甲亢型阴虚模型小鼠焦虑行为的观察--《中药药理与临床》2008年05期
甲亢型阴虚模型小鼠焦虑行为的观察
【摘要】：目的:观察甲亢阴虚模型小鼠焦虑行为状态,探讨作为阴虚焦虑模型的可行性。方法:雄性昆明种小鼠用320mg/kg甲状腺片混悬液连续灌胃9天造成阴虚模型,以高架十字迷宫和明暗箱实验观察阴虚模型小鼠焦虑行为状态,并测定GABA和Glu的含量及GABAAR1和NMDAR1的表达。结果:与对照组比较,阴虚模型组小鼠在高架十字迷宫实验中进入开臂的时间比和次数比显著降低,在明暗箱实验中穿箱次数显著减少,脑内GABA含量显著降低,Glu含量显著增加脑内GABAAR1平均积分光密度值降低、NMDAR1平均积分光密度值增加。结论:甲亢阴虚小鼠模型有显著的焦虑状态增强,可以作为阴虚型焦虑模型使用,其焦虑机制可能与小鼠脑内GABA含量降低,GABAAR1表达减弱,Glu含量增加,NMDAR1表达增强有关。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R-332;R395【正文快照】：
焦虑性神经症(Anxiety Neurosis)简称焦虑症,是以广泛和持续性焦虑或反复发作的惊恐不安为主要特征的神经性障碍[1]。中医学认为本病属于内伤七情致病,与心、肾等功能失调有关。临床辨证分为心神不宁型、肾精不足型、阴虚火旺型、心火亢盛型等,其中肾阴虚型占了较大比重[2]。
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京公网安备75号中药甲亢宁对Graves病小鼠甲状腺功能及Akt信号通路影响的实验研究--《北京中医药大学》2014年硕士论文
中药甲亢宁对Graves病小鼠甲状腺功能及Akt信号通路影响的实验研究
【摘要】：目的本课题通过观测甲亢宁胶囊对Graves病模型动物的症状体征、甲状腺功能、甲状腺组织病理的影响,对甲亢宁进行综合的药效学研究,为临床应用提供有力的实验室依据,为滋阴潜阳化痰散结法的推广应用提供借鉴。以TSHR介导的甲状腺细胞内Akt途径为着眼点,通过其关键蛋白Akt、mTOR、Bcl-2、Bax、cyclin D1、PCNA的表达变化,观察甲亢宁对Akt信号转导通路的影响,探讨中药治疗Graves病的分子机制。方法采用Ad-TSHRα-289免疫BALB/c雌鼠建立GD动物模型,成模小鼠随机分组为正常对照组、空载病毒对照组、模型对照组、甲亢宁干预组、甲巯咪唑干预组,给药期间观察其活动状态和体重变化,5周后留取血清和甲状腺组织标本。采用放射免疫分析法检测小鼠血清T4、T3、TSH浓度,放射受体分析法检测小鼠血清TRAb浓度,甲状腺组织HE染色,综合评价甲亢宁的治疗效果。采用Western Blot法检测小鼠甲状腺组织Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、Bcl-2、Bax、cyclin D1、PCNA的表达,观察甲亢宁对该信号通路的作用影响。结果1 甲亢宁对GD小鼠症状体征的影响药物干预2周后,给药组小鼠体重开始回升；给药4周时,甲亢宁组体重(22.25±0.56)高于模型对照组(21.18±1.74)但无显著差异,甲巯咪唑组体重(22.73±1.13)明显高于模型对照组组(p0.05),两者在给药结束时间点无明显差异。药物干预阶段,可观察到甲亢宁组、甲巯咪唑组较模型对照组的甲亢症状随用药时间逐渐减轻。2 甲亢宁对甲状腺功能的影响给药前后甲亢宁组小鼠自身比较,TRAb水平明显降低(53.76±22.90vs16.90±20.75,p0.01),T4水平明显降低(204.03+52.22vs150.24±51.01,p0.01)。给药5周后,甲亢宁组TRAb、T4、T3水平较模型对照组均明显降低(5.69±3.81vs41.61±28.63；64.21±19.53vs122.18±16.63; 0.98±0.57vs3.07±0.64, p0.01),且与甲巯咪唑组比较没有显著性差异,各组间TSH水平无明显差异。