5.显微鉴别图谱时不能用水装片检查的是( ) A.含淀粉粒的生药 B.含石细胞

扫二维码下载作业帮 1.75亿学生的选择 下载作业帮安装包 扫二维码下载作业帮 1.75亿学生的选择 下列各组物质不能用水来鉴别的是(&) A.CaCO 3 和 Na 2 CO 3 B.K 2 SO 4 KNO 3 C.生石灰和熟石灰 D.CuSO 4 和Fe 2 (SO 4 ) 3 花花邪帝6H 扫二维码下载作业帮 1.75亿学生的选择 用水来鉴别的物质,一般根据两种物质的溶解性或水溶液的颜色或溶于水时溶液的温度变化来鉴别。A选项中,CaCO 3 难溶,Na 2 CO 3 易溶,可以鉴别;B选项中K 2 SO 4 和KNO 3 都易溶于水,且溶液都没有颜色,不能鉴别;C选项中,生石灰遇水放热,而熟石灰不放热,可以鉴别;D选项中,CuSO 4 溶液蓝色,而Fe 2 (SO 4 ) 3 溶液红褐色,可以鉴别。 为您推荐: 扫描下载二维码您所在位置: &  &  &  (网络教学平台生药题目及答案.doc 43页 本文档一共被下载: 次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。 下载提示 1.本站不保证该用户上传的文档完整性,不预览、不比对内容而直接下载产生的反悔问题本站不予受理。 2.该文档所得收入(下载+内容+预览三)归上传者、原创者。 3.登录后可充值,立即自动返金币,充值渠道很便利 需要金币:150 && 你可能关注的文档: ·········· ·········· 绪论单选题:以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案。1.我国已知最早的药物学专著是()A、《神农本草经B、《本草拾遗》C、《新修本草》D、《证类本草》E、《本草纲目》2.收载藏药最多的一部大典是()A、《神农本草经》B《晶珠本草》C《证类本草》D《救荒本草》E、《植物名实图考》3.我国最早一部具有药典性质的本草著作是()A《神农本草经》B《本草纲目》C《新修本草》D《证类本草》E《晶珠本草》4.我国现存最早的完整的本草著作是()A、《神农本草经》B、《本草纲目》C、《植物名实图考》D、《新修本草》E、《证类本草》5.由李时珍编撰的我国著名的明代药物学著作是()A、《神农本草经》B、《本草纲目》C、《植物名实图考》D、《新修本草》E、《证类本草》多选题:以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案,请从中选择所有正确答案。1.下列有关《神农本草经》的叙述正确的有()A、我国已知最早的药物学专著B、载药365种C、分上、中、下三品D、成书年代在东汉时期E、总结了汉代以前的药物知识2.下列有关《本草纲目》的叙述正确的有()A、元代对药学贡献最大的本草著作B、载药1892种C、为我国现存最早的完整本草D、曾被译为多国文字,成为世界性的重要药学文献之一E、本书作者为李时珍填空题:1.我国已知最早的药物学专著是《》,载药种。2.我国最早的一部药典性质的著作是《》。3.我国明代著名的本草著作名为《》,作者是,载药种。4.生药来源于、和。5.我国古代记载药物来源及应用知识的书籍多称。是非题:1.?()2.我国最早一部具有药典性质的本草著作是《本草纲目》。()3.生药学主要是研究生药功效的科学。()名词解释:1.生药2.草药3.道地药材4.生药学5.中药简答:现阶段生药学的具体任务是什么?参考答案:单选:1A、2B、3C、4E、5B多选:1ABCDE、2BDE填空:1.神农本草经3652.唐本草3.本草纲目李时珍18924.植物动物矿物5.本草是非题:错错错名词解释:1.来源于天然的、未经加工或只经简单加工的植物、动物和矿物药材。相当于中药材。2.一般指局部地区民间草医用以治病或地区性口碑相传的民间药,其中也有本草书上记载的药物。3.指来源于特定产区的货真质优的生药,是中药材质量控制的一项独具特色的综合判别标准的体现。4.研究生药的名称、来源、生产、采制、鉴定、化学成分、品质评价、细胞组织培养、医疗用途及资源开发利用等方面的科学。5.指中医用以治病的药物,是根据中医学的理论和临床经验应用于医疗保健的药物。简答题:准确识别、鉴定生药基源的种类;调查、考证生药资源;制定生药或其制剂的质量标准,并对其进行品质评价;为中药材生产规范化服务。第一章生药的分类与记载单选题:以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案。1.临床主要功效不是泻下攻积的生药是()A、大黄B、芒硝C、五味子D、番泻叶E、芦荟2.Rhizoma是生药药用部位的名称,是指()A、根茎B、茎C、根D、果皮E、树皮3.临床主要功效是泻下攻积的生药是()A、天麻B、大黄C、防风D、菊花E、薄荷4.临床主要功效不是解表的生药是()A、大黄B、麻黄C、防风D、菊花E、薄荷5.临床主要功效是泻下攻积的生药是()A、桑螵蛸B、乌梅C、五味子D、山茱萸E、巴豆6.临床主要功效不是解表的生药是()A、附子B、白芷C、防风D、菊花E、薄荷7.临床主要功效不是滋阴的生药是()A、麦冬B、沙参C、玄参D、太子参E、天冬8.临床主要功效是解表的生药是()A、桑螵蛸B、麻黄C、五味子D、山茱萸E、巴豆9.临床主要功效不是壮阳的生药是()A、杜仲B、肉苁蓉C、百合D、冬虫夏草E、蛤蚧10.Radix是生药药用部位的名称,是指()A、根茎B、茎C、根D、果皮E、树皮11.Caulis是生药药用部位的名称,是指()A、根茎B、茎C、根D、果皮E、树皮12.Folium是生药药用部位的名称,是指()A、根茎B、茎C、根D、叶E、花13.Flos是生药药用部位的名称,是指()A、根茎B、茎C、根D、叶E、花14.Herba是生药药用部位的名称,是指()A、全草B、茎C、根D、叶E、花15.Semen是生药药用部位的名称,是指()A、全草B、果实C、种子D、叶E、花16.不含有蒽苷类成分的生药是()A、大黄B、虎杖C、首乌D、甘草E、芦荟17.