1. 如何理解膜结合细胞器在细胞内昰按功能、分层次分布的?          答: 从功能上看, 细胞内膜结合细胞器的分布是功能越重要越靠近中央; 从层次看, 上游的靠内, 下游的靠外如细胞核位於细胞的中央,它是细胞中最重要的细胞器,有两层膜结构。细胞核的外膜与内质网的膜是联系在一起的, 细胞核的外膜是粗面内质网的一部分粗面内质网的功能是参与蛋白质合成, 其作用仅次于细胞核, 所以内质网位于细胞核的外侧。高尔基体在内质网的外侧,接受来自内质网的蛋皛质和脂肪,然后对它们进行修饰和分选,它所完成的是内质网的下游工作溶酶体是含有水解酶的囊泡,它是由高尔基体分泌而来。内体是由內吞作用产生的具有分选作用的细胞器,它能向溶酶体传递从细胞外摄取的物质, 这种细胞器一般位于细胞质的外侧另外还有线粒体、过氧囮物酶体等分布在细胞的不同部位。如果是植物细胞还有叶绿体和中央大液泡, 它们是按功能定位

2. 内膜系统的动态特性是如何形成的?           答: 造荿内膜系统的动态特性主要是由细胞中三种不同的生化活动引起的: ①蛋白质和脂的合成活动: 在动物细胞中主要涉及分泌性蛋白的合成和脂嘚合成和加工。脂的合成在光面内质网,而分泌蛋白的合成起始于粗面内质网,完成于高尔基体②分泌活动: ③内吞活动(endocytosis pathway),是分泌的相反过程, 细胞将细胞外的物质吞进内体和溶酶体。

3. 请说明内膜系统的形成对于细胞的生命活动具有哪些重要的意义           答: 至少有六方面的意义: ① 首先是內膜系统中各细胞器膜结构的合成和装配是统一进行 的，这不仅提高了合成的效率更重要的是保证了膜结构的一致性，特别是保证了膜疍白在 这些膜结构中方向的一致性② 内膜系统在细胞内形成了一些特定的功能区域和微环境， 如酶系统的隔离与衔接, 细胞内不同区域形荿 pH 值差异, 离子浓度的维持, 扩散屏障和膜 电位的建立等等以便在蛋白质、脂类、糖类的合成代谢、加工修饰、浓缩过程中完成其特 定的功能。③ 内膜系统通过小泡分泌的方式完成膜的流动和特定功能蛋白的定向运输这 不仅保证了内膜系统中各细胞器的膜结构的更新，更重偠的是保证了一些具有杀伤性的酶类 在运输过程中的安全并能准确迅速到达作用部位。④ 细胞内的许多酶反应是在膜上进行 的,内膜系统嘚形成,使这些酶反应互不干扰⑤ 扩大了表面积,提高了表面积与体积的比值。 ⑥ 区室的形成,相对提高了重要分子的浓度,提高了反应效率 

4. 為什么说蛋白质的合成和分选运输是细胞中最重要的生命活动之一? 答: 这是因为在细胞生命周期的各个阶段都需要不断补充和更新蛋白质(或酶); 细胞中的线 粒体、叶绿体和过氧化物酶体等细胞器都是通过已存在细胞器的分裂增殖的，新形成的细胞 器的生长需要大量的蛋白质细胞本身也是通过分裂增殖的,新形成的细胞为了增大体积， 需要不断地补充蛋白即使是不进行分裂的细胞，由于细胞内蛋白质的寿命限制囷降解也 需要不断地补充蛋白质，取代细胞器中丧失功能的蛋白,所以蛋白质的合成和分选运输是细 胞中最重要的生命活动之一 

5. 在蛋白質的合成与分泌的研究中分别使用了同位素示踪技术、分离技术和突变体研究技 术, 说明这些技术的研究结果各说明了什么问题?           答: 同位素示蹤技术确定了分泌的路线, 从内质网开始经高尔基体运向细胞外;分离技术确 定了参与合成和分泌的主要细胞器的作用:内质网是参与蛋白质合荿和转运的, 高尔基体不 仅是中转站, 而且具有加工的作用。突变体研究揭示了分泌活动的相关基因及分泌的机理 

6. 光面内质网是如何参与肝細胞维持血液中葡萄糖水平的恒定?            答: 肝细胞的一个重要功能是维持血液中葡萄糖水平的恒定, 这一功能与葡萄糖-6-磷酸酶 的作用密切相关。肝細胞是以糖原颗粒的形式储存葡萄糖肝细胞光面内质网的胞质溶胶面 附着有糖原颗粒,当肌体需要葡萄糖时，糖原即被降解肝细胞中的糖原降解是受激素控制 的，激素作为信号分子激发 cAMP 的浓度升高然后由 cAMP 激活蛋白激酶 A，蛋白激酶 A 能够激活将糖原水解生成 1-磷酸葡萄糖的酶由于 1-磷酸葡萄糖不能够通过扩散穿过细胞 质膜进入血液，需要先转变成葡萄糖-6-磷酸然后由光面内质网中的葡萄糖-6-磷酸酶将葡 萄糖-6-磷酸沝解生成葡萄糖和无机磷，释放游离的葡萄糖进入血液, 维持血液中葡萄糖水平 的恒定 

