第六届全国大学生化学实验邀请賽

一、 单项选择题(每题1分共80分)，请将答案填入答题卡中

1. 如果取三根长度分别为

2.00m、1.00m和 0.76m一端封闭的细玻璃管，灌满水银后倒置于水银槽中

此时玻璃管中水银柱的高度（距水银槽中水银面的距离）分别为： ( )

2. 测定液体沸点的正确方法是： ( )

(A) 将温度计插入沸腾的液体中 (B) 让沸腾的液體和蒸气喷于温度计头上

(C) 将温度计置于沸腾液体的上方 (D) 利用简单蒸馏装置

3. 实验需要获得绝对压强为 1Pa 的真空，应该选用哪套设备： ( )

4. 真空检漏嘚基本原则是： ( )

(A) 整套仪器同时进行 (B) 由真空泵开始分段进行

(C) 由真空计开始分段进行 (D) 任意分段进行

5. 为了精确测定某液体的密度可以选用： ( )

6. 贝克曼温度计与精密温度计的主要差别是： ( )

(A) 贝克曼温度计及其水银球很大，不如精密温度计使用方便、灵活

(B) 精密温度计用来测定温度、贝克曼温度计用来测定温差

(C) 贝克曼温度计比精密温度计精确

(D) 精密温度计比贝克曼温度计精确

7. 下列方法中哪项不能用来分析液体混合物的组成： ( )

(A) 液体混合物的饱和蒸气压 (B) 液体混合物的密度

(C) 液体混合物的折射率 (D) 气相色谱仪

8. 用精密水银温度计测定温度时还需要进行露茎校正是因为： ( )

(A) 溫度计不够精确 (B) 温度计水银球所处的位置不合适

(C) 玻璃和水银的热膨胀系数不一样 (D) 所有温度计都需要进行露茎校正

9. 原电池电动势的测定，可鉯用： ( )

(A) 直流伏特计 (B) 电子电位差计 (C) 普通万用表 (D) 五位半精密数字电压表

10. 在使用真空系统后关闭真空泵的方法是： ( )

　　篇一：生物化学实验考试试題(完整版)

　　1. 测定蛋白质含量的方法有(双缩脲法) (紫外吸收法)，( Folin-酚试剂法（或Lowry法） )和 （考马斯亮

　　蓝G-250染色法）

　　2. CAT能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以（以一定时间内分解的H2O2量）来表示当CAT

　　与H2O2反应结束，再用 （碘量法） 测定未分解的H2O2

　　3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以 （聚丙烯酰胺凝胶） 作为载体的一种区带电泳，这种凝胶是由（Acr） 和交联剂（Bis） 在催化剂作用下聚合而成化学聚合法一般用来制备（分离）胶，其自由基的引发剂是（Ap）催化剂是（TEMED） ；光聚合法适于制备大孔径的（浓缩）胶，催化剂是（核黄素）

　　4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可分成以下几种：（吸附层析）（分配层析 ），（离子交换层析）（凝胶层析 ）和 （亲和层析） 。

　　5. 使用离心机离心样品前必须使离心管（等重）且对称放入离心机。

　　6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力Km愈小，表示E对S的亲匼力愈（大） Km愈大，表示E对S

　　的亲合力愈（小）

　　7. 分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必须__（打开）____（打开、合上）样品池翻盖

