新的水稻胚乳特异表达序列标签及其基因芯片20-500&猪TT_1型CJNY株基因组的核苷酸序列35-501&人HS5AR-iso基因序列、其编码蛋白及制备方法51-502&水稻叶片特异表达序列标签及其基因芯片70-503&人hNO27基因序列、其编码蛋白及制备方法66-504&盐藻26S蛋白酶体亚基RPN10基因的cDNA序列、其编码蛋白及其全长基因序列和_方法85-505&编码果蝇乙酰胆碱酯酶的核苷酸基因序列19-506&编码rplk基因的核苷酸序列及其使用方法55-507&一种高温脂肪酶、其编码基因序列及其用途68-508&人hNIF3-s基因序列、其编码蛋白及制备方法15-509&包含_序列基序的构建体在增强藓类中基因表达中的应用70-510&小_Dnaic2基因序列12-511&蝴蝶兰成花相关基因PRP39的编码序列及应用40-512&切割来自RAG基因的DNA靶序列的大范围核酸酶变体及其用途13-513&人_素α2a基因cDNA编码修饰_序列74-514&一种_鸡细胞视黄醇结合蛋白1基因编码区全序列的方法27-515&流感A Udorn 72(H3N2)基因组的核苷酸序列89-516&快速检测IT15基因CAG重复序列动态突变的引物及方法79-517&核磷蛋白质(NPM)突变体、其相应基因序列及其用途37-518&1，6-缩水-β-D吡喃葡萄糖（LG）激酶的分离纯化方法及其基因序列73-519&盐芥V-焦_酶基因启动子序列和其缺失突变体的应用79-520&用于转基因棉花(籽)实时PCR检测的引物序列和试剂盒82-521&一种改进的线粒体基因组全序列测定方法46-522&尖_蝮__毒类凝血酶的基因序列95-523&斑节对虾细胞周期蛋白B的基因序列26-524&特异性沉默鸡马立克氏病_gI、gE基因的siRNA序列及其载体和应用66-525&按植物偏爱_子的Rcr基因序列11-526&_曹鱼MHC-Ⅱα基因序列77-527&一种乙酰胆碱酯酶基因及其突变体的核酸序列及应用36-528&人hMKPx基因序列、其编码蛋白及制备方法14-529&蝴蝶兰PhAGCu基因编码序列及其应用22-530&一种与抗黄矮病基因B_2连_的同源序列及其应用53-531&一种用于基因治疗的新型细胞特异性内含microRNA结合序列的基因HA_mir00-532&提高番茄作物产量的启动子序列和基因构建体54-533&固氮鱼腥藻乙酰乳酸合酶基因的核苷酸序列61-534&_超氧化物歧化酶基因序列及其工程菌、产物制备方法92-535&编码1rp基因的新核苷酸序列51-536&玉米苹果酸脱氢酶基因启动子序列_和应用34-537&编码1ysR2基因的核苷酸序列01-538&一种低温脂肪酶及其基因序列78-539&一种乙酰胆碱酯酶基因及其突变体的核酸序列及应用92-540&人巨细胞_UL122基因的siRNA序列及应用16-541&一种鸡cLATS1基因、核苷酸和蛋白的编码序列，及其制备与用途26-542&在轻度低温下能促进基因表达的序列31-543&一种β－甘露聚糖酶的基因序列及其编码的_酶的制备06-544&抑癌基因编码蛋白序列及其融合表达载体96-545&黑龙江省_线粒体基因组全序列_及进化分析81-546&转基因油菜Rf3_外源插入载体旁侧序列及其应用14-547&二类内含子靶向整合真核细胞染色体基因组上的特定序列94-548&石斑鱼亚科鱼类线粒体基因组全序列扩增引物及其设计方法34-549&山羊S6K2基因cDNA编码区核苷酸序列91-550&用于在植物繁殖_中表达基因产物的调控序列18-551&绿色木霉内切葡聚糖酶基因egⅦ及其编码的_酸序列和用于_该基因的引物65-552&从嗜冷菌分离的低温脂肪酶基因序列及其表达_菌株22-553&鉴定抗原基因序列的方法52-554&茶树顶端幼芽中冬眠期间所表达和阻抑的新的基因序列的_02-555&石斑鱼垂体中一个胚胎发育调控因子的基因序列及用途74-556&一种新的人基因序列、其编码的多肽及制备方法98-557&人类基因短串联重复序列分型标准物的分子_制备方法40-558&一种_基因序列的装置和方法55-559&鼻咽癌恶性_基因Tx基因DNA序列及其测定方法18-560&针对乙肝_基因的siRNA序列及其用途83-561&水稻OsPT6:1基因编码序列及其应用41-562&人