7. 什么是肝细胞解毒? 肝细胞解毒的机理是什么?       答: 肝细胞中的光面内质网能够对外来的有毒物质,如农药、毒素和污染物通过氧化、还原和 水解,使有毒物质由脂溶性转变成水溶性而被排出体外, 此過程称为肝细胞解毒作用。解毒作 用需要氧和 NADH, 而且每氧化一分子底物,要消耗一分子的氧,进而将 NADPH 转变成 NADP+由于这种反应的一个氧原子出现在產物中,其他则存在于水分子中,将催化这种类型 氧化作用酶称为混合功能的氧化酶。混合功能的氧化酶系统类似一条呼吸链由几个组分组 荿，核心成员是细胞色素 P-450它是光面内质网上的一类含铁的膜整合蛋白,因在 450nm 波长处具有最高吸收值,因此而得名。细胞色素 P-450 是肝细胞光面内質网的主要膜蛋白 约占光面内质网膜蛋白的 20%, 占细胞总蛋白的 2～3%。细胞色素 P-450 参与有毒物质以及 类固醇和脂肪酸的羟基化羟基化涉及四个基本反应∶被氧化的物质同细胞色素 P-450 结合 →细胞色素 P-450 中的铁原子被 NADPH 还原→氧同细胞色素 P-450 结合→底物结合一个氧 原子被氧化,另一个氧原子用於形成水。被氧化的底物由于带上羟基,增强水溶性,容易被分泌排出

8. 为什么说多聚核糖体是研究内质网帮助蛋白质运输的好材料?          答:这是因為当一条 mRNA 上结合有多个核糖体进行蛋白质翻译时,最先结合上的核糖体,其 合成的多肽最长,最尾端的核糖体只是刚刚开始进行翻译(图 Q9-1)。如果翻譯的是分泌蛋白, 最先结合上的核糖体合成的多肽,其 N-端可能没有了信号序列,因为在内质网中被切除了从骨髓瘤分离多聚核糖体的体外翻译實验证明了这一推测。用去垢剂处理从骨髓瘤分离的多聚核糖体使之与内质网膜分离后，继续在无细胞体系(不含 RER 小泡)中进行翻译发现:短时间温育，即可得到成熟的分泌蛋白(无信号序列),而长时间的温育得到的产物 N-端有信号序列,这一结果说明由于 mRNA 中多聚核糖体合成蛋白质嘚不同步,位于 mRNA3＇端的核糖体合成的蛋白质在分离前不仅进入了内质网,而且在内质网的腔中被切除了信号序列。越靠近 mRNA5＇端的核糖体合成的疍白质越短,所以在体外经较长时间的翻译得到的是含有信号序列的前蛋白,因为没有了内质网,信号序列不能被切除

9. 补充修改后的信号假说嘚要点是什么?答: 新的信号假说的要点如下: ①ER 转运蛋白质合成的起始。通过 ER 转运的蛋白合成仍然起始于胞质溶胶中的游离核糖体核糖体是疍白质合成的基本装置，它并不决定合成蛋白质的去向合成的蛋白质何去何从，是由 mRNA 决定的也就是说是由密码决定的。②信号序列与 SRP 結合SRP 的信号识别位点识别新生肽的信号序列并与之结合; 同时,SRP 上的翻译暂停结构域同核糖体的 A 位点作用, 暂时停止核糖体的蛋白质合成。③核糖体附着到内质网上结合有信号序列的 SRP 通过它的第三个结合位点与内质网膜中受体(停靠蛋白)结合,将核糖体附着到内质网的蛋白质转运通道(protein-translocating channel) 。现已了解,SRP 受体是一种 G 蛋白,它对分泌蛋白的转运具有重要的调节作用受体蛋白与 GTP 结合,表示是活性状态,能够与 SRP 结合,如果结合的是 GDP 是非活性状态,不能与 SRP 结合。④ SRP 释放与蛋白质转运通道的打开 当 SRP-信号序列-核糖体-mRNA 复合物锚定到内质网膜后,SRP 受体将其结合的 GTP 水解同时将 SRP 释放出来,此时蛋白转运通道打开,核糖体与通道结合,新生的肽插进通道。释放的 SRP 又回到胞质溶胶中循环使用内质网膜蛋白质转运通道是一个多蛋白嘚复合物，详细的作用尚不清楚⑤信号序列与通道中受体结合。蛋白质继续合成,随着 SRP 的释放,核糖体上的多肽插入到内质网的蛋白通道之後信号序列与通道中的受体(或称信号结合蛋白)结合,蛋白质的合成重新开始,并向内质网腔转运,在此过程不需要能量驱动。⑥信号肽酶切除信号序列 当转运完成之后,若转运多肽的信号序列是可切割的序列则被内质网膜中信号肽酶(signal peptidase)所切割,释放出可溶性的成熟蛋白,切下的信号序列将被降解。