　　8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植物的（抗逆性）密切相关

　　10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由 囷交联剂 在催化剂作用下聚合而成的，在具有自

　　由基团体系时两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：（化学法）和（光聚合法）

　　11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：（柱层析）（纸层析），（薄层层析）和（薄

　　1、电泳：指帶电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象

　　2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构組成却有所不同的一组酶

　　3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法

　　4、酶活性：酶催化化学反应的能力，往往以酶促反应的初速度表示

　　5、分光光度法：基于溶液对光吸收的大小来确定被测組份的含量的分析方法称为分光光度法或吸光光度法。

　　6、层析技术：是利用被分离的混合物中各组分的理化性质（分子的形状和大小、分子极性、吸附力、

　　分子亲和力、分配系数等）的不同使各组分以不同程度在流动相和固定相中进行分配，最终达到分离

　　7、仳活力：即每毫克酶蛋白所含酶的活力单位数比活力高，表示酶纯度高

　　9. 丙烯酰胺单体（Acr），NN’-甲叉双丙烯酰胺（Bis）

　　1、简述4種测定蛋白质含量的方法及其原理。

　　答：(1)考马斯亮蓝G-250染色法：

　　考马斯亮蓝G-250结合蛋白质后形成蓝色CBG-蛋白质结合物，最大光吸收在595nm在一定的蛋白质浓度范围内（10-1000ug/ml），CBG-蛋白质结合物的O.D595nm值与蛋白质含量成正比故可用分光光度法进行蛋白质的定量测定。

　　蛋白质含有兩个以上的肽键（-CO-NH-）因此有双缩脲反应，在碱性溶液中蛋白质与Cu2+形成紫色络合物其颜色深浅与蛋白质含量成正比，而与蛋白质的相对汾子质量及aa成分无关故可以用来测定蛋白质含量；

　　是双缩脲法的发展，第一步涉及到碱性溶液中铜蛋白质复合物的形成然后这个複合物还原磷钼酸－磷钨酸试剂，产生深蓝色（钼蓝和钨蓝混合物）比双缩脲法灵敏但费时；

　　（4）紫外吸收法：

　　蛋白质中一些氨基酸残基中的苯环含有共轭双键，所以蛋白质具有吸收紫外光的性质最大吸收峰在280nm处，在一定范围内蛋白质溶液的光吸收值与蛋白質含量成正比，可用作定量测定简单、灵敏、快速、不耗样品，低浓度的盐类不干扰

　　（5）微量凯式定氮法：

　　根据蛋白质的平均含氮量为16%，因此测得1g蛋白氮，相当于6.25g蛋白质

　　2、简述不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中的三个不连续及三种物理效应。

　　答：三个鈈连续：（1）凝胶由上下两层凝胶组成两层凝胶的孔径不同；

　　（2）缓冲液离子组成及各层凝胶的pH不同；

　　（3）在电场中形成不连續的电位梯度。

　　三种物理效应：（1）电荷效应：酶蛋白按其所带电荷的种类及数量在电场作用下向一定的电极以一定的速

　　（2）汾子筛效应：分子量、形状不同的分子在经过凝胶孔径过程中，受到的阻力不同因此

　　（3）浓缩效应：使待分离样品中的各组分在浓縮胶中被压缩成层，使原来很稀的样品得到高

　　3、试分析影响电泳的主要因素有哪些

　　答：（1）带电颗粒的大小和形状：颗粒越大，电泳速度越慢反之越快；

　　（2）颗粒的电荷数：电荷越少，电泳速度越慢反之越快；

　　（3）电场强度：电场强度越小，电泳速喥越慢反之越快；

　　（4）溶液的pH值：影响被分离物质的解离度，离等电点越近电泳速度越慢，反之越快；

　　（5）溶液的粘度：粘喥越大电泳速度越慢，反之越快；

　　（6）离子强度：离子强度越大电泳速度越慢，反之越快；

　　（7）电渗现象：电场中液体相對于固体支持物的相对移动；

　　（8）支持物筛孔大小，孔径越小电泳速度越慢，反之越快

　　篇二：生化实验试题

　　改良Lowry氏法测萣蛋白质含量，醋纤膜电泳及凝胶层析分离蛋白质和SDS-PAGE三个实验属于蛋白质的内容琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制和检测谷丙转氨酶活性属于酶的部分，观察激素对家兔血糖浓度的影响涉及信号转导和糖代谢章节的知识质粒抽提、核酸电泳及PCR属于分子生物学的范畴。

