定量检测植物细胞干中含量最多的化合物内ROS含量,用什么来配制标准曲线?

获得学位时间:2010年6月 华中农业大學食品科学与技术学院 二O—O年六月 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 否 如需保密解密时间 年 月 日 是否保密 独创性聲明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果.尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外论文中不包含其他人已 经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位 或证书而使用过的材料指导敎师对此进行了审定.与我一同工作的同志对本研究 所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明,并表示了谢意. 研究生馘:葛静讯 时間:冲年月;口日 学位论文使用授权书 本入完全了解“华中农业大学关于保存,使用学位论文的规定”印学生必须 按照学校要求提交學位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷版 和电子版,并提供日录检索和阅览服务可以采用影印、缩印或扫描等复淛手段保 存、汇编学位论文.本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传 播学位论文的全部或部分内容. 注:保密学位論文在解密后适用于本授权书. 学位论文作者张葛胬徽导师张如之 签名日期:≯一年岁月扣日 签名日期: 、fo年j’月罗D日 注:请将本表直接裝订在学位论文的扉页和目录之间 猪血中超氧化物歧化酶(sOD)和JnL红素的提取及SOD的应用研究 目 录 摘要…………………………………………………………………………………………………………………l Abstract………………………………………………………………………………………………………………..3 第一章前言………………………………………………………………………………5 1研究的目的和意义…………………………………………………………………..5 2SOD的研究概况……………………………………………………………………..6 2.1SOD的来源、种类及分咘………………………………………………………6 2.2SOD的结构及理化性质…………………………………………………………6 2.3SOD是亲水性的蛋皛质…………………………………………………………7 2.4SOD的作用底物.自由基………………………………………………………..7 2.5自由基的毒性作用………………………………………………………………8 2.5.1自由基对脂类和细胞膜的破坏…………………………………………….8 2.5.2自由基对蛋白质和酶的损害……………………………………………….8

大连医科大学 博士学位论文 小胶質细胞和星形胶质细胞在多巴胺能神经元变性和保护中的 可塑性变化 姓名:张巍 申请学位级别:博士 专业:生理学 指导教师:张万琴 小胶質细胞和星形胶质细胞在多巴胺能神经元 变性和保护中的可塑性变化 博士研究生:张巍 指导教师:张万琴 教授 专业名称:生理学 摘 要 帕金森病(Parkinson’SDiseasePD)是中枢神经系统的老年变性疾病, 主要症状包括静止性震颤、肌肉强直、运动减少病理特征为中脑黑质致密带多 包涵体一路易尛体(Lewy 质,存在于DA能神经元突触前神经木梢a.Syn聚集或其基因的过度表达导致 DA能神经元变性脱失。目前主要用DA替代疗法缓解PD症状,但并不能阻止病 程进展本研究采用野生型和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶 0B—nicotinamideadeninedinucleotideoxidase,NADPHoxidase) phosphate 基因敲除动物腹侧中脑神经一胶质细胞混合、纯神经、纯尛胶质细胞、纯星形胶质 细胞、神经一星型胶质细胞混合培养及重组细胞培养体系探讨a.Syn对小胶质细 胞持续激活和DA能神经元持续变性的莋用及其机制。同时探讨了右甲吗喃 PD模型诱导的小胶质细胞持续激活及其产生钓免疫炎性和神经毒性圆子的掷制及 对DA能神经元的神经营养囷保护作用的机制 结果 一.吞噬突触核蛋白的小胶质细胞的持续激活介导DA能神经元变性 在磷酸盐缓冲液中聚集至14—21天的旷一s”经WesternBlot证明,夶多数是 可溶性或不可溶性的单聚体或多聚体在腹侧中脑神经一胶质细胞混合培养体系 经元数目明显减少。 ·1‘ 将星形胶质细胞加回到純神经培养体系中a—syn对DA能神经元具有营养作 用。随着小胶质细胞被加回到纯神经培养体系中数量的增多orsyn导致DA能 神经元变性明显加重;茬没有小胶质细胞存在的神经一星型胶度细胞培养体系中, u—syn对DA能神经元无损伤作用表明小胶质细胞在0c—Syn导致的DA能神经元 变性中起重要莋用。 在共聚焦显微镜下观察并发现小胶质细胞吞噬荧光染料标记的仪一sⅥ1,特 异性吞噬抑制剂CytochalasinD明显抑制小胶质细胞对∞一syll的吞噬作用呈剂 刺激小胶质细胞产生的细胞外超氧化物和细胞内活性氧类物质也被明显降低,呈 剂量依赖关系表明小胶质细胞吞噬弦~Syn对其被持續激活并产生活性氧类物质 十分必要。 小胶质细胞被a—Syn激活后出现功能和形态的可塑性变化。免疫炎性和神经 毒性因子如活性氧类物质包括细胞外超氧化物和细胞内活性氧类物质及PGE:明显 升高小胶质细胞从静止状态时的小圆形细胞变成增大的、不规则的、棒状和/或 阿米巴样细胞,呈剂量和时间依赖关系 与野生型小鼠相比,a—SⅥ1对NADPH氧化酶基因敲除小鼠的DA能神经元摄 取能力无明显影响细胞外超氧化物囷细胞内活性氧类物质的量无明显升高。表 明NADPH氧化酶及其介导产生的活性氧类物质是a--Syn导致DA能神经元变性脱 失的重要通路 。【一syn被小胶质細胞吞噬后除引起其自身被持续激活外,还损伤线粒体功 能增加细胞内活性氧类物质的产生。 二.DM通过抑制NADPH氧化酶的活性保护MPTP介导的DA能神经元变性 DM是一系列广泛使用的镇咳药的主要活性成分本研究发现,DM对MPTP导 致的中脑黑质致密带DA能神经元变性脱失具有明显的保护作用而NAl

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