液氮罐可以储存哪些干细胞储存？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-07-24 02:15 标签： 储存运输两用液氮罐
液氮光保存脐带血有哪些问题？
　随着超低温技术的应用，液氮冷冻技术逐渐应用于医疗行业，而如今一部分人选择液氮保存脐带血，有关于保存脐带血的问题班德讲解如下：
　　问：脐带血冻存有没有实际用途?
　　脐带血作为造血干细胞的三大来源之一，含有丰富的造血干细胞，具备采集方便、对被采集者不会造成伤害、临床应用及时、移植后排斥率低且程度较轻等优势。
　　脐带血除了治疗血液系统疾病以外，还可治疗免疫系统、遗传代谢性及先天性疾病等。在世界范围内，脐血已经应用于治疗80多种疾病。在我国卫生部颁发的《脐带血造血干细胞治疗技术管理规范(试行)》中规定，脐带血造血干细胞治疗技术适应症包括白血病、骨髓增生异常综合征、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、恶性肿瘤、重症再生障碍性贫血、重症放射病、重症免疫缺陷病等10余类。
　　问：脐带血是不是只能存18年左右?
　　目前正规脐带血库的技术完全达到国际标准。以北京市脐血库为例，一份脐带血从采集运输、制备、检测，到最终的存储，可谓层层关卡，流程严苛。脐带血最终被保存在-196℃深低温的液氮罐中，处于休眠状态。对于脐带血在液氮中可永久保存的理论已得到医学界的广泛认同。
　　广东省脐血库一份冻存长达15年的脐带血造血干细胞成功救治一名11岁急性髓细胞白血病女孩，成为国内冻存脐带血年限临床应用之最。
　　问：至今有自存脐带血救治自体白血病的成功案例吗?
　　从医学理论分析，白血病的发病原因有先天性和后天性两种，自体脐带血不能纠正自身基因缺陷，不能用于先天性白血病的治疗;后天因素导致的白血病，完全可以使用自体脐带血移植进行治疗。在对白血病发病机制的研究中表明，其发病原因多与后天因素有关，对大多数白血病而言，不是遗传性疾病。
　　从临床治疗实例看，北京一位3个月诊断为白血病的患儿，通过自体储存脐带血排除先天性白血病后，于2013年7月使用自体脐带血进行了移植，这是我国目前为止年龄最小的自体脐带血移植患者。
　　问：有遗传病能不能保存脐带血?
　　遗传病是指完全或部分由遗传因素决定的疾病。有些遗传病需要在遗传因素与环境因素的共同作用下才能发病，对于这些遗传病，使用自体脐带血即使无法根治，也可起到缓解病情的作用。
　　脐带血保留了个人最原始的遗传信息，其出生后的任何重大疾病，均可通过与该遗传信息进行比对，来推导疾病可能的发病原因，进而明确诊断和治疗。因此，即使有遗传病，自体脐带血也是有保存价值的。
　　问：一份脐带血中含有的造血干细胞数量太少，患者年龄大了够不够用?
　　脐带血移植，配型是最关键的，如果配型6个点位全相合，其效果比骨髓、外周血移植恢复得还要快。
　　以北京市脐带血造血干细胞库所接收的脐血为例，其有核细胞数最低不低于2&108。这足以救治一个30公斤的患者(相当于10岁的孩子)。而北京库平均冻前有核细胞总数已达到8.15&108，理论上可以满足100公斤的患者自体移植使用。
　　问：自存脐带血性价比不高，使用概率低?
