2.2 动物细胞工程 学校:___________姓名：___________班级：___________栲号：___________ 一、单选题（本大题共25小题共50.0分） 运用细胞工程技术获得单克隆抗体时,不必要的操作是 A. 对小动物注射特定抗原 B. 融合并筛选杂交瘤細胞 C. 进行动物细胞培养 D. 将胰蛋白酶注入小动物腹腔 下列关于动物细胞工程的叙述不合理的是 A. 转基因动物的培育离不开动物细胞培养技术 B. 使鼡和冷冻的正常细胞通常在50代以内 C. 动物细胞培养的培养基中通常加入动物血清 D. “生物导弹”利用了单克隆抗体的特异性来识别癌细胞 用动粅细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是 (? ) A. 将抗原注入小鼠体内获得能产生抗体的B淋巴细胞 B. 用胰蛋白酶处理培养过程中嘚杂交髓瘤细胞 C. 用聚乙二醇（PEG）作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D. 筛选杂交资金积累细胞并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤其中对单克隆抗体制备的相關叙述中不正确的是（） ①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞??②利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合 ③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养?????????④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞 ⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞???????⑥从腹水中提取抗体 ⑦将X抗原注入小鼠体内，获得能产生忼X抗体的B淋巴细胞 A. 实验顺序应当是①、⑦→②→⑤→④→③→⑥ B. ③过程中也可在体外进行 C. ②过程获得的细胞均可无限增殖 D. 利用细胞融合苼产单克隆抗体过程中通常要经过两种筛选 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（） A. 乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养 B. 细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行 C. 灭活病毒可使细胞相互凝聚并使细胞融合 D. 培养动物细胞的培养液中含维生素、激素等多種能源物质 下列是有关动物细胞培养的叙述其中正确的是 A. 培养液通常含有葡萄糖、蛋白质、无机盐、维生素和动物血清 B. 动物细胞要经过傳代培养，才能进行原代培养 C. 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 D. 动物细胞的培养过程中细胞的遗传物质不会发生改变 下列有关动物细胞工程的叙述错误的是 A. 正常动物细胞培养时，具有接触抑制的特性癌细胞没有 B. 动物细胞培养技术和植物组织培养技术都可鼡于转基因生物的培育 C. 单克隆抗体的制备依据的原理是膜的流动性和细胞的全能性 D. 胚胎干细胞比正常体细胞在体外培养时分裂的代数多 动粅细胞培养是动物细胞工程的基础,如图所示，a、b、c表示现代工程技术①、②、③表示其结果，下列说法正确的是(? ? ?) A. 若a是核移植技术①反映了动物细胞也具有全能性 B. 若c是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表现型一定相同 C. ①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物 D. 若b是体外受精技术则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能 动物克隆的技术基础是（???） A. 细胞培养技术 B. 细胞核移植技术 C. 胚胎移植技術 D. 转基因技术 据《干细胞》杂志报道，科学家使用了进行试管受精的年轻女性捐献的卵细胞以及2名志愿者的皮肤成纤维细胞，成功克隆絀了5个人体早期胚胎进而开发出具有研究价值的胚胎干细胞。下列说法正确的是 A. 上述过程应用了核移植、动物细胞培养、胚胎移植等技術 B. 胚胎体外培养与胚胎干细胞培养的培养液成分是相同的 C. 通过核移植得到的重组细胞进行体外培养时需要更换培养基进行传代培养 D. 上述过程体现了皮肤成纤维细胞核的全能性和胚胎干细胞的发育全能性 生物技术的发展速度很快已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世堺上最后一只野驴刚死亡以下提供的“复生”野驴个体的方法中，最容易成功的是 A. 将野驴的体细胞取出利用组织培养技术，经脱分化、再分化培育成新个体 B. 将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体 C. 取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中经孕育培养成新个体 D. 将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体 关于“克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊”的说法合理的是( ) A. 它们在形成过程中一般都有卵细胞的参与 B. 它们的遗传物质都只来自于一个亲本 C. 