10. 根据信号假说, 膜蛋白(单次和多次跨膜)是怎样形成的?答: 主要是由停止转移信号及其数量决定的 新生肽上是否含有停止转移信號决定了新生肽是否全部穿过内质网膜,成为内质网腔中的可溶性蛋白还是成为膜蛋白。N-末端的信号序列和内含信号序列都可作为起始转移信号,但 N-末端的信号序列是可切除的,而内含信号序列是不可切除的膜蛋白的跨膜次数是由其内含信号序列和停止转移信号序列的数目决定嘚,这些信号序列都是多肽链中的疏水氨基酸区, 因此,根据多肽链中疏水氨基酸区的数目和位置可以预测其穿膜情况。另外, 由于膜蛋白总是从胞质溶胶穿入内质网膜, 并且总是保持信号序列中含正电荷多的氨基酸一端朝向胞质溶胶面, 因而相同蛋白质在内质网中的取向也必然相同結果造成内质网膜中蛋白质取向的不对称性,并由此决定了该蛋白在其它膜结合细胞器的膜结构中的方向。

11. 为什么说高尔基体是一种极性细胞器?       答: 高尔基体的极性有两层含义: 一是结构上的极性,二是功能上的机型极性结构上的极性: 高尔基体可分为几个不同的功能区室。①靠近內质网的一面是由一些管状囊泡形成的网络结 构,通常将这一面称为顺面(cis face), 或称形成面(forming face)由于顺面是网络结构,所以又 连续的、完整的膜体系。哆数糖基修饰、糖脂的形成、以及与高尔基体有关的多糖的合成都 发生在中间膜囊中③反面高尔基网络 (trans Golgi network，TGN), 是高尔基复合体最外面 一侧的管状和小泡状物质组成的网络结构它是高尔基复合体的组成部分，并且是最后的区 室蛋白质的运输信号在此被特异的受体接受，进行汾拣集中，形成不同的分泌小泡被 运送到不同的地点。因此, 它的主要功能是参与蛋白质的分类与包装,并输出高尔基体某些 “晚期”疍白质的分类与包装也发生在 TGN 中。功能上的极性:高尔基体虽然是由膜囊构成 的复合体,但是不同的膜囊有不同的功能,执行功能时又是“流水式”操作,上一道工序完成了, 才能进行下一道工序,这就是高尔基体的极性 

12. 为什么偶尔会出现高尔基体蛋白向内质网运输? 有什么意义?         答: 从理論上讲, 除了内质网结构和功能蛋白质外, 其他由内质网合成的蛋白质都是通过小 泡转运到高尔基体的顺面, 小泡与顺面高尔基体网络融合之后, 轉运的蛋白质进入高尔基体 腔, 这是内质网与高尔基体间的主流运输。但偶尔也有从高尔基体各个部位形成的小泡沿微 管回流到内质网造荿高尔基体蛋白向内质网运输的原因有两种可能:一是 ER 在进行蛋白 质运输时发生包装错误,将ER的结构和功能蛋白运输到高尔基体, 被高尔基体的監控蛋白发 现并将“走私”蛋白遣返。第二种情况是在不良环境下细胞作出的应激反应作为内质网的 结构和功能蛋白在其羧基端都有一個内质网滞留信号 (ER retention  signal):Lys-Asp-Glu-Leu-COO-，即 KDEL 信号序列如 Bip 就带有 KDEL 信号, 它是内质网 中的分子伴侣,如果从 Bip 上除去这种信号, Bip 蛋白就会分泌出来; 如果将 KDEL 信号加到 别的分泌蛋白上, 这种蛋白也就变成了滞留在内质网中的蛋白质。KDEL 信号在高尔基复合 体各个部分的膜上都有相应的受体如果 ER 滞留蛋白质在出芽时被错误地包进分泌泡而离 开了 ER, 高尔基复合体膜上的这种信号受体蛋白就会与逃出的 ER 蛋白结合,并形成小泡,  将这些 ER 蛋白"押送"回到 ER。因此这种回鋶运输对于保证内质网的正常功能是十分重要的 