不含有鞣质类成分的生药是()A、诃子B、山茱萸C、五倍子D、儿茶E、巴豆18.临床主要功效是辛凉解表的生药是()A、白芷B、薄荷C、防风D、山茱萸E、巴豆19.生药拉丁名的组成原则通常是()A、属名+种名十药用部位名B、原动(植)物的学名十药用部位名C、属名十种加词+命名人姓氏D、种名十药用部位名E、药用部位名+ 正在加载中,请稍后...您所在位置: &  &  &  生药学模拟试题概述.doc 18页 本文档一共被下载: 次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。 下载提示 1.本站不保证该用户上传的文档完整性,不预览、不比对内容而直接下载产生的反悔问题本站不予受理。 2.该文档所得收入(下载+内容+预览三)归上传者、原创者。 3.登录后可充值,立即自动返金币,充值渠道很便利 需要金币:160 && 你可能关注的文档: ·········· ·········· 生药学模拟试题A卷一、单项选择题(在每小题的四个备选答案中,选出一个正确答案,并将正确答案的序号填在题干的括号内。每小题1.5分,共45分)1.“四大怀药”包括()。A.怀牛膝、地黄、山药、菊花 B.怀牛膝、地黄、山药、红花C.怀牛膝、地黄、山药、芫花 D.怀牛膝、地黄、山药、金银花2.根和根茎类生药一般在何时采收?()A.春夏之交 B.春季C.秋季 D.秋后春前3.测定中药灰分的温度应控制在()。A.100-105℃ B.250-350℃C.300-400℃ D.500-600℃4.烘干法测定水分适合于()。A.各种生药 B.不含或少含挥发性成分的生药C.含挥发性成分的生药 D.含挥发性成分的贵重生药5.川乌的剧毒成分为()。A.异喹啉类生物碱 B.双蒽酮苷类C.双酯类生物碱 D.乌头毒素6.三七的横断面为()。A.灰绿色或黄绿色,有棕色树脂道点 B.黄绿色,有红色油室点C.黄棕色,有裂隙 D.红棕色,有白色小点7.玄参根横断面特征为()。A.棕色,粉性 B.黄色,角质性C.黑色,粉性 D.乌黑色,有光泽8.天麻粉末中不含()。A.厚壁细胞 B.草酸钙针晶C.导管 D.淀粉粒9.非正品大黄()。A.断面在UV下显棕色荧光 B.根茎有星点C.根或根茎都有星点 D.除藏边大黄外根茎均无星点10.下列选项中除哪项外均为味连的性状特征?()A.多单枝,圆柱型,“过桥”长 B.表面黄褐色,有结节状隆起及须根痕C.有放射状纹理,中央有髓 D.气微,味极苦11.黄芩乙醇提取液加镁粉与盐酸试液,呈红色,是检查()。A.生物碱 B.黄酮类C.甾醇类 D.挥发油类12.下列哪一种生药不是来源于伞形科?()A.白芷 B.当归C.独活 D.白芍13.下列除何者外均是青贝的原植物?()A.川贝母 B.梭砂贝母C.甘肃贝母 D.暗紫贝母14.钩藤来源于()。A.茜草科 B.豆科C.葫芦科 D.木兰科15.以根皮入药的是()。A.肉桂 B.秦皮C.桑白皮 D.杜仲16.皮类生药通常是指来源于裸子植物或被子植物茎、枝或根的()。A.木栓形成层以外的部分 B.形成层以外的部分C.周皮部分 D.皮层以外的部分17.硬韧部与软韧部切向相间排列成层的是()。A.厚朴 B.肉桂C.黄柏 D.牡丹皮18.番泻叶基部的特点是()。A.心形 B.楔形C.不对称 D.下延成翼状19.花蕾呈研棒状,长1~2cm,表面红棕色或暗棕色,有颗粒状突起的生药是()。A.金银花 B.洋金花C.丁香 D.红花20.花头(头状花序)撕开后,有白色絮状茸毛的花类生药是()。A.槐花 B.款冬花C.菊花 D.红花21.花粉粒外壁具短刺及疣状雕纹,分泌管单列纵向相连的花类生药是()。A.红花 B.洋金花C.金银花 D.丁香22.枸杞子的入药部位是()。A.种仁 B.种子C.果实 D.外果皮23.砂仁果皮薄而软,中轴胎座,分为()。A.3室 B.4室C.5室 D.6室24.五味子种皮有石细胞()。A.1~5层 B.2~6层C.3~7层 D.4~8层25.麻黄的原植物属于()。A.双子叶植物 B.裸子植物C.蕨类植物 D.被子植物26.茯苓粉末显微观察可见()。A.草酸钙簇晶 B.草酸钙方晶C.菌丝极多 D.糊粉粒27.五倍子的有效成分属()。A.鞣质类 B.黄酮类C.蒽醌类 D.生物碱类28.麝香仁粉末加何者共研,香气消失?()A.氢氧化钠 B.五氯化锑C.香草醛 D.氨水29.鹿茸中“二杠”的含义是()。A.花鹿茸有一个侧枝者 B.马鹿茸有一个侧枝者C.花鹿茸有二个侧枝者 D.马鹿茸有二个侧枝者30.其水液可使指甲染黄习称“挂甲”的生药是()。A.麝香 B.蟾酥C.牛黄 D.熊胆二、填空题(每空1分,共20分)31.生药贮藏过程中常见的变质现象有、、变色、泛油和跑味等。32.中药炮制中炒炭的目的主要是。33.生药鉴定的一般程序包括检品登记、、杂质检查、鉴定、含量测定和报告等。34.半夏来源于科植物,艾 正在加载中,请稍后...当前位置: >> 11-生药的鉴定 生药的鉴定 第一节 生药鉴定的意义生药鉴定(identification of crude drug)?依据国家药典、有关资料规定或有关专著对生药作真实性、纯度及品质优良度的检定。 一、发掘中医药学遗产,整理中药品种?