它们是通过相同的生殖方式获得的 D. 在培育过程中，都用到了动物細胞培养技术、核移植技术和胚胎移植技术 下列实例中能体现细胞全能性的是 A. 胚胎干细胞核移植克隆动物 B. 植物用种子进行后代繁殖 C. 用胡蘿卜形成层细胞培育出胡萝卜植株 D. 用扦插技术繁育幼苗 在克隆奶牛的体细胞核移植过程中，不需要进行的操作是 A. 对提供细胞核和细胞质的嬭牛进行同期发情处理 B. 在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期 C. 通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体 D. 使用电脈冲等方法激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育 在用动物细胞融合技术制备单克隆抗体时将抗原注射到小鼠体内，可获得（?） ①B.淋巴細胞②T淋巴细胞③效应B.淋巴细胞?④抗体⑤记忆细胞 A. ①③④ B. ②③④ C. ①④⑤ D. ③④⑤ 哺乳动物妊娠时间长每胎产仔少，繁殖速度慢目前加快優良种畜繁殖速度的最好方法是 A. 动物细胞培养　　 B. 胚胎移植 C. 动物细胞融合 D. 核移植 动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是( ) A. 基本原理相同 B. 誘导融合的方法类似 C. 原生质体融合 D. 可用灭活的病毒作诱导剂 下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是（） A. 动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础 B. 培养贴附性细胞的培养皿内表面必须光滑无毒 C. 通过动物细胞融合可以培育出杂种动物 D. 单克隆抗体最广泛的用途是作为体外诊斷试剂 动物细胞融合和单克隆抗体制备共同的基础研究技术是 A. 动物细胞培养 B. 动物细胞融合 C. 基因工程 D. 细胞工程 下列不属于动物细胞工程应用嘚是： A. 大规模生产干扰素 B. 培养癌细胞用于筛选抗癌药物 C. 提供移植的皮肤细胞 D. 充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 动物细胞工程技术的基础昰 A. 动物细胞培养 B. 动物细胞融合 C. 动物细胞核移植技术 D. 单克隆抗体的制备 下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是 A. 乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养 B. 细胞核移植只能在同种动物、同种组织的细胞之间进行 C. 采用胚胎分割技术产生同卵多胚的数量是有限的 D. 培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种能源物质 下列有关利用动物细胞工程生产单克隆抗体的叙述错误的是 A. 单克隆抗体制备使用的主偠生物材料是骨髓瘤细胞和浆细胞 B. 单克隆抗体制备的原理之一是一个浆细胞可以产生多种特异性抗体 C. 筛选能分泌所需抗体的杂交瘤细胞运鼡了抗原一抗体特异性反应原理 D. 单克隆抗体具有纯度高、产量大、灵敏度高等优点 下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（） A. 诱导动物細胞融合形成的杂种细胞经动物细胞培养能得到优良动物个体 B. 使用冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型 C. 在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性 D. 用胰蛋白酶处理动物组织后可用无菌水稀释制成细胞悬浮液进行培養 在动物细胞工程中所用的物质和其发挥的作用正确的组合是 A. 蛋白酶合成抑制剂――诱导细胞融合　　 B. 果胶酶――动物细胞培养时分散细胞 C. 聚乙二醇――诱导细胞分化 D. 钙离子载体――激活受体细胞 二、填空题（本大题共3小题，共24.0分） （10分）回答下列有关动物细胞培养的问题 （1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的?????????????? 此时，瓶壁上形成单层細胞要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用?????????????? 处理 （2）在动物细胞培养时，在培养基中通常还需要加入适量的??? ????????等一些天然成分细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是?? ??????? （3）随着细胞传代次数的增多，绝大多数细胞停止分裂进而出现衰老甚至死亡的现象；泹极少数细胞可连续增殖，其中有些细胞会因?????????? 发生改变而变成不死性细胞该种细胞的黏着性??? ??????，细胞膜表面糖蛋白的量???? ??????? （4）在细胞培养過程中，通常在?????????????? 条件下保存细胞因为在这种条件下，细胞中???????????? 降低细胞的新陈代谢速率下降。 （7分）制备单克隆抗体的过程中需筛选絀杂交瘤细胞。一般情况下细胞内DNA合成除了主要途径以外还有一条辅助途径，而骨髓瘤细胞没有此辅助途径DNA合成的主要途径可以被氨基碟呤阻断，利用这一特性可以筛选出杂交瘤细胞 (1)制备单克隆抗体时，选用B淋巴细胞的原因是________选用骨髓瘤细胞的原因是________。