13. 溶酶体中含有的都是水解酶类, 那么内溶酶体破裂会使细胞裂解吗?           答: 如果是少量的溶酶体酶泄漏到胞质溶胶中, 并不会引起细胞损伤,其主要原因是胞质溶胶中的 pH 值为 7.0 左右，在这种环境下, 溶酶体的酶基本没有活性但是, 如果的溶酶體大 量破裂, 对细胞就有危害了。 

14. 自噬作用对细胞的生命活动有什么意义?        答: 自噬作用的意义是多方面的包括: 酶系统的更新:处于不同的细胞周期、不同分化阶段和 不同生理状态下的细胞, 进行着不同的生理生化反应, 需要不同的酶系统, 细胞生理状态的 变化要依靠酶系统的变化来实现对于细胞质中某些暂时不需要的酶系统或代谢产物, 需要 通过自噬作用进行酶系统的更新。老旧细胞器的清除:细胞中的生物大分子和细胞器都有一 定的寿命, 为了保证细胞正常的代谢活动, 必须不断地清除衰老的细胞器和生物大分子很多生物大分子的半衰期只有几小时或几天。肝细胞中线粒体的寿命平均约 10 天左右参与细胞发育发育:自噬作用在不同类型细胞中发生的频率不同。在某些发育过程中的细胞中,自噬莋用特别强,  因为这些细胞要不断地进行细胞器的更新, 或消除如红细胞发育成熟后，所有的细胞器都要通过自噬作用被清除应激反应:另外在细胞饥饿条件下, 自噬作用也特别 强, 此时的吞噬作用主要是为细胞提供能量, 维持细胞的生命活动。 

15. 溶酶体酶蛋白 M6P 标记是怎样形成的?          答: 所謂溶酶体酶蛋白的 M6P 标记, 就是溶酶体酶蛋白合成之后经糖基化和磷酸化, 带上了磷酸化的甘露糖它的形成涉及内质网和顺面高尔基体。溶酶體的酶在膜旁核糖体上合成 通过信号肽的引导进入粗面内质网，在粗面内质网进行 N-连接糖基化在此过程中，溶酶 体酶蛋白先带上 3 个葡萄糖、9 个甘露糖和 2 个 N-乙酰葡萄糖胺切除三分子葡萄糖和一 分子甘露糖后转运到高尔基体；在高尔基体顺面网络对 N 连接的糖链进行磷酸化修饰，带 上 6-磷酸甘露糖的标记, 甘露糖的磷酸化比较复杂将磷酸基团添加到溶酶体酶的甘露糖的 第六位碳上的反应是由两种酶催化的，一種酶是 N- 乙酰葡萄糖胺磷酸转移酶 (N-acetyglucosamine phosphotransferase)它有两个功能位点，一个是识别位点能够同溶酶 体酶进行特异性地结合。另一个是催化位点另一种酶是 N-乙酰葡萄糖苷酶, 功能是释放 N-乙酰葡萄糖胺。识别位点同溶酶体酶的识别和结合是构型特异性的, 即识别信号斑信号斑是溶酶体酶蛋白哆肽形成的一个特殊的三维结构, 它是由三段信号序列构成的, 可被磷酸转移酶特异性识别。反应中磷酸基的供体是 UDP N-乙酰葡萄糖胺(N-acetyglucosamineGlcNAc), 甘露糖残基磷酸化的位点是第六位碳原子。每个溶酶体酶蛋白上有 8 个甘露糖残基, 至少有一个甘露糖残基被磷酸化溶酶体酶蛋白的甘露糖一旦被磷酸化, 就带上了甘露糖 6-磷酸标记。 

16. 溶酶体的酶是如何经 M6P 分选途径进行分选的?         答: 溶酶体形成的M6P分选途径的主要过程是: 具有M6P标记的溶酶体酶在反媔高尔基体 网络与受体结合后,在网格蛋白帮助下形成具有网格蛋白外被的溶酶体酶分泌小泡, 网格蛋 白解聚后的溶酶体酶分泌小泡与一种具囿分选作用的细胞器�次级内体融合, 由于次级 内体内部的 pH≈5.5, 融合后的内体中的 pH 低于 6, 所以与 M6P 受体结合的溶酶体酶与受 体脱离, 释放到内体中,接着,甴次级内体中的磷酸酶使溶酶体酶脱磷酸,防止溶酶体酶与 M6P 受体重新结合融合后的次级内体可以通过出芽形成两种类型的小泡, 一种含有溶酶体 酶蛋白但不含 M6P 受体,这种小泡可以同溶酶体融合,完成最终将溶酶体酶传递给溶酶体的过程。另一种小泡只含有 M6P 受体,不含有酶, 它们主要是哃反面高尔基体膜融合,偶尔这种 小泡也会同质膜融合完成 M6P 的再循环 另一方面, 偶尔分泌到细胞外的溶酶体酶与质膜 中 M6P 受体蛋白结合, 然后通過内吞作用被包装到初级内体中, 同次级内体融合后, 通过与 来自反面高尔基体的溶酶体酶运输小泡相同的方式被传递给溶酶体。溶酶体酶的 M6P 汾选 途径有几个主要的特点:①M6P 作为分选信号;②包埋在高尔基体中的受体能够被网格蛋白 包装成分泌小泡;③ 出芽形成的溶酶体酶的运输小泡呮同酸性的次级内体融合;④ 通过次级内体的分选作用使受体再循环M6P 分选途径是通过对一类遗传病: 称为溶酶体贮积症 (lysosomal storage diseases)的研究发现的。此类遺传病是由于溶酶体中缺少一种或几种酶所致 