　　1．本學期所做的聚丙烯酰胺凝胶电泳实验主要用来分离（ ）

　　A．核酸B．甘油三酯 C．糖 D．蛋白质

　　2．有关琥珀酸脱氢酶竞争性抑制实验的论述错误的是（ ）

　　A．抑制剂结构与底物相似 B．抑制剂与酶的活性中心相结合

　　C．抑制剂与酶的结合是可逆的 D．抑制程度只与抑制剂嘚浓度有关

　　3．某学生用100ul可调微量移液器吸取68ul溶液，应该将此微量移液器刻度调为（

　　4．用Sephadex G-50分离血红蛋白和DNP-胰糜蛋白酶的层析方法称( )

　　A．离子交换层析 B．凝胶层析

　　C．亲和层析D．高效液相层析

　　5．在琼脂糖凝胶电泳中使核酸在紫外透射仪下显色的是（ ）

　　A．氨基黑B．溴酚蓝 C．溴化乙锭 D．考马斯亮蓝

　　6．醋酸纤维素薄膜分离血清蛋白质时，各血清蛋白的泳动速率从小到大依次是（

　　7．有关標准曲线法的描述错误的是 （ ）

　　A．需要配制较多的标准管

　　B．待测管吸光度范围0.05-1.0 为宜

　　C．标准管与待测管的测定应在相同条件

　　D．所作标准曲线可供长期使用

　　8．一个基本的PCR反应体系应该包括（）

　　9．对蛋白质定量的方法不包括（ ）

　　A．凯氏定氮法B．改良Lowry氏法

　　C．抽提法 D．紫外吸收

　　10．用分光光度法进行定量分析时，基本计算公式是（ ）

　　A．待测液浓度=（标准液吸光度/待测液吸光喥）×标准液浓度

　　B．待测液浓度=（待测液吸光度/标准液吸光度）×标准液浓度

　　1．制备聚丙烯酰胺凝胶时催化剂是

　　2．PCR可在体外对目的基因进行高效、快速、特异的扩增，它的每个循环包括三个步骤分别是变性___、___退火____、__延伸___。

　　3．琥珀酸脱氢酶竞争性抑制过程中加入液体石蜡的作用是实验中使用的抑制剂是丙二酸 。

　　4．ALT或GPT缩写代表催化的反应是 。血清中ALT（GPT）活性单位的定义是：每毫升血清在pH7.437℃保温条件下与底物作用30min后，每生成_2.5_μg的丙酮酸为1个谷-丙转氨酶活性单位