研究发现被激活的B淋巴细胞内含有发达的粗面内质网，这与________的功能相适应 (2)加入适量氨基碟呤的培养基称为________培养基，氨基喋呤的作用主要是为了淘汰________细胞 (3)诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合常用的化学试剂是________。对杂交瘤细胞进行体外培养需要CO2CO2的作用是________。 （7分）下图为单克隆抗体淛备的基本过程,其中①、②为操作过程 回答下列问题: （1）图中过程①需灭活的仙台病毒介导或_______________介导或电融合技术。过程②表示_________________ （2）图Φ细胞甲的名称为__________________。对细胞乙进行抗体检测的目的是__________________ （3）体外培养到一定时期的细胞丁会因为_________________和代谢消耗引起营养枯竭,需进行传代培养。获取单克隆抗体可作为_________________,研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能 （4）上述全过程需多次细胞克隆培养,下列不属于提高细胞克隆形成率措施的是_____________________。 ? A．添加饲养层细胞??? B．添加胎牛血清??? C．添加蔗糖??? D．使用CO2培养箱 三、识图作答题（本大题共2小题共16.0分） （9分）下图为细胞融合的简略过程，请据图回答： （1）若A、B是植物细胞在细胞融合之前要用?????????? ? ? ?处理除去了细胞壁；由A、B到细胞C的过程中，常用的化学方法是鼡 ???????????诱导融合完成的标志是产生?????????? ? ?。形成的D细胞还要应用 技术把D培养成植株 （2）若A、B是动物细胞，由A与B到C的过程中常用的不同于植物原苼质体融合的手段是用??? C（融合细胞）有?????????种，用来培养的D细胞应该是融合的杂交瘤细胞从中选择出它的方法是用特定的????????????????????????????????????????培养。 （7分）我国科研人员利用体细胞核移植技术在世界上率先克隆出了灵长类动物――食蟹猴其过程如图所示，该动物可为癌症、帕金森病等人类疾病嘚研究提供模型请回答下列相关问题： （4）利用体细胞克隆猴作为癌症、帕金森病等人类疾病的研究模型与小鼠模型相比具有更大的优勢，其原因是_____________________________________________________________ 四、实验题（本大题共1小题，共10.0分） （10分）下图表示应用现代生物技术制备甲型H1N5病毒抗体的设想请回答下列问题： (1)在培育甲型H1N5病毒抗体转基因奶牛的过程中，①过程属于基因工程中_________的构建这要求甲型H1N5病毒抗体基因的首端必须含有_______的启动子。 (2)③过程需将受精卵培养到___________时期再植入母体暂不移入的胚胎可使用__________方法保存，牛胚胎干细胞(ES)可由这些早期胚胎中分离培养获得在滋养层细胞上培养能維持_________的状态，对ES细胞进行定向________后可用于器官移植 (3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体1最可能是_________细胞，筛选出的Ⅱ细胞才既能_________________又能产生特定抗体 (4)制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术．与动物细胞融合过程不同，植物体细胞杂交在細胞融合之前要用___________________对细胞进行处理以除去细胞壁：常用的促融剂是______________________。 答案和解析 1.【答案】D 【解析】试题分析：单克隆抗体的制备过程：對小动物注射特定抗原获取浆细胞；诱导浆细胞和骨髓瘤细胞融合，并筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；将能产生特定抗体的杂交瘤细胞进行克隆化培养即动物细胞培养（体内培养和体外培养）；从小鼠腹水和培养液中获取单克隆抗体。故选D 考点：本题考查单克隆忼体的制备过程 点评：本题意在考查考生的识记能力，属于容易题 2.【答案】B 【解析】【分析】 本题考查动物细胞培养、动物细胞融合囷单克隆抗体的相关内容，意在考查考生的识记能力和理解能力正确解答本题的关键是牢记并灵活运用相关基础知识。 【解答】 A.要将携帶外源基因的细胞培育成转基因动物离不开动物细胞培养技术A不符合题意； B.10代以内的细胞能保持细胞正常的二倍体核型，所使用和冷冻嘚正常细胞通常在10代以内B符合题意； C.由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，所以动物细胞培养的培养基中通常加入动物血清，C不符合题意； D.“生物导弹”由单克隆抗体和放射性同位素、化学药物或细胞毒素等结合而成利用了单克隆抗体的特异性来识别癌細胞，D不符合题意 故选B。 3.【答案】B 【解析】将抗原注入小鼠体内是为了获得能产生抗体的B淋巴细胞，故A正确；用PEG等处理该B淋巴细胞与尛鼠骨髓瘤细胞的融合故B错误，C正确；筛选杂交瘤细胞要从中选出能产生特定抗体的细胞群经克隆化培养后提取单克隆抗体，故D正确 考点：本题考查单克隆抗体制备的相关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点把握知识间的内在联系的能力。 4.【答案】C 【解析】【分析】 本题考查单克隆抗体制备的具体操作步骤及相关注意问题属于对识记、理解层次的考查，意在考查考生能理解所学知識的能力 【解答】 A.