WESTERN 的抗体可以用于免疫组化抗体选择吗

GFP抗体免疫组化的选择-急!
各位大虾及同道,我的实验是把携带绿色荧光蛋白GFP基因的病毒感染到动物视网膜上,然后切片做GFP的免疫组化观察病毒的分布情况,之前做过冰冻切片,感染效果很确定,但冰冻的视网膜组织形态很差,难以详细定位GFP的分布层面。大家都说GFP抗体是很常规的抗体,同事有在用的都是western用的GFP抗体,不知道能不能做免疫组化。我想请教一下诸位谁知道这种抗体的选择呢?与我实验动物的种属有多大关系呢?先跪谢啦~~另外如果我不做免组,冰冻切片后直接DAPI复染后看表达的GFP荧光可行吗?
11-01-10 &
gfp抗体选择需要根据自己实验应用上的需要来选择。比如GFP抗体的应用检测类型、GFP抗体的克隆性及制备来源等。GFP抗体是否能用于免疫荧光IF的检测?是否可以用于Western&Bloting和免疫沉淀IP实验?是否需要特异性更好的单克隆GFP标签抗体?一般来说,应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大,而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。标签抗体一定要选择原装进口的,国产的很多标签抗体包括进口分装的很多标签抗体在质量稳定性上有不足,并且经过分装以后,其效价也有损失。而且在抗体的特异性上也有很多不足,导致实验不出来结果,或者出现错误的结果。出现问题国产的我们所里碰到几个找对方售后,国产的很乱,不能提供售后技术,永远只会让客户自己去检查,设置很多障碍来证明是客户实验的错误,而并非是产品本身质量问题,导致很多投诉问题不了了之。原因就在于很多老师没有和他们过多交涉,一没时间,二没精力,三对方完全故意设置障碍。而原装进口gfp抗体不管在质量稳定、效价、特异性、售后方面都有很好的服务。真没必要为了省钱最后实验没做好,人还被他们搞的一身怒气。
请登录后再发表评论!求助:买不到用于IHC的抗体能否用用于western的抗体替代?诚谢!!_免疫组化吧_百度贴吧
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&签到排名:今日本吧第个签到,本吧因你更精彩,明天继续来努力!
本吧签到人数:0成为超级会员,使用一键签到本月漏签0次!成为超级会员,赠送8张补签卡连续签到:天&&累计签到:天超级会员单次开通12个月以上,赠送连续签到卡3张
关注:534贴子:
求助:买不到用于IHC的抗体能否用用于western的抗体替代?诚谢!!收藏
最近在订购免疫组化的抗体,可查了个遍,只找到了用于western和elisa的抗体,没有用于IHC的。请问各位高手买不到用于IHC的抗体能否用用于western的抗体替代?诚谢!!
Western实验人员,丰富的Western实战经验,完善的售前售后服务.全国免费咨询热线:400-672-1600
可以试试,但不能保证能用,因为IHC抗体识别空间构想,WESTERN蛋白有变性的过程,抗体只识别线性结构。
谢谢pudson
登录百度帐号推荐应用
为兴趣而生,贴吧更懂你。或ELISA、Western Blot、免疫组化的具体区别_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员,立省24元!
ELISA、Western Blot、免疫组化的具体区别
上传于|0|0|暂无简介
阅读已结束,如果下载本文需要使用1下载券
想免费下载本文?
定制HR最喜欢的简历
你可能喜欢免疫组化与Western&blot的区别
个人感觉还是有一定的区别的,从难度上来说,western比免疫组化容易些。western可以用内参,使结果更真实。western也可以组织定位,不过比较粗略,如果想看具体的位置,比如想要了解是哪些细胞,就要用到免疫组化。可以两个结合起来用。
免疫组化一般都是在组织上做,细胞上做的好像叫免疫过氧化物酶单层试验,叫法不一样。具体应用那个要看你有什么样的实验材料了。做Western&Blot用组织的很少,干扰太多了,一般都是细胞培养出来的样品。
如果你想知道某蛋白的组织表达特异性,用免疫组化,即可定位
如果想知道该蛋白在细胞中中有没有表达,用western,可定量
首先得从免疫组化和western
bolt之间的原理说起走哈,免疫组化,故名示意,应该是在组织上作的免疫荧光染色,包括冰冻切片和石蜡切片,而western作的是蛋白质电泳,一般是细胞破壁后的蛋白表达物
免疫组化除了可以定量之外,还可以定位。做免疫组化的标本来源可以是新鲜组织也可以是保存的蜡块,但western只能用新鲜组织
免疫组化时抗体识别的是未经变性处理的抗原决定簇(又称表位),有些表位是线性的,而有的属于构象型;线性表位不受蛋白变性的影响,天然蛋白和煮后的蛋白
都含有;构象型表位由于受蛋白空间结构限制,煮后变性会消失。如果你所用的抗体识别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可同时用于
免疫组化和Western,而如果抗体识别构象形表位,则只能用于免疫组化。一般抗体说明书上都有注明此种抗体识别的氨基酸区间。(限于单抗)
因为如果用普通显微镜只能看出阳性阴性,但在带有图像采集摄像系统的显微镜,采集软件带有自动分析功能,根据所标定的面积内阳性组织或细胞的面积来自动算出阳性率,因其人为因素较多,只能说是半定量
已投稿到:
以上网友发言只代表其个人观点,不代表新浪网的观点或立场。

我要回帖

更多关于 免疫组化抗体稀释液 的文章

 

随机推荐