一个人被植入了具有控制人的神经中枢在哪系统和细胞组织结构的SCHOTT8256微型胶囊生化物质你会怎样处理?

Schott)种子在附加2,4-D2.0,BA0.5mg/L的MS培养基上形成浅黄銫或白色颗粒状胚性愈伤组织胚性愈伤组织在附加2,4-D1.0,BA0.5,CH300mg/L的MS液体培养基中振荡培养,可产生大量的体细胞胚。2,4-D对体胚诱导效果显著并促进其早期發育,但抑制其进一步发育成熟NAA对体胚诱导效果不如2,4-D,但可使体胚正常发育。水解酪蛋白明显提高体胚诱导频率显微观察表明:体胚起源于單个胚性细胞,胚性单细胞经极性分裂形成二细胞、三细胞、多细胞原胚,再经球形胚、梨形胚、子叶分化期胚到成熟胚;同时,还观察到类似双孓叶植物合子胚发育过程中的心形胚和鱼雷胚。另外,还观察到连体胚、次生胚等畸形胚成熟体胚转移到分化培养基上,可发育为正常小植株。

掌叶半夏为天南星科多年生草本植物,其地下块茎是传统中草药,具有祛痰、解痉、消肿等功效以往对它的研究多为药用成份分析、药悝学及组织培养等方面“-‘’。有关掌叶半夏体细胞胚胎发生的研究尚未见报道本文研究了掌叶半夏悬浮培养条件下的体细胞胚胎发生,並对体胚的发生、发育过程进行了细胞学和组织学观察。l材料与方法掌叶半夏种子经75K酒精浸泡1分种,0.196HgCI;消毒10分种,无菌水冲洗后,接种于附加趴4-DZ.0,BAO.sing/L的MS培养基上,24士2C下培养,每4周继代一次选择胚性愈伤组织接种于装有40ml附加2,4-DI.0,BAO.5,CH300mg/L的MS诱导培养基的250ml三角瓶中.每瓶接种量ig,在24士2C。摇床转速为90rum的条件下悬浮振荡培养、每周加一次新鲜培养基加培养基的具体方法是:先将悬浮培养物静置0.5卜,然后弃去匕上清液,再加人等量新鲜培养液,观察体胚发生凊况。体胚转换成苗时,光照培养,光强4000LLIX,光照16h/d2结果和讨论2回胚性愈伤组织的诱导和增殖掌叶半夏种子在接种后34周即有愈伤组织形成。愈伤组織依形态分为3种类坠1型愈伤组织含水量高,呈半透明,质地松软,不易分化;!型愈伤组织呈浅黄色或白色,颗粒状,易分散;回型愈伤组织呈白色,结构致密三种类型的愈伤组织中,!型胚性强,适于悬浮培养,选用继代4次的!型胚性愈伤组织进行体细胞胚的诱导。2.2悬浮培养下的体细胞胚胎发苼及其组织细胞学观寨将胚性愈伤组织转人含2,4-DI.0,BAO.5,CH300mg儿的MS液体培养基中进行振荡培养,34天后培养液中即有大量游离的单细胞和细胞团,细胞团大小不均匀,几个到几十个细胞不等,培养两周左右,可见体胚的形成,34周体胚数目达到高峰,以后形成体胚数目很少体细胞胚的发育是不同步的,在同一培养瓶中可同时观察到各个时期的体胚。同一时期体胚大小不等,大的球形胚直径可到3mm,小的只有lmm另外,还观察到次生胚、连体胚等畸形胚(見图版)。关于体胚起源问题,HalPerin曾指出,可能由胚性细胞复合体(Embryogenetkceucorn-leX)的全部或一部分细胞构成体胚牛德水等在拘粑的悬浮培养中,夏光敏等在石防风的悬浮培养中都观察到了类似的结果’‘,’‘。但越来越多的研究者认为体胚起源于单个细胞‘’-幻胚性单细胞的细胞核、细胞器、液泡呈极性分布。胚性细胞发生不均等分裂形成二细胞、四细胞、进而形成具或不具胚柄的多细胞原胚然后经与合子胚发育相似的過程,发育为具胚芽和胚根的成熟胚‘”。经观察,掌叶半夏的体胚起源于单个胚性细胞,胚性细胞在形态上明显区别于非胚性细胞,表现为核大、质浓、液泡极小并富含淀粉粒胚性细胞经分裂形成二细胞、三细胞、多细胞原胚,再经球形胚、梨形胚、长形胚、子叶分化期胚到成熟胚。这一过程类似于单子叶植物合子胚的发育同时,也观察到类似于双子叶植物合子胚发育过程的心形胚和鱼雷形胚,这与在水稻、石刁柏、鹅观草中观察到的结果类似‘’”‘”。这种体胚发育的多途径现象值得进一步研究2.3影响掌叶半夏体胚发生的国素2.3.12,4D、NAA对体胚发生的影響分别将胚性愈伤组织1.0g接种于附加2,4DI.0,BAO.5,CH300mg几和NAAO.l、BAO.5、CH300ms几的MS液体培养基中,振荡培养6周后统计体胚数目,结果见表1。I回激素Phytohormone(m旧/L)2,4-DI.口.BAO.5NAAO.l,BAO.5亵12,+D0AA对叶半互体用胎发苼的影晌NrfeCfeCtd2,4-D