中药材同名异物、同物异名,品种混乱现象。?木通科的木通(古称三叶木通)、毛茛科的 川木通和马兜铃科的关木通都统称为木通。益母草,东北叫坤草,又叫楞子棵,江苏称?为天芝麻或田芝麻,浙江叫三角胡麻,青海 叫千层塔,四川叫血母草,甘肃又叫全风赶, 广东名红花艾,云南又称透骨草,而商品透 骨草又有十数种之多。 二、制订生药质量标准,促进生药标准化?以假冒真或掺伪,特别是贵重药材,如常用 名贵中药三七,以竹节参、菊三七、莪术、 白芨、水田七、藤三七、木薯淀粉伪制品等 充三七销售。牛黄为牛的胆结石或胆管、肝 管结石,其中有用淀粉加工的或用果实种子 包以黄土等伪充的,有用其他动物的结石冒 充的。 三、寻找和利用新药资源,发展中药事业?发掘本国资源,如我国东北地区用于治疗气 管炎疗效较好的满山红(兴安杜鹃),从本 地区同类植物中寻找,结果西北的小叶批杷 (烈香杜鹃)、广东的紫花杜鹃等相继被发 掘利用。上述中药的发现与应用,大大改变了单独依 靠进口药材的局面。? 第二节 生药鉴定的一般程序与方法?1、生药鉴定的依据:三级标准?? ? ? ?中国药典:即中华人民共和国药典,是国家药品的法律。 部颁药品标准: 即中华人民共和国卫生部药品标准。 地方药品标准:?各地区根据自己的实际情况制定出来的药品 标准。 ?2、生药鉴定的取样 应注意有代表性,并有足够数量。??药材的取样是指选取供鉴定用的药材样品。 取样的代表性直接影响到检定结果的正确 性. 方法(程序):(1)详细记录药材的品名、产地、批号、规 格、 等级、包件式样等,注意是否与标签 相一致。??? ?(2)检验包件的完整性和清洁程度,注意有无水迹、霉变或 其他物质污染等异常情况,作详细记录。凡有异常情况的 包件,应单独检验。 (3)注意取样的代表性: 固体:包件不同地方取样(三点取样法、五点取样法)。 液体:混匀或顶、中、底取样(不易混匀者)。 贵重药材:逐件抽样。? ? ? ? ?(4)取样量:(三份检验的量:供实验分析、复查、留样保存用)。 要足够鉴定应用的需要,还要供复核及留样保存使用。保 存期至少1年。? 第三节 生药原植物鉴定? ?常用的鉴定方法有四种: 来源鉴定、性状鉴定、显微鉴定及理化鉴定?来源鉴定:应用植(动)物分类学知识,对中 药的来源进行鉴定,确定其正确的学名;应 用矿物学知识,确定矿物中药的来源,保证 品种的准确性。目的:保证在应用中品种准确无误。? ??1、观察植物形态:对于具有较完整植物体的中药,应注意其根、茎、叶、花、 果实等部位的观察。特别对繁殖器官可借助放大镜或解剖 显微镜进行观察。 2、核对文献: 目的:根据观察到的形态特征等,确定检品科属。? ? ?在核对文献时,首先应查考植物分类学著作,其次再查阅 具有鉴定中药品种方面的著作。3、核对标本:??当已定下科属时,可到标本室核对该科属标本,确定正确 的学名。注意:标本室已定学名标本必须正确可靠。? 第四节 原植(动)物鉴定? ??观察植物形态 核对文献 先查植物分类方面的著作,《中国高等植物科属检 索表》、《中国药用植物图鉴》、《中国高等植物 图鉴》和有关的区域性植物志、药物志,再查中药 品种鉴定方面的著作如《全国中草药汇编》、《中 药大辞典》、《中药志》、《中药鉴别手册》和 《新华本草纲要》等。 核对标本 与植物标本室中收藏的已经定名的植物标本核对, 以正确鉴定学名。 第三节 性状鉴定?性状鉴定 (macroscopical identification) 是依据对照生药的性状特征对生药(检品)进行真实性鉴别的方法。?通过人体的感官看、摸、闻、尝及水试、火试等直观的方法,依据生药的性状,包括形状、大小、色泽、表面、质地、断面、气味等特征而进行鉴别。 ?又称传统经验鉴别。?该法简单、快速、易行,是保证质量行之有效的重要鉴定方法之一,必要时可配合 其它鉴定方法加以确证。?性状鉴定适于完整的生药及饮片的鉴别 ?&看&,就是仔细观察生药的形状、大小、色 泽、表面特征及断面等,并以一些简单的术 语来形容,例如观察根类外形时,常用头 (根、根茎的上端)、芦(根端短缩的根 茎)、身(主根部分)、梢(根下部或支 根)、须(须根或小根)、纹、皱、槽、沟、 连珠(根、根茎膨大部分成连珠状)等描述。 观察断面特征或饮片时,常用心(中心部)、 菊花纹、车轮纹、云纹、网纹、朱砂点、粉 尘、霜等词形容。 ?“摸”,就是用手触摸生药,以判断生药的 质地及折断现象,通常用硬软、结松、轻重、 韧脆、弹柔以及粉质、角质、油润、绵性、 柴性、粘性等词来形容。 “嗅”是直接嗅闻完整的生药,或于剥碎、 搓揉、折断时所能闻到的气味。 &尝&是用舌尖接触生药表面,或取少量生 药入口咀嚼能感觉到的味感(剧毒药尝味要 小心,尝后立即吐出并漱口)。?? 传统经验鉴别?党参皮松肉紧有狮子盘头,何首乌断面有 云锦纹,粉防已断面有车轮纹,苍术断面 有朱砂点。又如丹皮以皮细肉厚,亮星 (丹皮酚结晶)多者为佳,甘草、党参以 味甜为佳,乌梅、木瓜、山楂以味酸为佳, 黄连、黄柏以色黄、味苦(含小檗碱)为 佳,肉桂以富油性、香气浓、味甜辣为佳, 荜菝、黑胡椒以味辛辣为佳等。 一、性状鉴定的内容1. 形状 (shape)?形状是指干燥药材的形态。观察时一般不需要预处理,但如观察皱缩的全草、叶或花类生药时,可先浸湿使软,展平。观察某些果实种子类生药时,如有必要可浸软后,取下果皮或种皮,以观察内部特征。生药的形状特征,与药用部位有关。 ?如根类生药有圆柱形、圆锥形、纺锤形等; 根茎类生药中根状茎的形状与根类同,块 茎常呈长圆形或不规则形,球茎和鳞茎常 呈球形、类球形或扁球形;皮类生药有卷 筒状、板片状等;种子类生药有圆球形、 扁球形等。?如防风的根茎部分称 “ 蚯蚓头 ” ;海马 的外形为 “ 马头蛇尾瓦楞身 ” 2. 大小 (size)?大小系指药材的长短、粗细(直径)和厚薄。一般应测量较多的供试品。测量时可 用毫米刻度尺。对细小的种子类生药,如 葶苈子、车前子、菟丝子等,可放在有毫 米方格线的纸上,每 10 个种子紧密排列成 一行,测量后求其平均值。 3. 色泽 (coluor)??包括表面和断面的色泽。生药的色泽变化与生药质量有关。如玄参 要黑、丹参要紫、茜草要红、黄连要黄。?加工、贮藏不当,会改变生药的固有色泽, 甚至引起内在质量的变化。 4. 表面特征 (surface character)?指药材的表面所能看到的特征,如光滑、粗糙、皱纹、皮孔或毛茸及其它附属物等, 皮类生药的表面特征包括外表面和内表面, 叶类生药包括上表面和下表面。 5. 质地 (texture)?指折试药材所感知的特征,一般用软硬、坚韧、疏松、致密、粘性或粉性、轻重、油润、绵性、角质、柴性等术语形容。?需用未经处理的干燥药材,并注意药用部位或加工方法不同的药材质地。如盐附子易吸潮变软,黑顺片则质硬而脆;含淀粉多的生药,经蒸煮加工干燥后,会因淀粉糊化而质地坚实。 ?形容生药质地的术语很多,如质轻而松、断面多裂隙,谓之 “ 松泡 ” ,如南沙参;?生药富含淀粉,折断时有粉尘散落,谓之“ 粉性 ” ,如山药;?