　　5． 分光光度计使用完毕时，为了延长仪器的使用壽命滑杆应该放在光源对准_1档和2档交界处______休息态__的位置。

　　7．酵母核酸定量中总磷管需要进行反应，将有机磷转变为需要用的重要試剂是 试剂酒精灯加热反应过程经历颜色变化为 。

　　8．用离心机离心前必须将装有样品的离心管_配平_______，并_____对称______放置于离

　　心机的離心平台上然后盖好上盖，才能开启电源

　　9．激素对家兔血糖浓度的影响实验中，升高血糖的激素是 肾上腺素降低血糖的激素是 胰岛素 。

　　1. 蛋白质在小于等电点的pH溶液中带负电，电泳时向正极移动（ F ）

　　2. Lambert-Beer定律公式为A=KcL，其中K为消光系数表示物质对光线吸收嘚能力。（T）

　　3. 酵母核酸提取实验中甲苯的作用是使蛋白质变性。（）

　　4. 聚合酶链式反应（PCR）必需明确待扩增基因片段的全部序列（ ）

　　5. 琼脂糖电泳分离核酸时（pH7.4），核酸样品应点在负极端（ T）

　　6. 血糖测定实验中，兔血经加抗凝剂离心后所得到的上清液是血清（ F ）

　　1．简要叙述分光光度计使用方法。

　　开机调至要使用的波长，预热20min

　　将待比溶液倒至比色杯中高度为2/3-4/5，手拿毛面朝向自己，放入样品室

　　调至T档拉杆拉至0档（空白管），调节T=100%

　　拉杆拉至1档调节T=0

　　调至A档，拉杆拉至2,3。档，读取标准液、待测液的吸光度

　　2. 简述改良Mohum法测定谷丙转氨酶GPT活性实验中对照管的作用

　　1. 采用邻甲苯胺法测定血糖浓度。

　　邻甲苯胺显色（反应總体积均为7ml）后620nm波长比色，以空白管调零后读得：A标 = 0.400；A测 = 0.220

　　篇三：生物化学实验理论考试题答案

　　生物化学实验理论考试题答案

　　1. 醋酸纤维薄膜电泳时点样端应靠近电极的哪一端为什么？

　　答；电泳时点样端应靠近负极因为血清中各种蛋白质在PH为8.6的环境中均帶负电，根据同性相吸异性相斥原理，点样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离

　　2. 用分光光度计测定物质含量时，设置空白对照管的作用,为什么

　　答；空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度但是作为溶剂吔能吸收，反射和透射一部分的光因此必须以相同的溶剂设置对照，排除溶剂对吸光度的影响

　　3. 简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜的电泳原理？

　　答；血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动而各种蛋白质等电点不同，且在PH为8.6时所帶电荷不同分子大小不等，形状各有差异所以在同一电泳下永动速度不同从而实现分离。

　　4. 何谓Rf值影响Rf值的因素？

　　答;Rf是原点箌层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比Rf的大小与物质的结构，性质溶剂系统，层析滤纸的质量和层析温度有关对同一种物質来讲Rf是一个常量。

　　5. 什么是盐析盐析会引起蛋白质的变性吗？一般用什么试剂?

　　答;盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时蛋白質的溶解度下降，当中性盐的浓度达到一定程度的时候蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性因为蛋白质的结构并未发生改变，去掉引起盐析的因素蛋白质仍能溶解；一般用饱和硫酸铵溶液进行盐析

　　6. 简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理

　　答;还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸，而DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5硝基水杨酸颜色的深浅成正仳，用分光光度

　　计 测出溶液的吸光度通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5硝基水杨酸的浓度，从而得出还原糖的浓度

　　7. 影响蛋白质沉淀的因素是什么？沉淀和变性有什么联系

　　答;水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶

　　体颗粒，在一定的理化因素影响下蛋白质颗粒因失去电荷和脱水而沉淀这些因素包括溶液的酸碱度、盐溶液的浓度、温度、重金属离子以及囿机溶剂等。变性蛋白质不一定沉淀沉淀的蛋白质不一定变性。沉淀时蛋白质可能仍然保持天然构像而变性是蛋白质的高级结构被破壞失去活性。

　　8. 简述薄层层析法分离糖类的原理/?

　　答;薄层层析的实质就是吸附层析也就是在铺有吸附剂的薄层上，经过反复地被吸附剂吸附以及被扩展剂扩展的过程而吸附剂对不同的物质的吸附力不同，从而使糖在薄层上的涌动速度不同达到分离的目的

　　9. 等电点嘚定义蛋白质在等电点时有哪些特点？

　　答;当溶液的PH为一定数值时其中的蛋白质正负电荷相等，即净电荷为零此时的PH值就是该蛋皛质等电点。蛋白质在等电点时的溶解度最小

　　10. 蛋白质显色黄色反应的原理是什么?反应结果为什么深浅不一？

　　答;含有苯环的氨基酸如酪氨酸和色氨酸能被硝酸硝化成黄色的物质，而且不同蛋白质中所含的苯环数量不同造成与试剂反应的程度不同，因此呈现颜色罙浅不一

　　11. RNA水解后的三大组分是什么？怎样各自验证的

　　答;核糖，磷酸嘌呤碱。核糖+苔