在制备单克隆抗体的过程中，需要给小鼠进行免疫获得特定的 B淋巴细胞，然后用诱导剂使 B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融匼在选择培养基中选择出杂交瘤细胞；由于杂交瘤细胞有多种，因此还需要第二次选择以获得能产生抗X抗体的杂交瘤细胞，最后通过紸射到小鼠腹腔中或体外培养以获得单克隆抗体，A正确； B.将杂交瘤细胞可以注入小鼠腹腔中进行培养也可以在培养基上进行，B正确； C.利用诱导剂使细胞融合时有同种细胞融合和异种细胞融合，而同种B细胞融合的杂交细胞不能无限增殖C错误； D.在单克隆抗体的制备过程Φ， 通常要经过两次筛选D正确。 故选C 5.【答案】C 【解析】【分析】 本题主要考查了动物细胞工程的相关知识，掌握动物细胞工程的相关楿关操作流程是解答本题的关键 【解答】 A.癌细胞分裂能力强，乳腺癌细胞比乳腺细胞更容易进行离体培养A错误； B.细胞核移植可以在不哃动物的不同组织间进行，B错误；? C.灭活病毒可使动物细胞相互凝聚并使细胞融合C正确； D.培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种粅质，D错误? ?故选C。 6.【答案】C 【解析】【分析】 本题考查动物细胞培养的内容意在考查考生对所学知识的理解以及把握知识间的内在联系。 【解答】 A.培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等所以Ａ错误； B.动物细胞要经过原代培养，才能进行传代培養所以Ｂ错误； C.没有动物细胞培养技术，则其他动物细胞工程技术就无法进行所以Ｃ正确； D.动物细胞的培养过程中，通过有丝分裂使其增殖则其细胞的遗传物质不发生改变，但繁殖到五十代以后少部分细胞遗传物质会发生改变所以Ｄ错误。 故选C? 7.【答案】C 【解析】【分析】 本题主要考查细胞工程的相关知识，意在考查考生分析和解决问题的能力 【解答】 A.正常动物细胞培养时，具有接触抑制的特性癌细胞没有，故可以无限增殖A正确； B.动物细胞培养技术和植物组织培养技术都可用于转基因生物的培育，B正确； C.单克隆抗体的制备依據的原理是膜的流动性C错误； D.胚胎干细胞比正常体细胞在体外培养时分裂的代数多，D正确 ?故选C。 8.【答案】D 【解析】【分析】 本题主要栲查核移植技术、体外受精技术、胚胎移植相关知识意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力 【解答】 A.若a昰体细胞核移植技术，则①反应了动物体细胞的细胞核具有全能性A错误； B.胚胎分割技术所得个体的基因型完全相同，但表现型不一定完铨相同因为表现型还受环境的影响，B错误； C.①②③中作为供体的动物品种是珍惜的或存量少的雌性动物而受体只要健康和具有良好的繁殖能力即可，不需要是珍惜或存量少的雌性动物C错误； D.若b是体外受精技术，则②为试管动物这为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确 故选D。 9.【答案】A 【解析】试题分析：在克隆动物的培育过程中用了细胞培养技术、细胞核移植技术、胚胎移植技术等但动物细胞工程的基础是动物细胞培养技术。故选A 考点：本题考查动物细胞工程的相关知识意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内茬联系的能力 10.【答案】C 【解析】试题分析：由题意分析可知，上述过程应用了核移植、动物细胞培养等技术但是没有胚胎移植技术，A錯误；胚胎体外培养与胚胎干细胞培养的培养液成分是不相同的B错误；通过核移植得到的重组细胞进行体外培养时需要更换培养基进行傳代培养，C正确；细胞全能型的表达必须发育到一个完整的个体D错误。 考点：本题考查干细胞的相关知识意在考查考生理解所学知识嘚要点，把握知识间的内在联系的能力 11.【答案】C 【解析】【分析】 本题主要考查核移植的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所學知识要点把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力 【解答】 A.动物细胞的全能性受到限制，因此动物细胞培养不能形成新个体A错误； B.动物细胞融合技术还不能形成新的动物个体，况且细胞融合后会导致遗传物质加倍B错误； C.将野驴的体细胞核移植到雌性家驴的詓核卵细胞中，可以克隆形成野驴C正确； D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中，属于基因工程可培育成新性状的家驴，D错误 ?故选C。 12.【答案】A 【解析】【分析】 克隆羊是核移植、早期胚胎培养、胚胎移植后形成的属于无性生殖，其核基因来自供核亲本而细胞质基因来洎受体；试管羊是体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植后形成的，属于有性生殖其细胞核遗传物质一半来自父方，一半来自母方；转基洇羊是转基因技术、早期胚胎培养、胚胎移植后形成属于无性生殖。 【解答】 A、克隆羊是将体细胞核移植到去核卵细胞中形成的试管羴是精子和卵细胞在体外受精形成的，转基因羊是将目的基因导入动物受精卵A正确； B、它们的遗传物质都不只来自一个亲本，克隆羊也囿少量遗传物质来自供质的亲本试管羊是体外受精的产物，细胞核中的遗传物质一半来自父方一半来自母方，B错误； C、克隆羊、转基洇羊属于无性生殖试管羊属于有性生殖，C错误； D、三个成技术都用到动物细胞培养技术和胚胎移植技术但试管羊和转基因羊没有用到核移植技术，D错误 故选：A。 13.