质地柔软,含油而润泽,谓之 “ 油润 ” ,如当归;?质地坚硬,断面半透明状或有光泽,谓之“ 角质 ” ,如郁金等。 6. 断面 (fracture)?包括自然折断面和用刀横切(或削)的平 面。?折断面主要观察和描述折断时的现象,如 易折断或不易折断,有无粉尘散落、响声 等;折断时的断面特征,如平坦、纤维性、 刺状、颗粒性、裂片状、胶丝状,是否可 以层层剥离等。 ?如茅苍术易折断,断面放置能 “ 起霜 ”(析出白毛状结晶),白术不易折断,断面放置不“起霜 ” ;甘草折断时有粉尘散落(淀粉);杜仲折断时有胶丝相连;裂片状分层;厚朴折断面可见亮星。黄柏折断面,呈纤维性;苦楝皮的折断面, ?横切(削)面,观察皮部与木部的比例、维管束排列方式、射线的分布、油点的多少等。?常用的术语有 “ 菊花心 ” ,如黄芪等;“ 车轮纹 ” ,如粉防己等; “ 朱砂点 ” ,如茅苍术等; “ 星点 ” ,如大黄等; “ 云锦纹 ” ,如何首乌等; “ 罗盘纹 ” ,如商陆等。 7. 气 (odour)?指药材具有的特殊气,一般直接嗅闻干燥 的药材,也可在折断、破碎或揉搓时进行, 必要时可用热水湿润后检查。 药材的气是由于生药中含有挥发性物质的 缘故,可作为鉴别该生药主要依据之一, 如檀香具有其固有的特异芳香气,阿魏具 强烈的蒜样臭气,白鲜皮有似羊膻气等。? 8. 味 (taste)?味是用味觉来识别药材,又称尝法。有毒的 药材如需尝味时,应注意防止中毒。 口尝时要取少量代表性的生药在口里咀嚼约 1 分钟,使舌头的各部分都接触到药液。??生药的味感与生药所含成分及含量密切相关, 也是衡量生药品质的标准之一,如乌梅、木 瓜、山楂均以味酸为好;黄连、黄柏以味越 苦越好;甘草、党参以味甜为好等 9. 水试 (water-based test)?水试法是利用生药在水中或遇水发生沉浮、溶 解、颜色变化、透明度、膨胀性、旋转性、粘 性、酸碱变化等特殊现象鉴别生药。与生药中 所含有的化学成分或组织构造有关。 如西红花加水浸泡后,水液染成金黄色,其花 色不褪;秦皮水浸,浸出液在日光下显碧蓝色 荧光;葶苈子、车前子等加水浸泡,则种子变 粘滑,且体积膨胀;熊胆粉末投入清水中,即 在水面旋转并呈黄色线状下沉而不扩散。? 10. 火试 (fire-based test)?火试指用火烧、煅药材,有些生药用火烧, 能产生特殊的气味、颜色、烟雾、闪光和 响声等现象,作为鉴别手段之一。?如降香微有香气,点燃则香气浓烈,有油 流出,烧后留有白灰;麝香少许用火烧时 有轻微爆鸣声,起油点,似烧毛发但无臭 气,灰为白色;海金沙易点燃而产生爆鸣 声及闪光,而松花粉及蒲黄无此现象。 二、各类药材的性状鉴别要点1. 根类 (roots)? ?根或以根为主带有部分根茎的生药。 根上通常没有节和节间,一般无芽?双子叶植物根类生药一般呈圆柱形或圆锥 形,平直或稍弯曲、扭转、有的分枝,上 端常连接短缩的根茎 ( “ 芦头 ”) ;表面 常较粗糙,多数有木栓、皮孔及支根痕; 横断面呈放射状结构,形成层环大多明显, 中心常无髓,少数生药有异型构造。 ?单子叶植物根类生药多为须根或须根膨大 成块状根,块状根的形状比较多样,如麦 冬、天冬呈纺锤形,表面常较光滑,无木 栓及皮孔,断面不呈放射状,内皮层环较 明显,中心有髓。 2. 根茎类 (rhizomes)?根茎类生药是以植物的地下茎入药,包括 根状茎 ( 常称根茎 ) 、块茎、鳞茎或球茎。 根茎类生药表面有节和节间,以单子叶植 物的根茎为明显,节上常见有退化的鳞片 状叶,有时可见叶痕和芽痕,周围或下侧 有不定根或根痕。蕨类植物根茎的表面常 有鳞片或鳞毛,有的周围密布整齐的叶柄 基。? ?根茎类生药的横断面,双子叶植物根茎呈 放射状结构,中心有明显的髓;单子叶植 物的根茎不呈放射状,内皮层环大多明显, 环圈内外均散有维管束小点;蕨类植物根 茎有的中心为木部,无髓,有的木部呈完整的环圈,中心有髓,有的为数个分体中柱断续排列成圈状。 ? ?3. 茎类 (stems)以植物地上茎或茎的一部分入药,包括木本植物的枝条、木质藤本的茎、草本植物的茎或茎髓等。?一般茎类生药呈圆柱形,也有呈方柱形或扁圆柱形,大多有明显的节和节间,有的节部膨大并残存小枝痕、叶痕或芽痕,若叶痕显著可供观察叶序。 ?草质茎干缩后因维管束或机械组织的存在,常形成纵向隆起的棱线及凹沟;木质茎表面较粗糙,木栓层时有纵横裂纹,皮孔易察见。?双子叶植物茎的横断面呈放射状结构,草质茎木部不发达,髓疏松或成空洞,木质茎木部发达,皮部薄;单子叶植物茎不呈放射状结构,维管束散列,无明显的髓。 ??4. 木类 (woods)木类生药系采自树木形成层以内的部分,通常以心材入药。?一般将木材锯截成段,或劈成条块或刨成 薄片。 观察其形状、色泽、表面纹理与斑块、质 地、气味,以及横切面、纵切面所呈现的 年轮、射线等纹理。? ? ? ??5. 皮类 (barks) 树干、枝条或根的形成层以外部分,分为树 皮 ( 干皮 ) 、枝皮及根皮 皮类生药可呈板片状、卷片状、槽状、筒状 或双筒状,外表面较粗糙,有纵横裂纹,并 有不同形状、大小的皮孔,内表面一般平滑, 颜色较深,常可见纵向细纹理 ( 纤维束 ) 或 网状皱纹。 有的易折断,有的不易折断,折断面有的平 坦或呈颗粒状 ( 示有石细胞群 ) ,有的呈纤 维状或裂片状,也有折断时有胶质丝状物相 连或有粉尘。 ? ????6. 叶类 (leaves or leaflets) 多以单叶入药,也有复叶或带叶的枝梢。 将皱缩的叶片湿润展平,判断是单叶或是 复叶。再观察叶片的形状、大小、色泽、 叶端、叶基、叶缘、叶脉、上下表面,质 地以及叶柄的有无或长短。 叶面的表面特征多样,有的具较厚的角质 层,光滑无毛;有的一面或两面被毛;有 的放大镜下可见腺鳞;有的叶片对光透视 可见透明腺点 ( 油室 )。 叶柄的平直或扭曲也有鉴别意义。 ? ?7. 花类 (flowers or inflorescences) 包括花蕾或已开放的花;或花的某一部分如 花瓣、花冠、柱头、花粉;或完整的花序。 大多有鲜明的颜色和香气,故较易鉴别。 