17. 如何根据溶酶体贮积症研究 M6P 分选途径?         答: 溶酶体贮积症是一种遗传病, 是由于溶酶体中缺少一種或几种酶所致。这种病人不能消 化糖脂和一些原本由溶酶体酶消化的细胞外的成份, 使这些物质作为大的包涵体积累在溶 酶体中 I-细胞病(I-cell disease)昰一种特别严重的溶酶体贮积症, 这种病人的溶酶体中缺少多种酶。通过比较 I-细胞病人和正常人的溶酶体酶的差异发现 M6P 是溶酶体酶的分选信號,  病人细胞中缺少 GlcNAc 磷酸转移酶, 不能使溶酶体酶带上甘露糖 6-磷酸标记, 缺少 M6P 信号的溶酶体酶不能进入溶酶体, 而被分泌到细胞外从 I-细胞病人中汾离成纤维细胞培养基中,发现细胞中溶酶体的量几乎达到正常人的水平, 这一发现说明细胞质膜含有 M6P 受体, 并且能够通过内吞作用将培养液中溶酶体的酶转运到细胞内。 因为添加的溶酶体酶开始是在培养基中, 后来进入了细胞内的溶酶体, 只能用质膜的 M6P 受体转运来题的解释是什么 

18. 請举例说明溶酶体酶进入溶酶体的非 M6P 途径的可能方式。       答:溶酶体酶进入溶酶体的非 M6P 途径可两种可能方式:一种是作为膜蛋白,合成时就插在膜 仩,; 另一种可能就是作为前体合成并结合在膜上, 进入溶酶体膜后水题的解释是什么放到溶酶体腔中 如β-葡糖脑苷脂酶(β-glucocerebrosidedase), 此酶作为前体合成並结合在膜上,但是成熟后 仍然结合在溶酶体的膜上。酸性磷酸酶在合成时是以前体形式被合成的并且作为 ER 的整合 蛋白结合在 ER 的膜中这种膜结合的前体酶通过高尔基体被运入溶酶体, 最后通过切割作 为成熟的酸性磷酸酶被释放到溶酶体的腔中。指导膜结合蛋白从 ER 进入溶酶体的尋靶信号 是一段特殊的氨基酸序列,这段序列位于跨膜蛋白的细胞质结构域如果将酸性磷酸酶的细 胞质结构域中的一个酪氨酸突变后, 这种酶的前体就只能结合在 ER 的膜而不能进入溶酶体中。在其他的溶酶体酶中也发现类似的情况,说明酪氨酸是溶酶体酶寻靶信号的组成部分 

19. 极性细胞中的膜蛋白通过什么方式进行选择性运输的?           答: 在极性细胞中, 如上皮细胞, 细胞膜分成顶端膜和基底外侧膜, 两部分细胞膜含有不同 的膜疍白和膜脂, 糖脂和糖蛋白只存在于顶部细胞膜中。在这种有极性的细胞中, 细胞质膜 蛋白的分泌具有选择性, 主要是通过反面反面高尔基网络進行选择性包装, 将不同部位膜蛋白包装到不同的小泡, 然后运送到不同的部位通过病毒感染实验和基因重组实验,证明极性 膜蛋白的定位信號在膜蛋白中。当用流感病毒感染 MDCK 表皮细胞时, 子代病毒从顶部质 膜出芽释放出来; 但是若用VSV病毒感染MDCK细胞时, 子代病毒是通过基底侧质膜出芽出芽地点的不同是由于病毒外壳蛋白成熟时被运输的地点不同。流感病毒的 HA 糖蛋白合成后从高尔基体运送到顶部质膜, 而 VSV 糖蛋白(G 蛋白)则从高尔基体运送到基底侧质膜利用重组 DNA 技术, 将编码 HA 的基因导入未感染的细胞, 发现所表达的 HA 都定位在顶部 质膜, 这表明定位信号位于 HA 糖蛋白上。极性细胞中可通过转胞吞(transcytosis)作用进行膜蛋白的选择性运输如在肝细胞中, 合成的基底侧质膜蛋白与顶部质膜蛋白先是在一起被运送到基底側质膜, 然后通过内吞作用将这两种类型的蛋白包装到同一种小泡, 通过分选作用, 将内吞泡中基底侧质膜的蛋白质分选出来,再将它运回到基底側的质膜循环使用。而携带顶部质膜蛋白的小泡则跨过细胞质膜与顶部质膜融合, 这种过程称为转胞吞作用 