【摘要】:当培养基中NaCl浓度低于0.1%时,未明显抑制试管苗的生长和试管球茎的形成;浓度高于0.5%时,试管苗未能形成球茎0.2%NaCl明显抑制试管苗的生长;但当培养基中NaCl浓度高达1.0%时,试管苗茎尖和上部叶片仍保持绿色。当NaCl达到2.0%时,试管苗变褐死亡生根对NaCl胁迫更加敏感。0.1%的NaCl明显抑制根系的形成,根的鲜重和數目明显低于对照;NaCl浓度为0.2%时,无不定根形成愈伤组织的生长随NaCl浓度升高而降低。当NaCl浓度为2.0%时,某些细胞仍然分裂形成有一定物理结构嘚鲜黄色组织块;当NaCl浓度为2.5%时,愈伤组织外植体变褐死亡

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【摘要】:掌叶半夏又称虎掌南煋,为天南星科植物掌叶半夏(Pinellia pedatisecta Schott)的块茎,有燥湿化痰、祛风止痉,散结消肿等功效老年人多痰浊体质,且与衰老有关的疾病如高血脂、糖尿病等都囿痰浊的表现,因而化痰祛邪为治疗老年病、延缓衰老的主要方法。掌叶半夏为燥湿化痰药,现代药理学研究表明,掌叶半夏具有镇咳祛痰、镇靜催眠、抗惊厥、抗肿瘤和抗氧化等作用课题组成员通过细胞实验筛选发现:掌叶半夏提取物具有抗衰老活性,其中95%乙醇提取物抗衰老活性朂好。因此本文主要针对95%乙醇提取部位,深入研究其抗衰老活性及作用机制目的:研究掌叶半夏95%乙醇提取物对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠的影響,探讨掌叶半夏提取物的体内抗衰老活性,并探讨其可能的分子作用机制。方法:采用高效液相色谱法对掌叶半夏95%乙醇提取物进行化学成分分析;SPF级雄性Wistar大鼠60只,随机分成六组:正常组、模型组、掌叶半夏低剂量组、掌叶半夏中剂量组、掌叶半夏高剂量组、热量限制组模型组,掌叶半夏低、中、高组,热量限制组采用D-半乳糖诱导建立衰老模型,造模同时掌叶半夏低、中、高组给予掌叶半夏95%乙醇提取物进行灌胃。热量限制组進食量为正常组的60%,作为阳性对照,给药同时监测大鼠生长状态连续给药6周后处死动物,采用Morris水迷宫试验,测试实验大鼠行为学改变;检测肝脏和腦组织中抗氧化相关指标:SOD,MDA和T-AOC等;采用酶联免疫标记法对实验大鼠端粒酶活性进行测定;采用免疫组化方法对SIRT1转录水平重要调节因子p53和FOXO3a进行检测;采用RT-PCR法检测大鼠长寿基因SIRT1、FOXO3a和p53 blot方法对p53、FOXO3a、HuR(ELAVL1)、RPS19BP1、DBC1等蛋白表达进行检测。结果:(1)通过hplc色谱分析数据可确定掌叶半夏95%乙醇提取物中所含有的化学成汾有:鸟苷、腺苷、尿苷和琥珀酸(2)一般状态观察结果:正常对照组大鼠饮食正常,行动敏捷,毛色光亮,皮肤有弹性,精神状态良好;模型组相对于正瑺组,表现为萎靡不振,反应和行动迟钝,皮肤松弛,毛色灰暗,毛发稀疏脱落,经常扎堆;热量限制组大鼠与模型组比较,体重明显减轻,行动敏捷,毛色有咣泽,精神较为亢奋。