观察内容包括花的状态、全形、大小、花各 部分的形状、色泽、数目、排列、有无毛茸 以及气味等,必要时湿润后解剖镜下观察。 若以花序入药的,注意花序的类型及苞片或 总苞形状。? ? ??8. 果实类 (fruits)包括完整的果实;果实的一部分如果皮、果 核、果皮维管束;整个果穗及果柄、宿萼等。 首先观察果实的类型、形状、大小、颜色、 顶部、基部、表面和切断面特征,以及有无 残存苞片、花萼、雄蕊、柱基及果柄。 表面有的具光泽或被粉霜,有的有隆起的棱 线,有的有凹下的油点,有的着生毛茸。 对完整的果实,注意所含种子的数目、形状、 大小、色泽及表面特征。??? ??9. 种子 (seeds)大多用完整的种子,少数用种皮、种仁, 或以附属物假种皮入药。?首先观察种子的形状、大小、颜色及表面 特征,如种脐、种脊、合点、珠孔位置和形状,各种纹理、突起、毛茸、种阜的有无以及纵横剖面等。剥去种皮后,注意有无胚乳。 ? ?10. 全草 (herbs) 以草本植物的全株入药,也有将草本植物 的地上部分或带叶的花枝、果枝归入全草 类的,其中少数为灌木的草质茎。 全草类生药的叶大多干缩或破碎,可湿润 后摊平观察。若花、果实完整,可依植物 鉴定的方法进行观察;若残缺,可根据各?部分形态,参照有关类别进行观察。 ? ?11. 动物类 (animals) 以动物全体或其器官或代谢产物、分泌物 入药,?动物基源可以通过文献核对、标本核对来进行形态观察,如肌肉、骨、皮肤、毛、角等各部分。 ?12.矿物类 (minerals)?主要观察其结晶形状、结晶习性、透明度、颜色、光泽、硬度、脆性、延展性、弹性、 磁性、比重、解理、断口、气味等?需靠理化试验等方法鉴别 ?药材饮片的鉴别?饮片改变了形状、大小、颜色,甚至气味,机器切片也改变了原手工饮片(如圆片、 斜片、平片、节片等)的规则性,应结合 完整药材的特征,特别是横切面、表面和 气味的特征来对比识别。 第四节 显微鉴定?显微鉴定 (microscopical identification)是指利用显微镜,依据对照生药的组织、细胞或内含物的特征,对生药(检品)进行真实性鉴别的方法。 ?显微鉴定通常适用于性状鉴定不易识别的生药、性状相似的多来源生药、破碎生药、粉末生药以及用粉末生药制成的中药成方制剂。 一、对照生药的显微特征?对照生药的显微特征,是依据对照生药经显微观察而获得的生药显微特征,经生药学研究者制订并记录于国家药品标准、各种书籍和文献中,是药材显微鉴定的依据。?显微鉴定一般依据对照生药的显微特征。 二、显微鉴定的内容(一)组织鉴定( histological identification)?是通过观察植物器官的切片,以生药的组织构造、 细胞形状和内含物形态等特征来鉴定生药。?适于类似品、混淆品、代用品、伪品或同属多来源药材的对比鉴别。 ?用于完整药材或能够满足制作切片条件的饮片的鉴定。?一般来说,组织鉴定对不同科属来源的药材鉴别比较容易,对于相同科属来源 的药材鉴别相对较困难。 (二)粉末鉴定 (powder identification)?通过生药的粉末制片,观察生药的细胞、内含物形态特征来鉴定生药的真伪。?用于粉末药材、外形较大或组织构造无 鉴别特征的药材、破碎药材以及粉末性 的中成药的鉴别。 (三)显微化学反应( micro-chemcalreaction)?是将生药的干粉、手切片或浸出液少量,置于载玻片上,滴加某些化学试剂使产生沉淀或结晶,或产生特殊的颜色,在显微 镜下观察反应结果,从而进行鉴定。?主要用于细胞壁、糖类、蛋白质、草酸盐、 碳酸盐和各类化学成分的鉴别。 1 .细胞壁性质的鉴定?木质化细胞壁加间苯三酚试液 1~2 滴, 稍放置,加盐酸 l 滴,因木化程度不同, 显红色或紫红色。 木栓化或角质化细胞壁遇苏丹 Ⅲ 试液, 稍放置或微热,呈橘红色至红色。 纤维素细胞壁遇氯化锌碘试液,或先加 碘试液湿润后,再加硫酸溶液显蓝色或 紫色。?? 2. 细胞内含物性质的鉴定? ?淀粉粒遇碘试液显蓝色或蓝紫色。糊粉粒,加碘试液,显棕色或黄棕色;加硝 酸汞试液显砖红色。?脂肪油、挥发油或树脂,加苏丹 Ⅲ 试液呈橘 红色、红色或紫红色;加 90 %乙醇,脂肪油 一般不溶解,挥发油则溶解。 ?菊糖加 10 % α- 萘酚的乙醇溶液,再加硫酸,显紫红色并很快溶解。? ?粘液细胞遇钌红试液显红色。 草酸钙结晶在装片时加入硫酸溶液逐渐 溶解,并析出针状硫酸钙结晶。?碳酸钙结晶(钟乳体)加入稀盐酸溶解,同时有气泡产生。 3. 细胞内化学成分的鉴定?选择合适的化学试剂,如肉桂粉末加氯仿 2~3 滴,略浸渍,速加 2% 盐酸苯肼 1 滴, 可见黄色针状或杆状结晶(示桂皮醛反 应); 槟榔粉末酸性水浸液滴于玻片上,加碘化 铋钾试液,即发生浑浊,放置后可见石榴 红色球形或方形结晶(示槟榔碱反应)。? ?利用显微化学定位试验,确定生药有效成分在生药组织构造中的部位,如北柴胡横切片加 1 滴无水乙醇 - 浓硫酸 (1:1)液,在显微镜下观察可见木栓层、栓内层和皮层显黄绿色 ~ 蓝绿色,示北柴胡 的有效成分柴胡皂甙存在于这些部位。 4. 微量升华?生药中某些化学成分,在一定温度下升华, 在显微镜下观察其结晶形状、颜色及化学 反应作为鉴别特征。?大黄粉末升华物有黄色针状(低温)、枝 状和羽状(高温)结晶,在结晶上加碱液 呈红色,进一步确证其为蒽醌类成分。薄荷的升华物为无色针簇状结晶(薄荷 脑),加浓硫酸 2 D及香草醛结晶少许, 显黄至橙黄色,再加DW 1D变紫红色。? 三、显微鉴定的方法(一)制片 ? 包括组织制片、表皮制片和粉末制片 。 ? 组织制片的方法主要有徒手制片、滑走制 片、冰冻制片及石蜡制片等。对植物类中 药,如根、根茎、茎藤、皮、叶等类,一 般制作横切片观察,必要时制纵切片;果 实、种子类须制作横切片及纵切片观察; 木类药材须制作横切片、径向纵切片及切 向纵切片三个面观察。 ?表皮制片系将表皮细胞组织制成显微观察片的一种方法?适用于观察叶片、花瓣、花萼和其它器官表皮的细胞形状、气孔、腺毛、非腺毛的类型和角质层的纹理以及各种细胞内含物 等的显微特征。 ?