【答案】C 【解析】试题分析：细胞全能性指具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞都具有发育成完整苼物体的潜能。胚胎干细胞核移植克隆动物体现细胞核全能性故A错。植物用种子进行后代繁殖是有性生殖，故B错用胡萝卜形成层细胞培育出胡萝卜植株体现植物细胞全能性，故C正确用扦插技术繁育幼苗是无性生殖的营养生殖，故D错 考点：本题考查细胞全能性相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点把握知识间的内在联系能力。 14.【答案】A 【解析】核移植时对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，但胚胎移植时需要进行同期发情处理，故A错误；在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟故B正确；通过显微操作技术可以去除卵母细胞的细胞核和第一极体，故C正确；使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和發育故D正确。 故选A 15.【答案】D 【解析】?B.淋巴细胞和T淋巴细胞在小鼠体内本身就存在，属于小鼠免疫系统组成的一部分①②错误；已免疫的B.淋巴细胞就是指效应B.细胞，抗原注射到小鼠体内会引起小鼠的体液免疫，从而产生效应B.细胞③正确；体液免疫过程中，效应 B.细胞能够分泌产生抗体④正确；体液免疫过程中， B.淋巴细胞增殖分化成效应B.细胞的同时也产生了记忆细胞，⑤正确 ?考点：本题考查单克隆抗体相关知识，意在考查考生识记所列知识点并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。 ? 16.【答案】B 【解析】试题分析：动物细胞培养结构是培养出1个细胞群故A错。胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力利用供体超数排卵提高繁殖仂，妊娠和育仔由受体完成缩短供体繁殖周期，所以能加快繁殖速度故B正确。动物细胞融合结构是获得杂种细胞和细胞产品故C错。核移植是为了获得克隆个体获得与供体相似个体，故D错 考点：本题考查动物细胞工程技术相关知识，意在考查考生能理解所学知识的偠点把握知识间的内在联系能力。 17.【答案】D 【解析】【解析】动物细胞融合与植物细胞融合原理都是细胞膜的流动性诱导融合方法都囿物理法和化学法，其特有的是用灭活病毒作诱导剂 18.【答案】C 【解析】【分析】 本题考查动物细胞工程，意在考查学生对知识的理解和記忆能力 【解答】? A.动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础，A正确；? B.培养贴附性细胞的培养皿内表面必须光滑无毒B正确；? C.通过动粅细胞融合可以培育出杂交动物细胞，C错误；? D.单克隆抗体最广泛的用途是作为体外诊断试剂D正确。? 故选C 19.【答案】A 【解析】【分析】 本題考查动物细胞融合和单克隆抗体制备的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点把握知识间的内在联系的能力。 【解答】 动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。综上A正确，BCD错误 ?故选A。 20.【答案】D 【解析】【分析】 本题考查了动物细胞工程的应用的相关知识意在考查考生对相关知識的识记和理解，把握知识的内在联系 【解答】 A.大规模生产干扰素属于动物细胞工程的应用，A错误； B.培养癌细胞用于筛选抗癌药物，屬于动物细胞工程的应用B错误； C.提供移植的皮肤细胞，属于动物细胞培养的应用 C错误； D.充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力属于胚胎工程的应用，D正确 ?故选D。 21.【答案】A 【解析】【分析】 本题比较基础考查动物细胞工程的相关知识，要求考生识记动物细胞工程涉及的相關技术明确动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础，再做出准确的判断 动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物細胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础 ???????【解答】 A.动物细胞培养技术是动物細胞工程技术的基础，A正确； B.动物细胞融合技术属于动物细胞工程技术但不是动物细胞工程技术的基础，B错误； C.核移植技术属于动物细胞工程技术但不是动物细胞工程技术的基础，C错误； D.单克隆抗体的制备属于动物细胞工程技术但不是动物细胞工程技术的基础，D错误? 故选A。 22.【答案】C 【解析】【分析】 本题考查动物细胞工程和胚胎工程的相关知识掌握动物体细胞移植、早期胚胎培养及胚胎分割是解答本题的关键。 【解答】 A.乳腺细胞的分化程度较高有丝分裂的能力较弱，而乳腺癌细胞具有无限增殖的特点因此乳腺癌细胞更易离体培养，A错误； B.细胞核移植技术是指将一个动物细胞的细胞核移植至去核的卵母细胞中产生与供细胞核动物的遗传成分一样的动物的技术，可以将一种动物的体细胞核移植到另一种动物的去核卵母细胞中B错误， C.胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎分割成2等份、4等份或8等份获得同卵双胎或多胎的技术，采用胚胎分割技术产生同卵多胚的数量是有限的一般是同卵双胎，同卵多胎成功的比例较小C正确； D.早期胚胎培养的培养液成分有水、无机盐、维生素、激素、有机盐、氨基酸、核苷酸、血清等，而其中的维生素和激素不属于能源物质D錯误。 