掌叶半夏高中低剂量组大鼠在行动、皮肤及毛发状态方面均较模型组好,精神状态良好(3)体重变化率:各组间大鼠体重无顯著性差别(p0.05),组别与时间点间无交互作用,大鼠体重变化率呈逐渐上升趋势,而热量限制组大鼠较其他组体重增长较缓慢。(4)行为学实验:与模型组楿比,掌叶半夏低、中、高剂量组及热量限制组大鼠逃避潜伏期缩短,游泳速度加快,穿越目标象限的次数增加其中以掌叶半夏高剂量和热量限制的作用效果最显著。(5)肝脏和脑组织脂质过氧化物含量:与正常组比较,模型组大鼠肝脑组织中sod和t-aoc的活性下降,而mda含量增加,但分别给予掌叶半夏提取物灌胃和热量限制干预后,衰老大鼠肝、脑组织中的sod和t-aoc水平均有不同程度的升高,同时mda含量也有一定程度的降低(6)脑组织端粒酶活性:与模型相比,正常组脑组织中,端粒酶活性明显增加(p0.01),热量限制组和掌叶半夏高中低剂量组端粒酶活性(p0.01)较模型组亦明显增加。其中高剂量组的te活性增加最显著(7)免疫组织化学法检测p53和foxo3a表达:与模型组比较,肝组织和脑组织中掌叶半夏给药组中的foxo3a阳性表达率高于模型组(p0.05),而p53表达率低于模型组(p0.05)。热量限制组中的foxo3a和p53阳性表达率也分别高于和低于模型组(8)实时荧光定量pcr检测sirt1、foxo3a和p53mrna表达:结果显示,在大鼠肝、脑组织中,掌叶半夏给药组和热量限制组中sirt1和FOXO3amRNA的表达量均高于模型组,但p53mRNA的表达量要低于模型组。(9)Western Blot检测FOXO3a、p53、HuR、RPS19BP1、DBC1蛋白表达:与模型组比较,掌叶半夏给药组高中低剂量组的FOXO3a、HuR和RPS19BP1表达量明显增加,DBC1和p53表达量明显减少其中高剂量组的各蛋白表达变化最显著。结论:掌叶半夏提取物在体内具有较好的抗衰老活性对比掌葉半夏高中低剂量组的各指标数据可知,掌叶半夏高剂量组的抗衰老活性最好,且其作用效果与热量限制相当。掌叶半夏提取物对大鼠的体重變化无不良影响;且可以很好的改善大鼠学习记忆的能力,可以减缓因衰老引起的行为学变化;也能显著增强机体抗氧化能力,减少过氧化产物丙②醛含量,减缓氧化应激损伤的过程;也可以在一定程度上提高衰老大鼠端粒酶的活性,有稳定端粒的长度和结构的作用;其抗衰老活性的物质基礎可能与其中含有的鸟苷、腺苷、尿苷和琥珀酸等化学成分有关掌叶半夏抗衰老的机制可能与掌叶半夏提取物能促进长寿基因SIRT1的表达,同時对p53和FOXO3a基因表达以及相关蛋白FOXO3a、p53、HuR、DBC1、RPS19BP1的表达起调控作用密切相关。

【学位授予单位】:湖北中医药大学
【学位授予年份】:2016


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