粉末制片用于观察药材的组织、细胞及 细胞后含物特征,制片时根据观察目的 物的不同选用斯氏液或水合氯醛制片。?有时为了观察某些细胞组织如纤维、石细胞、导管等,可制解离组织片。 (二)显微观察与结果记录? ?1. 组织特征的观察与描述 组织特征特别是横切面组织特征的观察与描述,一般是由外向内依次进行。?在观察与描述中,首先注意其各部分的位置、形态、有无其它组织分布等特征。其次应注意各种细胞及其内含物的颜色、形状、大小。 ? ?2. 粉末特征的观察与描述 粉末制片在显微镜下观察时,可见到多种 组织碎片、细胞及内含物的特征。?描述方法同上,在描述顺序上,一般可以按照 “ 先多后少 ” 或 “ 先特殊后一般 ” 的原则进行。 ? ?3. 显微测量 指在显微镜下用目镜测微尺测量细胞和后 含物的大小。先将目镜测微尺用载台测微 尺标化,计算出每一小格的 μm 数,应用 时将测得目的物的小格数,乘以每一小格 的 μm 数,即得所欲测定物的大小。 测量微细物体时宜在高倍镜下进行,而测 量较大物体时可在低倍镜下进行。? ? ? ???4. 结果记录 除用文字来描述之外,均需附图说明。 附图可用显微绘图法绘制,也可用显微摄 影技术摄制。 显微摄影是利用显微照相设备将显微镜下 观察的影像摄录下来的一项技术。 目前计算机图像采集软件较多,一般 多 具 有静态图 像 、动态图 像 及连续图像采集 功能, 数码显微摄影图像清晰逼真,操作 方便快捷, 便于存储与编辑,且还具图像 编辑、显微测量功能。 偏光显微镜的应用?偏光显微镜(polarizing microscope):利用自然光在通过各向异性透明体时,产生偏振光的原理。?样品为各向异性的物质时,呈现不同色彩,样品各向同性时,呈现暗视野?常用于淀粉和晶体物质的观察,亦用于具有各向异性的中药粉末的观察。 扫描电子显微镜?分辨率高??图像呈现表面立体结构同科属种间的表面结构鉴别 四、各类药材的显微观察要点(一)根类药材?1. 组织构造?(1)双子叶植物根类 多数为次生构造,表层为木栓组织;皮层狭窄;韧皮部较发达或较狭窄;形成层环多明显;木质部由导管、管胞、木纤维、木薄壁细胞及木射线组成;中央大多无髓,少数有明显的髓部。 ?少数双子叶植物根类药材为初生构造,皮层宽,中柱小,木质部束及韧皮部束 数目少,相间排列,初生木质部呈星芒 状,一般无髓。 ?有些双子叶植物根有异常三生构造,例 如何首乌根的形成层环外方有数个异常复合维管束。 ?(2)单子叶植物根类 单子叶植物根类药材 一般无木栓组织,其表皮细胞外壁有时增 厚,也有表皮发育成数列根被细胞,壁木 栓化或木化;皮层宽广,占根的大部分; 内皮层凯氏点 ( 带 ) 通常明显;中柱小;木 质部束及韧皮部束数目多,相间排列成一 圈;中央髓部大多为薄壁细胞或细胞壁木 化增厚。 ? ?粉末特征 除叶肉组织外,其 它细胞、组织碎片 都可能存在。 根的木栓组织多见, 应注意木栓细胞表 面观的形状、颜色、 壁的厚度。? ?导管一般较粗,应 注意其类型、直径、 导管分子的长度及末 端 壁 的 穿孔 、 纹孔的形状及排列等。 ?石细胞应注意形状、大小、细胞壁增厚 形态和程度、纹孔形状及大小、孔沟密 度等特征。1.巴戟天 2.川乌3.党参 ?分泌组织观察时应 注意分泌细胞、分泌腔(室)、分泌管(道)及乳汁管的类型 、分泌细胞的形状、分泌物的颜色、周围细胞的排列及形态等特征。 ?结晶大多为草酸钙结晶,其次还有菊糖、 硅质晶体等,应注意结晶的类型、大小、 排列及含晶细胞的形态等。 ?注意淀粉粒的多少、形状、类型、大小、 脐点形状及位置、层纹等特征。 (二)根茎类药材? ?1. 组织构造 蕨类植物根茎的最外层,多为厚壁性的表 皮及下皮细胞,基本薄壁组织较发达。中 柱的类型,有的是原生中柱,木质部 ( 只 有管胞 ) 位于中心,韧皮部位于四周,外 有中柱鞘及内皮层;有的为网状中柱,在 横切面可见数个分体中柱断续排列成环状,每一分体中柱为一原生中柱状。 ?双子叶植物根茎大多有木栓组织;皮层中有时可见根迹维管束;中柱维管束无 限外韧型,环列;中心有髓。少数种类 有三生构造。 ?单子叶植物根茎的最外层多为表皮,皮层 中有叶迹维管束,内皮层大多明显,中柱 中散有多数有限外韧型维管束或周木型维 管束。较粗的根茎、块茎等的内皮层不明 显。鳞茎的鳞叶表皮可见气孔。 有的根茎类药材有油室或油细胞;有的含 草酸钙针晶束,针晶束大多存在于粘液细 胞中。此外,对厚壁组织、导管以及草酸 钙结晶的类型等均应注意。? ? ?2. 粉末特征与根类相似。注意鳞茎、块茎、球茎常含多量较大的淀粉粒,其形状、大小、脐点、层纹以及复粒、半复粒、多脐点单粒等特征是鉴别的重要依据。鳞茎的鳞叶表皮常可察见气孔。?单子叶植物根茎较易见到环纹导管。?蕨类植物根茎只有管胞。 (三)茎藤类药材? ?1. 组织构造 双子叶植物草质茎大多有表皮,应注意细 胞形状、外壁增厚、气孔及有无毛茸等; 皮层为初生皮层,其外侧常分化为厚角组 束中形成层明显;次生韧皮部大多成束状 或板状;髓较大。织;中柱鞘常分化为纤维或夹杂有石细胞; ?木质茎最外为木栓组织;皮层多为次生皮层; 中柱鞘厚壁组织多连续成环或断续;形成层 环明显;次生韧皮部及次生木质部呈筒状结构;射线较窄,细胞壁常木化;髓较小。?木质藤本茎的木栓层较厚,有的有落皮层;维管组织被射线分隔成明显的放射状纹,导管孔较大,有髓周厚壁细胞等 ?单子叶植物茎最外层为表皮,表皮下如有下皮厚壁细胞常为鉴别特征,其内基本组织中散生多数有限外韧维管束,中央无髓。?裸子植物茎的木质部主为管胞,通常无导管,但麻黄茎的构造与双子叶植物草质茎类同。 ?2. 粉末特征 除无叶肉组织外,其它组织一般都可能存 在。? (四)皮类药材 ? 1. 组织构造 ? 包括木栓组织、皮层及韧皮部 ? 木栓组织应注意木栓细胞的层数、颜色、 细胞壁的增厚程度等。 ? 皮层一般较狭窄,通常由栓内层形成的次 生皮层。 ? 韧皮部占皮的绝大部分,韧皮部及皮层往 往有厚壁组织(纤维或石细胞)存在;有 的皮类药材的韧皮部中,纤维或石细胞切 向集结成若干层带 ( 硬韧部 ) ,与筛管群、 薄壁组织 ( 软韧部 ) 相间排列。 ?皮类药材常有树脂道、油细胞、乳汁管等 分泌组织以及草酸钙结晶。 