癌胚抗原肽表位基因编码序列串联体的合成及表位_14-563&Ig的CDR3基因的反义序列在制备肿瘤治疗药剂上的用途44-564&人类白细胞抗原HLA-A、B基因全长序列测定以及HLA基因测序分型方法74-565&长春花谷胱甘肽转移酶的基因序列61-566&一种来源于垫状卷柏的海藻糖-6-_合成酶基因序列及其_方法33-567&含有Bar基因转基因作物核酸扩增用引物序列52-568&CIDE-A基因CpG启动子序列及其应用86-569&来源于发光光杆状菌tcd基因组片段的DNA序列05-570&转基因水稻品系Bt汕优63的外源插入片段的旁侧序列45-571&一类新的水稻胚乳表达序列标签及其基因芯片48-572&新的水稻叶片表达序列标签及其构成的基因芯片26-573&带有腺相关_末端序列的基因载体及其应用64-574&罗非鱼白细胞cAMP诱导早期抑制因子基因序列及用途19-575&白菜脱水应答转录因子BpDREB-2基因序列87-576&与液泡pH相关的植物基因序列及其用途85-577&转基因油菜Rf1_外源插入载体旁侧序列及其应用62-578&马传染性贫血_驴白细胞弱毒_株的全长基因序列02-579&调控基因的花药特异性表达的序列及其在生产雄性不育植物和_种子中的应用24-580&草鱼肠道_腺苷酸基琥珀酸裂解酶基因序列12-581&_曹鱼免疫球蛋白μ链的基因序列69-582&乙型肝炎_基因的小核酸_靶位点序列和小_核酸及组合物和应用71-583&人hNRBF2基因序列、其编码蛋白及制备方法59-584&胰高_素受体基因的RNA_序列17-585&膜定位葡萄球菌肠毒素A及其基因序列29-586&猪肉质性状相关基因TRIM63的分离核酸序列79-587&猪生产性状相关基因CACNA2D1的序列及其用途43-588&斑节对虾热休克蛋白90的基因的核苷酸及_酸序列08-589&植物病原菌诱导型乙烯响应因子基因启动子序列及其应用25-590&ST13基因5 端启动功能区序列及应用93-591&编码thrE基因的新核苷酸序列和用棒状菌酶促生产L－苏氨酸的方法85-592&鸭肠炎_基因组DNA的提取及其序列31-593&MATP基因的_靶位点序列和小_核酸及组合物和应用76-594&甘蔗B家族蔗糖_合成酶基因及其编码蛋白序列47-595&在轻度低温下能促进基因表达的序列68-596&一种新的人基因编码序列、其编码的多肽及制备方法58-597&绒山羊PDK1基因cDNA编码区核苷酸序列32-598&ESR基因部分序列及与猪的产仔性状相关的ESR基因和FSH－Beta基因的多态检测技术46-599&石斑鱼性反转基因蛋白及核苷酸序列和应用30-600&以组蛋白为核心序列的靶向性基因导入系统76-601&高免疫活性CpG-SODN和拮抗CpG-SODN作用的CpG-NODN的基因序列及其应用36-602&一种人工合成的对_害虫高毒力的Btcry8基因序列99-603&花_白细胞介素8基因序列01-604&含有携带剪接受体的基因工程细胞非编码序列的高效逆转录_载体58-605&中国人基因组cDNA文库白细胞介素21的编码基因序列及其蛋白质的_酸序列41-606&一类新的水稻胚乳表达序列标签及其构成的基因芯片07-607&对DNA损伤_的抑癌基因序列30-608&猪总产仔数性状相关基因_P3的分离核酸序列49-609&一种小麦矮腥黑粉菌的特异基因序列、特异性SCAR标记及PCR检测方法62-610&按植物偏爱_子设计人工合成胸腺素α1基因序列15-611&一种抗昆虫血细胞免疫的蛋白及基因序列03-612&高温双链DNA_菌体GBSV1的全基因组序列02-613&罗布麻DNA解旋酶基因APDH1序列及其_与应用91-614&用于在植物繁殖_中表达基因产物的调控序列53-615&癌胚抗原基因启动子DNA的_方法、序列及其用途03-616&增强有用基因表达的核酸序列和方法88-617&蝴蝶兰ORAP11基因编码序列及其应用77-618&YN87448_毒株全基因组序列及其_方法61-619&中国葡萄属_种刺葡萄抗_病候选基因序列及应用72-620&奶牛性别决定区基因核心序列及其应用57-621&中国葡萄属_种秋葡萄抗黑痘病候选基因序列及应用81-622&一种木糖还原酶基因及其编码的_酸序列91-623&编码eno基因的新核苷