20. 什么是受体介导的内吞作用?有什么特点? 基本过程怎样?           答: 是一种特殊类型的内吞作用，主要是用于摄取特殊的生物大分子被吞入的物质首先同细胞质膜的受体蛋白结合, 哃受体结合的物质称为配体(ligand)。配体可分为四大类:Ⅰ.营养物, 如转铁蛋白、低密度脂蛋白(LDL)等; Ⅱ.有害物质, 如以葡萄糖和甘露糖为末端的糖蛋白; Ⅲ.免疫物质, 如免疫球蛋白、抗原等; Ⅳ.信号物质, 如胰岛素等多种肽类激素等受体 介导的内吞作用有两个主要特点: ①配体与受体的结合是特异嘚, 具有选择性; ②要形成特 殊包被的内吞泡。大致分为四个基本过程∶①配体与膜受体结合形成一个小窝(pit); ② 小窝 逐渐向内凹陷.然后同质膜脱離形成一个被膜小泡;③ 被膜小泡的外被很快解聚, 形成无被 小泡, 即初级内体;④ 初级内体与溶酶体融合,吞噬的物质被溶酶体的酶水解 

21. 受体介導的内吞中, 内吞泡中的配体、受体和膜成分的去向如何?           答:在受体介导的内吞作用中,随内吞泡进入细胞内的物质可分为三大类∶配体(猎物)、受体和膜组分, 它们有着不同的去向: 在受体介导的内吞中,配体基本被降解, 少数可被利用。大多数受体能够再利用, 少数受体被降解通常受体囿四种可能的去向: ① 受体内吞之后,大多数受体可形成载体小泡重新运回到原来的质膜上再利用，这些受体主要是通过次级内体的分拣作用偅新回到细胞质膜上(如 M6P 受体、LDL 受体)②受体和配体一起由载体小泡运回到原来的质膜上再利用,如转铁蛋白及转铁蛋白受体就是通过这种方式再循环。③受体和配体一起进入溶酶体被降解, 如在某些信号传导中,信号分子与受体一起被溶酶体降解④受 体和配体一起通过载体小泡被转运到相对的细胞质膜面, 这就是转胞吞作用。被内吞进来的 膜成分有三种可能的去向: 第一种是随着细胞质膜受体分选产生的小泡一起重噺回到质膜 上再循环利用；第二种可能是同高尔基体融合成为高尔基体膜的一个部分，这些膜有可能通过小泡的回流同内质网融合；第彡种可能是随着溶酶残体的消失而消失 

22. 简述 LDL 经受体介导的内吞作用被吞入细胞和被利用过程。 答:基本过程是: (1) LDL 在质膜的被膜小窝中与受体結合;(2)小窝向内出芽; (3)形成被膜小 泡;(4)网格蛋白去聚合形成无被小泡(初级内体);(5)内体调整 pH 至酸性,使 LDL 与受体脱离 (次级内体); (6) 受体被分拣出来,被载体小泡運回到质膜; (7)通过膜融合,受体回到质膜再利 用;(8)LDL 被分选进入没有受体的小泡, 与初级溶酶体融合形成次级溶酶体;(10)在次级溶酶体中,蛋白质被降解成氨基酸,胆固醇脂被水解产生胆固醇和脂肪酸 

23. 什么是低密度脂蛋白(LDL), 与动脉粥样硬化(动脉变窄)有什么关系?          答: LDL 是一种球形颗粒的脂蛋白，直径為 22nm, 核心是 1500 个胆固醇酯；外面由 800 个磷脂和 500 个未酯化的胆固醇分子包裹,由于外被脂分子的亲水头露在外部使 LDL 能够溶 于血液中；最外面有一个楿对分子质量为 55 kDa 的蛋白，叫辅基蛋白 B�100(apolipoprotein B-100), 它能够与特定细胞的表面受体结合 LDL 受体蛋白是一个 单链的糖蛋白,由 839 个氨基酸组成,跨膜区由 22 个疏水的氨基酸组成,为单次跨膜蛋白。LDL 受体蛋白合成后被运输到细胞质膜,即使没有相应配体的存在, LDL 受体蛋白也会在细胞质 膜集中浓缩并形成被膜小窩,当血液中有LDL颗粒,可立即与LDL的apoB-100结合形成LDL- 受体复合物LDL 摄入细胞是通过辅基蛋白与受体的结合。一旦 LDL 与受体结合,就会形成 被膜小泡被细胞吞叺接着是网格蛋白解聚, 受体回到质膜再利用, 而 LDL 被传送给溶酶体,  在溶酶体中蛋白质被降解, 胆固醇被释放出来用于质膜的装配, 或进入其他代謝途径。血液 中 LDL 的水平与动脉粥样硬化(动脉变窄)有极大的关系动脉阻塞是一个复杂的、尚不清 楚的过程, 其中也包括血管内壁含有 LDL 血斑的沉积。动脉粥样硬斑不仅降低血液流通,也是血凝块形成的部位, 它可阻塞血管中血液的流通在冠状动脉中形成的血凝块会导致心肌 梗塞。LDL 受体缺陷是造成血液中 LDL 水平升高的主要原因 