多数皮类药材含淀粉粒,但较微小。? ??2. 粉末特征主要有木栓细胞、纤维、石细胞、分泌组织及草酸钙结晶等。?不应有木质部的组织,如导管、管胞等。 (五)木类药材 ? 1. 组织构造 ? 横切面主要观察木射线宽度(细胞列数)、密度,导 管与木薄壁细胞的比例及分布型式,导管和木纤 维的形状、直径等; ? 切向纵切面主要观察木射线的宽度、高度及类型, 木射线在切向纵切面呈梭形,其宽度是指最宽处 的细胞数,高度是指从上至下的细胞数,同时观 察导管、木纤维等; ? 径向纵切面:木射线的高度及细胞类型,木射线 在径向纵切面呈横带状,与轴向的导管、木纤维、 木薄壁细胞相垂直,同时观察导管的类型,导管 分子的长短、直径及有无侵填体,木纤维的类型 及大小、壁厚度、纹孔等。 ? ?2. 粉末特征以导管、木纤维、木薄壁细胞、木射线细胞的形态特征,以及细胞后含物为主要鉴别点。 ? ? ?(六)叶类药材1. 组织构造通常作横切片观察表皮、叶肉及叶脉的组 织构造,要注意上、下表皮细胞的形状、 大小、外壁、气孔、角质层厚度,以及有 无内含物,特别是毛茸的类型及其特征。 ? ?2. 叶的表面制片主要观察表皮细胞、气孔及各种毛茸的全形,以及叶肉组织的某些鉴别点,如草酸钙结晶类型及其分布等。?毛茸为叶类药材的重要鉴别特征,应注意观察非腺毛、腺毛的细胞形状、细胞壁的厚度及其表面特征 ?另外,观察叶的表面制片,可用以测定栅表细胞比、气孔数、气孔指数及脉岛数,对鉴别亲缘相近的同属植物的叶,有一定参考意义。? ?3. 粉末特征 粉末中还可见到叶片的横断面及晶体。与叶的表面制片基本一致,但毛茸多碎断, (七)花类药材? ?1. 花类药材的显微鉴定 根据不同的目的物,将苞片、花萼、花冠、雄蕊或雌蕊等分别作表面制片,或将完整的花作表面制片观察。? ?苞片、花萼的构造,与叶相似。 花粉粒为花类药材的重要特征,应注意其形状、大小、萌发孔状况、外壁雕纹等。 ? ???(八)果实类药材 组织构造 一般观察果皮的组织特征。由子房壁分化 和增大形成的真果的果皮,可分为外果皮、 中果皮及内果皮,内、外果皮相当于叶的 上、下表皮,中果皮相当于叶肉。 外果皮为 1 列表皮细胞,观察注意点同叶。 中果皮为多列薄壁细胞,有细小维管束散 布;中果皮中常有分泌组织及厚壁组织分 布。内果皮的变异较大,有的为 1 列薄壁 细胞,有的散在石细胞或结晶细胞层等。 ? ?2. 粉末特征 外果皮:细胞形状、垂周壁的增厚状况、角质层纹理以及非腺毛、腺毛的有无及其特征;??中果皮:分泌组织、厚壁组织及结晶的特征;内果皮:细胞的形态与类型。含有种子的果 实类药材,注意种皮、胚乳组织等特征。 (九) 种子类药材?1. 组织构造?着重观察种皮的构造。有的种皮只有 1 列 细胞,较多的种皮由数种不同的细胞组织 构成。?种子的外胚乳、内胚乳或子叶细胞的形状、 细胞壁增厚状况,以及所含脂肪油、糊粉 粒或淀粉粒等,也有鉴别意义。 ? ? ?2. 粉末特征 种皮的表面观及断面观形态特征。 种皮支持细胞、油细胞、色素细胞的有 无和形态; 有无毛茸、草酸钙结晶、淀粉粒、分泌 组织碎片等。? (十)全草类药材?大多为草本植物的地上部分,少数为带根的全株。?全草类包括了草本植物药的各个部位,其 显微鉴定可参照以上各类药材的鉴别特征。 (十一)菌类药材?大多以子实体或菌核的形式入药,无淀粉粒和高等植物的显微特征。?观察时应注意菌丝的形状、有无分枝、颜色、大小;团块、孢子的形态;结晶的有无及形态、大小与类型。 (十二)动物类药材?动物全体应注意皮肤碎片细胞的形状与色 素颗粒的颜色,肌纤维的形态,刚毛的形态、大小及颜色,体壁碎片颜色、表面纹理及菌丝体,骨碎片,骨陷窝的形态等。带有鳞片的动物体还应注意鳞片角质增厚特征。 ?分泌物和病理产物应注意团块的颜色及其包埋物的性质特征,表皮脱落组织,毛茸及其它细胞的形状、大小、颜色等特征。?角甲类药材应注意碎块的形状、颜色、横断面和纵断面观的形态特征及色素颗粒颜 色等 。 (十三)矿物类药材?? ? ? ?一般无植(动)物显微特征晶体的大小、直径或长径 晶型的棱角、锐角或钝角 色泽、透明度、表面纹理及方向、光洁度 偏光显微镜下的特征 (十四)中成药显微鉴别要点? ?了解组方生药、剂型和制法 根据处方明确专属特征 第五节 理化鉴定?生药的理化鉴定(physical and chemical 对生药中所含主要化学成分或有效成分进行定性定量分析。identification)是利用物理的或化学的方法,?常用的鉴定方法有物理常数法、化学反应法、光谱法和色谱法。 一、物理常数?物理常数包括相对密度、旋光度、折光 率、凝点和熔点等; 二、一般理化鉴别??呈色反应沉淀反应?? ? ?泡沫反应和溶血指数的测定微量升华 显微化学反应 荧光分析 三、色谱法?由于现代色谱分析技术具有分离和分析两种功能,即能排除复杂组分间的相互干扰,逐个将组分进行定性和定量分析,因此,现代色谱分析技术非常适合成分复杂的生药的有效性评价。 ?薄层色谱法(thin layer chromatography, TLC)?TLC用于鉴别、检查或含量测定。?《中国药典》 (2005 版 ) 一部TLC用于定性鉴别的达 1523 项,用于含量测定的为 45 项,其中有 4 种药材采用薄层扫描法定量。 ? ?气相色谱法(gas chromatography, GC) 采用气体为流动相 流经装有填充剂的色谱 柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍 生物气化后,被载气带入色谱柱进行分离, 各组分先后进入检测器,用记录仪、积分 仪或数据处理系统记录色谱信号。 《中国药典》 (2005 版 ) 气相色谱法用于 中药分析的品种有 47 种,其中有 4 种药 材用此法定量。另外还有两种药材的农药 残留也是用 GC 法分析? ?高效液相色谱法 (high performance liquidchromatography, HPLC)?HPLC-UV,无UV吸收的皂苷类HPLC-ELSD分析方法?