l929细胞活力实验是什么细胞活力实验

M-CSF与L929细胞培养上清诱导分化骨髓巨噬细胞的差异分析--《生物技术》2015年02期
M-CSF与L929细胞培养上清诱导分化骨髓巨噬细胞的差异分析
【摘要】:[目的]通过比较常用的M-CSF与L929细胞培养上清两种诱导方式获得骨髓巨噬细胞(BMDM)的形态及基本生物学功能,为选择制备BMDM的方法提供实验依据。[方法]用两种方式诱导小鼠骨髓获取BMDM,然后分别利用Zeiss荧光显微镜和流式细胞仪比较BMDM的细胞形态及纯度;通过吞噬实验、杀菌实验以及液相芯片技术(liquid chip)比较两组BMDM的生物学功能;同时将上述结果与体内分化成熟的腹腔巨噬细胞相比较。[结果]两组诱导分化成熟的BMDM均呈现不规则形或梭形;BMDM的纯度分别为M-CSF组98.6%,L929上清组99.6%;腹腔细胞贴壁后巨噬细胞的纯度是98.8%;吞噬实验、杀菌实验两组之间及其与腹腔巨噬细胞相比无显著差异;炎症因子释放水平检测中3组细胞存在IL-6或TNF-α某些时间点释放水平差异。[结论]M-CS与L929上清诱导方式所获得BMDM的形态相似,纯度相近(98.6%比99.6%),吞噬细菌能力无显著统计学差异(21.31±5.83比26.10±6.11,t=-0.745,P0.05),杀菌能力无显著差异(杀菌30min:36.41%±4.21%比39.53%±6.75%;60min:44.35%±6.75%比45.27%±1.96%,两者均P0.05),但是炎症因子释放的某些时间点有差异(TNF-α的释放在LPS刺激后24 h M-CSF组高于L929组:549.92±412比271.47±432,t=-0.34,P0.05),应根据实验目的选择获取BMDM的诱导方式。
【作者单位】:
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【分类号】:R392【正文快照】:
0引言巨噬细胞具有非常重要的生物学功能。当病原体进入机体时,巨噬细胞能够迅速清除病原微生物发挥非特异性免疫防御作用[1];其次,巨噬细胞还能通过释放多种细胞因子广泛参与炎症、肿瘤免疫、止血、组织修复等过程,与此同时其自身的功能状态也受到局部微环境的影响。巨噬细胞
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