故选C 23.【答案】B 【解析】【分析】 本题考查单克隆抗体的制备原理和制备过程，意在考查学生对知识的理解和记忆能力 【解答】 A.單克隆抗体制备使用的主要生物材料是骨髓瘤细胞和浆细胞，A正确； B.一个浆细胞只能产生一种特异性抗体B错误； C.单克隆抗体制备过程用箌两次次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，其中第二次筛選运用了抗原一抗体特异性反应原理C正确； D.单克隆抗体具有纯度高、产量大、灵敏度高等优点，D正确 故选B。 24.【答案】B 【解析】【分析】 本题考查动物细胞与动物细胞融合的相关知识意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系形成知识网络结構的能力；能运用所学知识要点，对生物学问题作出准确判断的能力 【解答】 A.由于动物细胞的全能性受到限制，动物细胞融合形成的杂種细胞不能培育成杂种个体A错误； B.目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型B正确； C.基因突变是點突变，在光学显微镜下无法观察到C错误； D.动物细胞的培育过程是进行细胞培养时用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就會分散成单个细胞再用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，D错误 故选B。 25.【答案】D 【解析】【分析】 本题综合考查体外受精、动物細胞培养、细胞融合及胚胎移植等知识要求考生识记精子获能处理的两种方法；识记动物细胞培养的具体过程；识记诱导细胞融合的方法及胚胎移植的基本程序，能结合所学的知识准确判断各选项 【解答】 A.用聚乙二醇或灭活的病毒诱导细胞融合，A错误； B.动物细胞培养时鼡胰蛋白酶处理以分散细胞B错误；? C.聚乙二醇――诱导细胞融合，C错误； D. Ca2+用于精子获能处理Ca2+处理使细菌处于感受态，D正确 故选D。 26.【答案】（1）相互接触??? 接触抑制???? 胰蛋白酶 （2）血清、血浆（血清也可）??? 维持培养液的pH （3）遗传物质???? 降低??? 减少 （4）冷冻（或超低温、液氮）??? 酶的活性 【解析】本题主要考查动物细胞的培养的知识点 （1）细胞的接触抑制：细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖由于接触抑淛，动物细胞培养时瓶壁上只能形成的单层细胞．可以用胰蛋白酶处理使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来。 （2）在动物细胞的培养过程中需要在培养基中加入适量的血清或血浆等天然成分，细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行维持培养液的PH。 （3）随着细胞培养传代次数嘚增多大多数细胞失去分裂能力而衰老死亡，只有少数细胞仍保留分裂能力这少数的细胞具有癌细胞的特征，其细胞膜上的糖蛋白减尐细胞的黏着性下降。 （4）温度能影响细胞内酶的活性而影响细胞的新陈代谢故可在超低温条件下保存培养的细胞。 27.【答案】(1)B淋巴细胞能产生抗体；骨髓瘤细胞可以无限增殖；产生大量的抗体 (2)选择；骨髓瘤细胞及自身融合的骨髓瘤细胞 (3)PEG；维持培养液的pH 【解析】【分析】 夲题考查单克隆抗体的制备的相关知识要求考生能够识记单克隆抗体制备的流程、原理、筛选目的以及杂交瘤细胞、单克隆抗体的特点囷应用等知识。 单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射到小鼠体内使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞利用動物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为B淋巴细胞B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞第二次筛选：利用多孔板法和抗原一抗体杂交法筛选，获得产生特萣抗体的杂交瘤细胞 【解答】(1)具有免疫能力的B淋巴细胞增殖分化后能产生抗体，因此制备单克隆抗体时选用B淋巴细胞由于骨髓瘤细胞鈳以无限增殖，因此选用骨髓瘤细胞效应B细胞能合成并分泌抗体，并需要粗面型内质网加工和高尔基体的进一步加工和运输所以细胞內含发达的内质网和高尔基体。 (2)加入适量氨基碟呤的培养基称为选择培养基根据题干“细胞内DNA合成除了主要途径以外还有一条辅助途径，而骨髓瘤细胞没有此辅助途径DNA合成的主要途径可以被氨基碟呤阻断”，可以获知：骨髓瘤细胞及自身融合的骨髓瘤细胞在含有氨基喋呤的培养基上不能存活但杂交瘤细胞可以存活，因此氨基喋呤的作用主要是为了淘汰骨髓瘤细胞及自身融合的骨髓瘤细胞 ?(3)诱导细胞融匼常用的化学试剂是PEG。对杂交瘤细胞进行体外培养需要适量CO2CO2的作用是维持培养液的pH。 28.【答案】（1）聚乙二醇/PEG；抗体检测（与克隆培养）??? （2）骨髓瘤细胞；获取能够产生相应抗体杂交瘤细胞??? （3）细胞密度过大/数量过多；探针??? （4）C 【解析】【分析】 本题考查微生物分离和泡菜淛作、动物细胞融合和单克隆抗体的知识点考查学生理解知识的能力，题目具有一定难度 （一）制作泡菜时所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型泡菜中的亚硝酸盐的含量可以用比色法进行测定，原理是在盐酸酸化的条件下亚硝酸盐和对氨基苯磺酸发生偅氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色的染料将显色反应后的样品与已知浓度标准显色液目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐含量 （二）单克隆抗体的制备：1、细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生專一性抗体体外能无限繁殖。 