　　以北京市脐血库为例，首次的脐带血检测费用为6800元，每年收取980元的保管费，合同签署的时间为18年，待脐带血所有人具有完全民事行为能力后，再由其本人决定是否继续储存，并不是只能存储18年
　　另外，每个在正规脐血库自体储存脐带血的宝宝都会获赠一份脐带血干细胞储存医疗保险，保险金额为每年42.5万元。
一旦孩子需要使用脐带血进行造血干细胞移植，脐带血附赠的保险最高可报销30万元脐带血干细胞移植费，可以大大缓解家庭的医疗负担。
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实验室新手，今天配了50ml的冻存液，DMEM：FBS：DMSO=7：2：1，请问能不能在-20°C长久保存呀？？？？好伤心呀
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最好是梯度降温，最后在液氮中保存。如果有梯度降温盒，可以将冻存样本放在冻存盒中，再放在-80冰箱，如果没有梯度降温盒，那就在4度冰箱和负20度冰箱依次放置2小时后再转到负80度，负80度过夜后再转到液氮罐，在液氮中可以长期保存的。一般不建议在-20°C保存，至少也是-80°C保存。
另外，冻存液的比例不同实验室也会不一样，营养成分不同，细胞活力和保存期限也不一样吧，有的甚至直接用FBS：DMSO=9：1。
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你是说冻存液配多了，一次用不完吗？我们一般保持在4度冰箱，一周内用于冻存细胞
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一两周内能用完的话可以保存在-20度，时间再长点就-80度了，如果更长的时间最好放液氮保存，不过需要梯度降温。
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最好不要放很久，我们实验室配置好的冻存液一般在4度冰箱放一周，超过一周就不要了，个人觉得配好的冻存液反复冻融不好。其实如果不怕麻烦，现配最好了，不过使用前必须预冷处理。
冻存细胞时，加冻存液混匀装冻存管后放入4度预冷的程序降温盒，再将程序降温盒转到-81度冰箱16小时后转入液氮箱保存。（我们实验室一般不放-20度，当然放30分钟也可以，前提是程序降温盒转移时在室温下的时间不长）
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我们实验室的原则是冻存液现配现用效果很少。偶尔有多配的也是冻存于-80冰箱，并且一周内用完，否则效果不好得不偿失
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我们实验室用的冻存液和你的一样，剩余的冻存，一两个月还用，没什么问题。
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最好在冰上配置，现配现用。
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我们实验室用的冻存液一两个月还用，没什么问题。
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我们实验室用的冻存液和你的一样一两个月还用，没什么问题。
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液氮罐的使用注意事项及细胞的储存
的使用注意事项：
1、液氮是一种超低温液体(-196℃)，如溅到皮肤上会引起类似烧伤一样的冻伤，因此在灌充和取出液氮时应特别注意；&
2、不能用其它塞子代替专用罐盖，更不能使用密封的塞子，以免液氮持续蒸发，而形成的氮气压力增高而导致容器的损坏；&
3、检查容器内液面高度时，应用实用塑料小棒或实心小木棒插入底部，过5～10秒后取出，结霜的长度即是液面高度；&
4、长期存放液氮的房间应开窗通风、换气。
细胞的储存：
细胞培养如何保存，工作浓度的胰酶是不是应保存在－20度？如果放在4度冰箱可以保存多久呢？是不是几个小时就会失去活性？&
平时放在-20度，分装在50毫升螺口管，用时拿一管放4度用。&
认真按照操作规程进行实验，一般不大会导致污染，很多情况下是由于所用的试剂或培养基有污染而使实验失败， 粉末培养基配制好后(加了血清)，一般在4度尽量不要超过1个月，如在-20度存放时间可长一些，但最好也不要超过3-4个月，可能对于永生化细胞株来说要求不是太高，但我在过去的4年里一直是作原代细胞培养的，细胞娇弱，经验表明放置时间不宜过长。&
关于实验用品的清洗与消毒，经验是：用过的玻璃器皿先在清水中浸泡30min以上，然后加少许清洗剂，以超声波洗涤30min左右，(如无超声波洗涤器可用软毛刷轻轻刷洗干净)，捞出晾干，再在铬酸洗液中浸泡6-18h(或过夜)后，自来水清洗10-15遍，双蒸水清洗3-4遍，晾干，高压消毒后即可使用。
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