蚯蚓激酶2000提取工艺培训

TAME法对康脂口服液中蚓激酶单位效價的测定 TAME法对康脂口服液中蚓激酶单位效价 的测定 微物,lJI乍9月第21卷第3期JOURNA1OFMICROBIOLOGYsc2001Vol21No3 实验与技术 TAME法对康脂12”服液中蚓激酶单位效价的测定 李剑梅,苗玉琨,李鑫 l芷宁省撒物研究所.让宁朝阳l22000;2朝阳师.让宁朝阳122000 摘要用对甲苯磺酰L,精氨酸甲脂法下简称由TAME法对康脂口服液中蚓激酶单位敷衍进行划定研克. 璺掱批次产品的测定站果表明.苒蚓嫩酶单位敷衍均在l5u/ml上.末洲定方法快速简便,适宜生产中控制产-忌 庙量.址一步指旱生产. 差键词I’AME鲻『激酶;酶单位敷忻 中图分类号R961文献标识码B文章编号1030061一[12 康脂口服液是以地龙EisenlaetidaSavignv. 又蚯蚓为土要原料,利用先进的生物提取技术制 成的柯,物性的高科技产品,其富囼蚯蚓纤维 白水解酶,具有较好的溶挣降脂功效.为控制产 r的内侄质量,结合实际生产情况,我们用TAME 法进行r酶活力单位教价的测定研究. 1材料与方法 l1材料 Ll1样品康脂口服液由辽宁省微生物研究所 提供为淡黄色半透明液体.供试样品批导分别 取a液与b掖混合.酾节pH值至8.0.15三氯 醋酸液称取三氯醋酸150g,加沝稀释至100ml. 2高锰酸钾液称取高锰酸钾2.0g,加水稀释至 100ml10无水亚硫酸钠液称取无水亚硫酸钠 J0g.加永稀释至100ml现用现配.04变色 醺雠醴液称取变色酸0.4g,加67硫酸重量與莺 鑫比至100ml现用现配. 1.14标准甲肆液的配制精密量取甲醇0102 ml,25ml容量瓶中.加入磷酸盐缓冲液0.1tool/ L车划度,摇均.精密最取此液02m1.置5ml容量 帆中,用磷酸盐缓冲液0lmol/L稀释臸刻度. 1L5供试品溶液的制备精密吸取样品康脂口 服液032ml相当干0.032g生药最.置100ml容 罩舰巾.用磷酸盐缓冲液0.1mol/L稀释至刻度. 1.2方法 1.2I标准曲线的制备取试管12支.分为2組, 15min,按分光光度法在58Ohm处测定吸光度.以甲 醇浓度为横标,以吸光度为纵标绘制标准曲线 1.2.2样品测定取具塞试管6史.2史牵自管,4 支样品管,干各管加入TAME01m1.磷酸鹽缓冲液 0.1mollLO1ml,干空白管中加入15j氨自酸 0.2ml,其它各管加入供试品液0lml,F37水讲 40min,取出后,空白管加供试品液0lml,样品管加 15三氯醋酸0.2m1.以下步骤同标准曲线.根船 测定的样品吸光度值,在标准曲线上查出甲薛的 依照下列公式计算供试品中的TAME单位效价 TAMEgg/ml翟 2结果 2.1单位效价的测定 5批样品TAME单位效价的测定结果为196, 2.09,2.12,206,192u/ml,平均值x为20L,楿对 标准差RSD为4.9,可见其效价单位均但l5u/【-1 以上,但在制定质量标准时根据我们的趼究缎验,考 虑该产品的特性,在不影响产品疗效前提下,将产品 中酶單位敛价限度定为每毫升不少于10个单戗. 2.2稳定性实验 我们对同一供试品维样品批号为990901 隔15min测定1次,测定5次.结果分别为l92. 192,191,192,192.结果表明征该时限内样品 具囿良好的稳定性. 2.3重现性实验 我们对同一批样品样品批号为990901依 收稿日期 作者简彳r乍剖梅女.助理研究品.现从书生物制药方l面的昕兜r作. 微生响学雜击 上述方}击进行5次测定,结果为1.92,1.93,189, 191.192,其TAMEu/m1平均值x为192,相对 标准差RSD仅为08,可见用该方法铡定康脂口 服液中蚓激酶单位效价精密度较高,重现性很好. 3讨论 31在TAME為底物测定蚓激酶活力单位时, 由于采用双曲线测定法,因此在绘制曲线时,任r值 应大于0999前提F,选择r值最大者为佳. 32实验结果表明.所检样品的TAME实际值較 所定限度值较,WS302x一258 95 [4】邯腋斌等种姐I定蚯蚓纤酶活的简方法【J】巾吲化 药物志.1,304 第2届奎圉中医药优秀科挝期刊 安徽中医I临床杂志}2002年征订 安徽中醫临床杂志创刊于1988年,是国家科委和新闻出版暑正式批准出版的中医综合性学术期刊, 内客丰富.格调活波.设有专家论坛,专题研究,专病证治,临床研究,名老中医之路,医学经验,临床报道,医 棠医话,病案讨论,病倒报告,方药运甩,学术撂讨,歧黄论坛,新安医学研完,司北京399信箱,国外代号BM6656.国外定价400美え/册,全年2400 美元.恁可咀到当地邮局办理订闺.错过订阅时间者.也可直接与本刊 联系订阅. 地址含肥市太通路明光小区5幢.邮码230011,电话.

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