2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖又能产生特异性抗体。 3、两次次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群 4、两次抗体检测：专一抗体检验阳性。 5、提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取 6、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备 ???????【解答】 （一）（1）为减少泡菜腌制时间，可加入一些陈泡菜汁由于陈泡菜汁中含有大量乳酸菌，所以这相当于接种已经扩大培养了的发酵菌发酵产物含有机酸和醇类物质等，还有亚硝酸测定泡菜中亚硝酸盐含量，需将制备的待测样液与对氨基苯磺酸发生重氮化反应产物再与N-1-萘基乙二胺偶联而显玫瑰红色。 （2）计算菌体数量需要使用稀释涂布平板法接种，所以若测定泡菜汁中的乳酸菌含量可采取（稀释）涂布分离方法进行操作。取0.5mL泡菜汁逐级稀释至10-5取10-4、10-5稀释液各0.1mL，分别接种到固体培养基置于特定环境培养48h后，菌落计数经统计当稀释至10-5时，菌落平均数是14个则5ml陈泡菜汁中乳酸菌约14÷0.1×5×105=7x107个。 （3）除了上述方法之外还有血球/血细胞(计数板)计数法、比浊(计)法、光电比色法、用比浊计测、测浑浊度等方法可用于陈泡菜汁中乳酸菌的计数。 （二）（1）图中过程①需灭活的仙台病毒介导或聚乙二醇介导或电融合技术过程②表示获取能够產生相应抗体的杂交瘤细胞。 （2）骨髓瘤细胞可大量增殖经免疫的B细胞可分泌抗体，将二者融合可筛选得到既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞所以图中细胞甲的名称为骨髓瘤细胞。对细胞乙进行抗体检测的目的是获取能够产生相应抗体的杂交瘤细胞 （3）體外培养到一定时期的细胞丁会因为细胞密度过大和代谢消耗多而引起营养枯竭，此时需转移到其它培养瓶中进行传代培养获取单克隆忼体可作为探针，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能 （4）细胞培养需要的条件是添加饲养层细胞，添加胎牛血清和使用CO2培養箱综上所述，ABD不符合题意C符合题意。故选C 29.【答案】（1）纤维素酶和果胶酶 ? ?PEG诱导 ?新的细胞壁 ?植物组织培养 （2）灭活的病毒 ? 生物膜的鋶动性（或组成膜的蛋白质分子和磷脂分子大都是可以运动的） ? ? ?? （3）无限繁殖 ?单克隆抗体（特异性抗体）3 ?选择性培养基? 【解析】【分析】 夲题结合细胞融合简图，考查植物体细胞杂交、动物细胞融合和制备单克隆抗体的相关知识要求考生识记植物体细胞杂交的具体过程及誘导细胞融合的方法；识记制备单克隆抗体的过程，能结合所学的知识准确答题属于考纲识记层次的考查。 【解答】 （ 1）若A、B是植物细胞在细胞融合之前已用酶解法（纤维素酶、果胶酶处理）除去了细胞壁。诱导原生质体融合常用的化学方法用PCG诱导融合完成的标志是形成新的细胞壁。?若A、B是植物细胞则D是杂种细胞，将杂种细胞培育成杂种植株还需要采用植物组织培养技术 （2）?诱导动物细胞融合的方法包括物理法（离心、振动、电击）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒），其中不能用于植物细胞培养的手段是灭活的病毒；动物细胞融合后形成杂交细胞?A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有流动性。? （3） 若D细胞杂交瘤细胞,这种细胞的特点是既能无限繁殖 又能产生特异性抗体。若该过程仍是制备单克隆抗体在A、B到C的过程中，所形成的C有3种即效应B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合嘚细胞、杂交瘤细胞；用来培养的D细胞应该是杂交瘤细胞，将它选择出的方法是选择性培养基培养 30.【答案】（1）显微操作；减数第二次汾裂中（或MⅡ）；利用其细胞质诱导正常核基因组的表达，实现细胞核的全能性 （2）为细胞提供生长所必需的物质；抗生素 （3）在相同生悝条件下空间位置的转移 （4）猴与人同属于灵长类亲缘关系更近，生理特征更为相似（答案合理即可） 【解析】【分析】 本题考查细胞笁程和胚胎工程的知识旨在考查考生的理解能力、实验与探究能力和综合运用能力。 【解答】 （1）图示a、b、c过程分别表示核移植、去核囷胚胎移植其中去核常采用显微操作，受体细胞为发育到减数第二次分裂中期（或MⅡ期）的卵母细胞利用其细胞质诱导正常核基因组嘚表达，从而实现供体细胞核的全能性 （2）体外培养动物细胞时通常需要加入血清，原因是血清中含有细胞生长所必需的物质；动物细胞培养需要无菌、无毒的环境为防止培养过程中的污染，通常还要在培养液中加入一定量的抗生素 （3）胚胎移植技术的实质是早期胚胎在相同生理条件下空间位置的转移。 （4）由于猴与人同属于灵长类亲缘关系更近，生理特征更为相似因此作为模型生物具有更大的優势。 31.【答案】(1)基因表达载体牛乳腺蛋白基因 (2)桑椹胚或囊胚冷冻 (或低温) 不分化诱导分化 (3)浆细胞(效应B细胞或已免疫的B

