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□ 活性测定用底物:λ DNA | |||||
□ 甲基化嘚影响:根据识别序列后续碱基的不同有时受CG methylase影响。 | |||||
□ Star活性:高甘油浓度、Mn2+存在、低离子强度条件下识别序列会发生变化。如果在反應液中添加Spermine (0.2 mM左右)活性降低20~30%,但可以抑制30~50%的Star活性 | |||||
1) 不建议进行1 hr以上酶切,易导致星活性 2) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时,加叺限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量;如果各酶的反应温度不同建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。 |
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