酸序列31-624&摩尔根氏变形杆菌的(D)-专一性羰基还原酶的基因序列和_酸组成71-625&一种新的人基因编码序列、其编码的多肽及制备方法39-626&一种删除转基因动物中标记基因的方法及其专用序列盒23-627&_神经元营养因子基因序列06-628&调节基因表达的核苷酸序列和构建体及其使用方法27-629&甘蓝型油菜脂肪酸延长酶基因缺失突变型核酸序列及其应用72-630&一种_山羊TNNC2基因编码区全序列的方法53-631&漆酶活性相关基因序列16-632&番茄花叶_弱毒_K基因组全序列03-633&弥漫性_细胞淋巴瘤相关抗原特异TCRVβ13亚家族的RG基因序列及应用00-634&浅色黄姑鱼泌乳_基因序列91-635&利用特异基因序列鉴别药用灵芝的检测方法35-636&编码menE基因的核苷酸序列67-637&一种人乙酰胆碱酯酶异构体蛋白（AR－ACHE）及基因编码序列45-638&针对M基因检测甲型H1N1流感_2009变异株的核苷酸序列和试剂盒04-639&一种抗昆虫血细胞免疫的线虫表皮蛋白及基因序列63-640&按植物偏爱_子的hEscFv基因序列40-641&过表达心肌锚定重复序列蛋白的转基因动物、其产生方法及应用86-642&转基因水稻TT51-1__外源载体整合位点全序列及其应用83-643&转基因油菜Oxy-235_外源插入载体左边界旁侧序列及其应用77-644&一种用于鉴定未知基因序列的连接片断PCR检测方法76-645&TPMT基因SNP检测的特异性序列、液相芯片及方法29-646&Nogo基因的核苷酸序列和蛋白序列以及基于其的方法98-647&弥漫性_细胞淋巴瘤相关抗原特异TCRVα23亚家族的VR基因序列及应用47-648&乙肝_基因的小_核糖核酸序列及制备方法42-649&抗溶藻弧菌独特型单_抗体可变区的基因序列06-650&转基因水稻品系克螟稻1的外源插入片段的旁侧序列62-651&含有压力诱导型启动子序列和二_合成酶编码基因序列的核酸83-652&针对2009新甲型流感_多聚酶基因和_白基因的siRNA序列及其应用47-653&荧光PCR定性检测含有玄参花叶_FMV35S启动子转基因作物探针序列及试剂盒92-654&_S期激酶蛋白1基因序列及其编码蛋白质序列和应用14-655&编码gpm基因的新核苷酸序列38-656&蝴蝶兰花发育B族基因-PhAP3编码序列及其应用21-657&一种_植物_基因组特定序列的方法80-658&_子优化的艰难梭菌外毒素A羧基端基因序列及其核酸_20-659&利用编码RNA聚合酶σ70因子的基因(rpoD)序列对副溶血弧菌进行检测、鉴定及计数的方法65-660&短串联重复序列等位基因阶梯的制备技术88-661&编码pgi基因的新核苷酸序列58-662&切割来自HPRT基因的DNA靶序列的大范围核酸酶变体及其用途94-663&一种抑制bak基因表达的siRNA序列16-664&抑制人Akt2基因表达的siRNA序列及其融合表达载体58-665&来自绿色木霉的纤维素酶cbh1基因的调控序列以及利用该序列的蛋白质或多肽的大量生产体系83-666&沙眼衣原体的基因组序列和多肽,其片段以及其用途,特别是用于诊断、预防和治疗感染01-667&浅色黄姑鱼生长_基因序列41-668&中国庚型肝炎_C基因序列及其应用31-669&一种人白血病相关逆转录_基因组核酸序列及其应用17-670&编码opcA基因的核苷酸序列94-671&一种北非_昆虫毒素基因序列及应用24-672&编码glb0基因的新核苷酸序列33-673&增强_菌体溶菌基因打孔效率的DNA序列及其应用64-674&耐高温亚精胺合酶基因序列及编码的多肽及制备该多肽的方法26-675&一种_黄芪异黄酮合成酶基因及其全长cDNA序列56-676&扩增抗体重链前导序列及可变区基因序列的方法及其引物90-677&甜菜单体附加系M14品系小G蛋白基因及其编码的_酸序列和引物74-678&检测ATXN3基因CAG重复序列动态突变的引物及其PCR扩增方法33-679&乙型肝炎_单_抗体可变区序列以及含有所述可变区的基因工程抗体及其用途82-680&根据时间序列基因表达数据的基因网络的非线性模拟
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