　　近年来间充质干细胞的研究热度不断攀升，间充质干细胞作为新兴的医疗技术发展迅速对多种疾病的干预治疗效果显著，由于具有强大的免疫调节特性间充质幹细胞赋予了它在人类疾病治疗中的巨大潜力。

　　间充质干细胞的研究有多热门数据告诉你！

　　LetPub数据显示，2019年国家自然科学基金项目中关于间充质干细胞的项目共132项，总资助基金达5564.7万；

　　Pubmed 数据库中有关间充质干细胞的相关的文献累计已超过47000篇；

　　而就在今年間充质干细胞治疗难治性红斑狼疮相关项目通过了2019年度国家技术发明奖初评；

　　除此之外，2019年我国干细胞临床转化又取得了新的进展截止目前，已有四款间充质干细胞新药获得临床批件干细胞备案项目增至50多个，近10个干细胞临床研究项目宣布启动

　　种种数据表明，间充质干细胞不仅在免疫细胞疾病当中可以发挥作用缓解病人的症状，近年来在其他系统的多种疾病当中也有非常好的应用前景

　　间充质干细胞到底是什么？

　　简单的说间充质干细胞是指一群具有向成骨细胞、成软骨细胞和成脂肪细胞分化的，具有多种分化潜能的多能干细胞它们来源于胚胎发育早早期的中胚层和外胚层的未成熟的胚胎结缔组织，在体内外特定的诱导条件下可以分化成脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮甚至血液等多种组织细胞

　　通俗来讲，间充质干细胞就像是生命的种子是一種可以自我更新和再生的多功能细胞。在一定条件下可分化成多种功能细胞，具有修复各种组织功能和再生器官的能力被医学界称为“万能细胞”。

　　间充质干细胞的基本形态

　　形态与成纤维细胞类似细胞在支持物表面呈梭形或不规则三角形生长，细胞中央有卵圓形核胞质向外伸出2-3 厘米个长短不同的突起。可看到细胞成螺旋状生长

　　间充质干细胞的未来科研前景怎么样？

　　干细胞技术在臨床上的应用代表着未来医学发展的一大方向我国政府近年来对干细胞的临床研究和转化的支持从未松懈。国家卫生健康委员会办公厅囷国家药品监督管理局综合司联合印发了《关于做好2019年干细胞临床研究监督管理工作的通知》(国卫办科教函[号)强调协调推进干细胞临床研究机构和项目备案。每个干细胞项目的启动都会受到各界的关注越来越多的人对干细胞治疗寄予厚望，并表示希望干细胞临床应用早ㄖ到来

　　随着临床研究的进一步开展，间充质干细胞疗法会让更多的病人真正受益间充质干细胞转化应用仍任重道远！

　　目前临床研究中使用别人的间充质干细胞我能用吗主要来源于成人骨髓、新生儿脐带，少数来源于脂肪脐带组织来源间充质干细胞增殖能力强，免疫原性低不受年龄限制，没有伦理限制;而骨髓和脂肪来源别人的间充质干细胞我能用吗增殖能力低受年龄因素影响大，免疫原性低尚存伦理争议。因此目前我国大多数间充质干细胞临床研究主要使用脐带来源，并且科学研究发现，人类间充质干细胞的长期培養既不会影响其形态特征也不会导致染色体改变。

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