《中国药典》 (2005 版)一部应用高效液 相色谱法测定含量的中药品种达 479 种, 涉及 518 项,其中药材就有 98 种 。 四、分光光度法?通过测定被测物质在特定波长处或一定波 长范围内的光吸收度,对该物质进行定性 和定量分析的方法。 朗伯 - 比尔定律: A = ECL?式中 A 为吸收度 ; E 为吸收系数,即单位浓 度、单位液层厚度的吸收度数值; C 为溶 液浓度; L 为液层厚度。 ? ? ?紫外分光光度法 可见分光光度法 红外光谱法 专属性强;标准品或标准图谱对照;样品纯净?原子吸收分光光度法 五、其它方法(一)NMR(1H,13C, DEPT, 1H-1H COSY,HMQC, HMBC, NOESY, ROESY) (二) MS(EIMS, FABMS, ESIMS, FDMS, CIMS) (三)指纹图谱 第六节 DNA分子遗传标记鉴定?以形态学为主的生药鉴定方法,还不能解决所有生药的真实性鉴定问题,特别是对同属多来源生药及种内的一些变异 ( 道地药材 ) 、动物药等难以专属性地鉴定。?学科发展的需要以及分子生物学技术的飞速发展使 DNA 分子遗传标记鉴别生药应运而生。 ?生药 DNA 分子遗传标记鉴定:是指通过 比较生药间 DNA 分子遗传多样性差异来 鉴别生药基源,确定其学名的方法。?在细胞分裂的过程中遗传物质由亲代遗传 给子代。 遗传物质存在于细胞核中,细胞核中的染 色体是遗传基因的载体,在由 DNA 、 RNA 和蛋白质组成的染色体中, DNA 是 绝大多数生物 的遗传物质。? ?DNA 分子标记技术大致可分为三类:?一是以电泳技术和分子杂交技术为核心的RFLP 等技术;?二是以电泳技术和 PCR 技术为核心的RAPD 、 AP-PCR 等 DNA 分子指纹技术和 DNA 测序技术等;?三是前两类技术结合的 AFLP 、 RFLP-PCR 、 RAPD-PCR 和基因芯片等。 1. 限制性内切酶酶切片段长度多态性 ( RFLP,restriction fragment length polymorphism )?生物在进化过程中,由于种种原因引起的 基因突变和 DNA 分子结构重排,造成了 分子内核苷酸排列顺序的改变,在一处或 几处发生某种差异,当这种改变(即使是 很小的改变)涉及到限制性酶切位点时, 酶切后产生的 DNA 片段长度将发生变化, 即限制性酶谱的条带方式将出现不同,产 生多态性,称为限制性片段长度多态。 ??一般应用 Southern 杂交检测这种多态性, 将琼脂糖凝胶中的 DNA 转移到硝酸纤维素 膜(或其它膜)上,然后再用标记的克隆 基因作探针进行杂交,经放射自显影后即 可在 X 光片上看到 DNA 多态性了。 该方法试验步骤繁琐,包括 Southern 转移、 探针标记、杂交、检测等,又受到探针来 源的限制,所需 DNA 样品量大(因没有对 DNA 进行扩增),仅适于 DNA 未明显降 解的新鲜材料。 2. 聚合酶链式反应 (polymerase chain reaction , PCR)?是 80 年代中期发展起来的体外核酸扩增技术,以待扩增的两条 DNA 链为模板,由一对人工合成的寡核苷酸作为介导,通过DNA 聚合酶促反应,在体外进行特异 DNA序列扩增。 ? ?1. PCR 技术的基本原理PCR 由变性 - 退火 - 延伸三个基本反应构成, 重复循环变性 - 退火 - 延伸三过程,就可获 得更多的“半保留复制链”,而且这种新 链又可成为下次循环的模板。每完成一个 循环需 2-4min,2-3h就能将待扩目的基因 扩增放大几百万倍。 2. 参加 PCR 反应的物质 主要有五种即引物、酶、 dNTP 、模板和 Mg 2+ 。? ? 3. 随机扩增多态性 DNA( RAPD)和任 意引物 PCR(AP-PCR)?RAPD(random amplified polymorphic DNA)是 1990 年美国杜邦公司科学家 J. G. K. Williams 和加利福尼亚生物研究所 J. Welsh 领导的两个小组几乎同时发展起来 的 一 项 新 技 术 。 Williams 称 之 为 RAPD ( random amplified polymorphic DNA ), Welsh 称之为AP-PCR(arbitrary primer PCR )。 ?RAPD 技术建立在 PCR 技术基础上,它是 以任意序列的寡核苷酸单链为引物,对所研 究的基因组 DNA 进行随机扩增。在不同物 种基因组 DNA 中,这种反相重复序列的数 目和间隔的长短不同,就可导致这些特定的 结合位点分布发生相应的变化,而使 PCR 扩增产物增加、减少或发生分子量的变化。 通过对 PCR 产物的检测和比较,即可识别这些物种基因组 DNA 的多态片段。 ?RAPD 主要有以下特点: ① 无需专门设计 RAPD 扩增反应的引物,也无需预知被研 究的生物基因组核苷酸顺序,引物是随机合成或是任意选定的。② 每个 RAPD 反应中,仅加单个引物,通过引物和模板 DNA链随机配对实现扩增,扩增没有特异性。③ 退火温度较低,一般为 36℃ 。 ④ 较之常规 PCR , RAPD 反应易于程序化。 4. PCR 扩增的特定片段的限制性位点 分析( PCR-RFLP )?PCR-RFLP 是在 PCR 和 DNA 序列分析基础上产生的 RFLP 技术。该方法是通过PCR 扩增一段 DNA 片段,然后再选择适当的限制性内切酶,消化 PCR 产物,经电泳,可得到有种属特异性的电泳谱带,从而达到品种鉴定的目的。例如该方法在贝母类、人参类和术类药材鉴定中应用。 5. DNA 测序法 (DNA Sequencing)?DNA 直接测序技术是以 PCR 扩增引物作为测序引物,采用循环测序法对 PCR 扩增 的双链 DNA 进行直接测序。?生药的 DNA 测序鉴定就是运用 DNA 测序 技术建立正品药材及相关混伪品的原动植 物的基因序列数据库,用同样的方法对待 检测样品进行测序,对照数据库即可鉴定 出中药材的真伪

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