3 甲亢宁对甲状腺组织形态的影响甲亢宁干预后,Graves病小鼠甲状腺的颜色、体积、组织结构较模型对照组均有一定程度的恢复,甲状腺大体观察与HE染色结果一致。4 甲亢宁对p-Akt、p-mTOR、Bcl-2、Bax、cyclin D1、PCNA表达的影响药物干预后,p-Akt/β-actin、p-Akt/Akt相对表达量甲亢宁组低于模型对照组但未表现出明显差异(0.29±0.05vs0.33+0.06；0.57±0.10vs0.66±0.10,p0.05),甲巯咪唑组显著低于模型对照组(0.27±0.04vs0.33±0.06; 0.53±0.07vs0.66±0.10, p0.05)。p-mTOR/β-actin、 p-mTOR/mTOR相对表达量甲亢宁组显著低于模型对照组(0.36±0.05vs0.42±0.05；0.69±0.08vs0.82±0.11,p0.01),甲巯咪唑组显著低于模型对照组(0.34±0.03vs0.42±0.05；0.67±0.09vs0.82±0.11, p0.01),中西药组之间没有显著差异(p0.05)。Bcl-2/β-actin相对表达量甲亢宁组显著低于模型对照组(0.23±0.05vs0.31±0.12,p0.05),甲巯咪唑组显著低于模型对照组(0.24±0.03vs0.31±0.12,p0.05),中西药组之间没有显著差异(p0.05)。Bax/β-actin相对表达量各组之间未表现出明显差异(p0.05)。Bcl-2/Bax相对表达量甲亢宁组低于模型对照组但未表现出明显差异(0.94±0.55vsl.17±0.41,p0.05),甲巯咪唑组显著低于模型对照组(0.77±0.15vsl.17±0.41, p0.05)。cyclinD1/β-actin相对表达量甲亢宁组、甲巯咪唑组均低于模型对照组但没有显著性差异(0.28±0.08vs0.36±0.10; 0.31±0.09vs0.36±0.10, p0.05)。P CNA/β-actin相对表达量甲亢宁组显著低于模型对照组(0.21±0.04vs0.28±0.07,p0.05),甲巯咪唑组则没有显著差异(0.23±0.05vs0.28+0.07,p0.05)。结论1用Ad-TSHRa-289免疫BALB/c雌鼠可成功诱导GD动物模型,该模型具备临床特征相似度、成模率和稳定性较高的特点。2 甲亢宁能有效减轻GD小鼠的甲状腺功能亢进状态,调节免疫降低致病性抗体TRAb,修复GD小鼠甲状腺病理改变。3 甲亢宁作用于Akt信号途径,下调Akt、mTOR、cyclin D1、PCNA的表达,可能是滋阴潜阳化痰散结中药抑制激素合成和细胞增殖的作用机制之一。4 甲亢宁作用于Akt信号途径,调节Bcl-2、Bax的表达关系,可能是滋阴潜阳化痰散结中药诱导甲状腺细胞凋亡的作用机制之一。
【关键词】：
【学位授予单位】：北京中医药大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2014【分类号】：R285.5【目录】：
中文摘要5-7ABSTRACT7-10英文缩略词表10-11第一部分 文献综述11-29 综述一 甲状腺功能亢进症的中医药治疗研究概况11-17
1 病名源流11
2 病因认识与病机演变11-12
3 治疗发展12-14
4 方药作用机制的实验研究进展14-15
5 展望15-17 综述二 Graves病与Akt信号通路研究概况17-23
1 GD概述17-18
2 Akt信号通路18-20
3 TSHR介导的Akt通路与Graves病20-21
4 展望21-23 综述三 Graves病动物模型的构建方法研究概述23-29
1 动物模型的构建方法23-27
2 动物模型的鉴定指标27-29第二部分 实验研究29-59 实验一 甲亢宁对GD小鼠甲状腺功能的影响29-43
材料与方法29-34
讨论39-43 实验二 甲亢宁对GD小鼠TSHR介导的Akt信号通路的影响43-59
材料与方法44-47
讨论54-59结论59-60参考文献60-71附图71-73致谢73-74个人简历74
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