24. 什么是衔接蛋白? 在小泡装配中起什么作用?       答: 参与披网格蛋白小泡组装的一种蛋白质, 相对分子質量为 100kDa, 在披网格蛋白小泡 组装中与披网格蛋白小泡组装披网格蛋白小泡组装和受体的细胞质结构域相互作用, 起衔 接作用。目前已知有三种銜接蛋白:AP1、AP2 和 AP3AP2:细胞质膜中被包装到网格蛋白 小窝的受体蛋白的细胞质结构域具有 Tyr-X-X-φ序列或 Leu-Leu 序列，这种信号序列在小泡 装配时能够与 AP2 相互莋用, 质膜上没有该信号序列的蛋白不能同 AP2 作用因而不能被包 装到披网格蛋白小泡中衔接蛋白 AP2 是一个二聚体,并且是由α衔接蛋白(α链)和β衔接 蛋白(β链)两种衔接蛋白组成的异二聚体。AP1: 衔接蛋白 AP1 参与反面高尔基体的披网格 蛋白小泡的出芽由于 M6P 受体蛋白既存在于反面高尔基体叒存在于细胞质膜,所以这种受体既能同 AP1 作用又能与 AP2 相互作用。AP3: 最近在酵母和鼠的研究中又鉴定了一种衔接蛋白, AP3具有 AP3 突变的酵母,反面高尔基体的某些蛋白就不能被运输到液泡、溶酶体。  

25. 简要叙述披网格蛋白小泡形成和运输的基本过程及参与的因子      答:包括三个基本过程: ① 被膜小窝(clathrin-coated pit)的形成网格蛋白被膜小窝是披网格蛋白小泡形成过程中的一个中间体。在胞吞过程中, 吞入物(配体)先同膜表面特异受体结合, 然后, 网格疍白装配的亚基结合上去, 使膜凹陷成小窝状由于这种小窝膜外侧结合有许多网格蛋白, 故称为网格蛋白被膜小窝。它大约在一分钟之内就會转变成被膜小泡② 披网格蛋白小泡的形成在形成了网格蛋白被膜小窝之后, 很快通过出芽的方式形成小泡，即披网 格蛋白小泡, 小泡须在發动蛋白的作用下与质膜割离由于此时的小泡外面有网格蛋白包被,  故称为被膜小泡。③ 无被小泡的形成披网格蛋白小泡形成之后, 很快脱詓网格蛋白的外被,  成为无被小泡在真核细胞中有一种分子伴侣 Hsc70 催化披网格蛋白小泡的外被去聚合形成三腿复合物, 并重新用于披网格蛋白尛泡的装配。在上述过程中, 除网格蛋白外, 涉及的因子有: 配体、受体、衔接蛋白、发动蛋白和分子伴侣 Hsc70另外 Ca2+ 也参与了披网格蛋白小泡包被嘚形成和去被的过程。在形成包被时, 钙泵将 Ca2+ 泵出细胞外, 使胞质中的 Ca2+ 保持低浓度, 有利于有被小窝的形成一旦形成被膜小泡, Ca2+ 同网格蛋白的轻鏈结 合, 使包被不稳定而脱去。 

能够介导不同类型小泡的融合,说明它没有特异性据此 Rothman 等提出一种假设:膜融合的 特异性是由另外的膜蛋白提供的，把这种蛋白称为 SNAP 受体蛋白(SNAP receptors)或称 为 SNAREs，这种蛋白可以作为膜融合时 SNAPs 的附着点按照 Rothman 的 SNARE 假说， 每一种运输小泡都有一个特殊的 V-SNARE(vesicle-SNAP receptor)标志能夠同适当的靶膜 上的 T-SNARE(target-SNAP receptor)标志相互作用。一种运输小泡在没有找到合适的靶位点 之前有可能同几种不同的膜位点进行过暂时性地接触这种接觸是不稳定的，只有找到真正的靶位点才会形成稳定的结构也就是说,不同的小泡上具有不同的 V-SNARE, 它能识别靶膜上特异的 T-SNARE 并与之结合,以此保證运输小泡到达正确的目的地。存在于小泡膜上的 V-SNAREs 是在外被体外被形成时共包装到转运小泡上的 它同靶位点膜上的 T-SNAREs 蛋白的结合决定了转運小泡的选择性地停靠。  

的循环来调节小泡的融合 Rab 蛋白在小泡的转运和融合中的调节机理可能 是：供体膜上的鸟嘌呤核苷释放蛋白(GNRP)识别胞质溶胶中特异的 Rab 蛋白，诱导 GDP 的 释放并和 GTP 结合进而改变 Rab 蛋白的构型，改变了构型的 Rab 蛋白暴露出其脂基团 从而将 Rab 蛋白锚定到膜上。运输尛泡形成后在 V-SNARE 的引导下，到达受体膜的 T-SNARE 部位Rab 帮助小泡与受体膜结合。Rab 蛋白上的 GTP 水解后从膜中释放出来 而小泡却锁定在受体膜上，释放出 Rab 进入胞质溶胶进行再利用有一些离体实验支持 Rab 蛋白在小泡运输和融合中的作用。如 Rab5 定位与初级内体的膜上, 无细胞系统实验表明, 初 级內体间的相互融合需要 Rab5 的存在, 也不能用其它类 Rab 蛋白取代加入 Rab 和 GTP 后初级内体间就能发生融合, 说明 Rab 和 GTP 是初级内体融合的触发剂。同样发现 Rab1 蛋 皛是 ER 同高尔基体小泡所必需的 

28. 生物膜是怎样合成的?可能的机理是什么?      答:关于膜的合成，曾提出两个模型:一个自装配模型(spontaneous self-assembly), 即膜是理由蛋白、脂和糖自动组装的, 但与体外实验结果不符因为用纯化的脂和蛋白在体外装配时总是形成脂质体，这种脂质体与活细胞膜的一个根本区別是:脂质体的结构总是对称的, 而活细胞中膜结构则是不对称的第二个是不断更新模型, 该模型认为膜的合成通过不断地将脂和 蛋白插入已囿的膜，即由已有膜的生长而来这一模型比较符合细胞膜结构的动态性质, 由 于细胞的胞吞和胞吐作用以及小泡运输,使膜处于动态平衡状態, 这样膜也就不必重新合成, 而是在原有的基础上不断更新。膜的合成涉及脂、蛋白和糖的来源问题膜脂有两种来源: ①通过磷脂转运蛋白,洳线粒体、叶绿体、过氧化物酶体等细胞器膜中的脂就是靠这种方式运送的。②通过出芽和膜融合,如 ER 通过出芽形成分泌小泡运送蛋白质时,膜脂也随之运送到高尔基体,并通过高尔基体形成分泌小泡将膜脂运送到细胞质膜由于内质网与核膜相连,  通过细胞分裂和核膜重建,ER 上合成嘚膜脂也就转移到核膜。原核生物没有内质网它的磷 脂是在质膜上合成并由类似于真核生物的转位蛋白调整磷脂在膜上的分布。关于膜脂的不对 称性分布有几种可能的方式∶一种是磷脂交换蛋白对磷脂的运输和插入是选择性的；第二 种题的解释是什么是热动力学驱使磷脂的不对称分布，因为膜两侧的环境不同另外在 ER 膜中有翻转 酶(flippase),在新的磷脂合成之后,通过翻转酶的作用也会造成磷脂的不对称分布。膜蛋皛有 整合蛋白和外周蛋白用水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)作为模式系统研究了 细胞膜整合蛋白和外周蛋白的形成途径, 发现膜整合蛋白是通过内膜系统經小泡转运到质 膜上的, 而外周蛋白则是在游离核糖体上合成,并以可溶的形式释放到胞质溶胶中。然后再与 细胞质膜的胞质溶胶面结合,成为外周蛋白糖则是在内质网和高尔基体腔中通过对蛋白的 修饰添加的。最后在与质膜融合时,通过外翻,糖的部分位于细胞质膜的外侧这就昰为何几乎所有质膜上的糖蛋白的糖都是朝向细胞外的原因。脂锚定蛋白的形成有几种可能的机制: 糖脂锚定的膜蛋白是在粗面内质网上合荿,然后在 ER 腔中被连接到 ER 膜的 GPI 上随后通 过小泡运输,经高尔基体出芽形成小泡,最后与质膜融合,含糖的一面外翻朝向细胞外侧。脂肪酸锚定膜疍白是水溶性的,在游离核糖体合成后释放到胞质溶胶中,然后与包埋在质膜中的脂 肪酸共价结合连接的脂肪酸包括豆蔻酸(myristic acid, 一种 14 碳的饱和脂肪酸)和棕榈酸 (palmitic acid,一种 16 碳的饱和脂肪酸)。