我在今年年初回答别人的提问以及以前的资料汇编，因为我也有教学工作。

    本帖部分例题内容摘自：网上的发的王镜岩 主编，生物化学（上），高教出版社，2002，第三版的课后习题解答。谢谢解答者！我大致看了一下，把有错的地方给改过来了，连同楼上我摘录的张来群 等，生物化学习题集，科学出版社，2002，第一章的Lys-Lys-Lys的等电点计算，还有我自己写的“酒石酸缓冲溶液的配置（附录缓冲溶液的配制方法小结）”应对生物化学考研试题应该足够了。

例2.酒石酸缓冲溶液的配置（附录缓冲溶液的配制方法小结）

“酒石酸钠的分子量”=所要的酒石酸钠的质量。    酒石酸是液体，我们用在1mol 溶质中: 酒石酸的物质的量(摩尔数)-----也就是：1/30mol/“酒石酸溶液的摩尔浓度”=酒石酸所需的体积。“酒石酸溶液的摩尔浓度"是指你们实验室的现货酒石酸溶液的摩尔浓度，当然要比最终缓冲溶液浓度大，不然还要先浓缩。    这样，1mol溶质中酒石酸钠和酒石酸就凑齐了，先把两者都放进1L的烧杯中，然后向里注蒸馏水直到总体积到达1L或略少，搅拌均匀，测定PH，可往里面加极少量的酒石酸钠或酒石酸把PH值跳到4.5. 如此，你就有了1L的1mol/L的PH=4.5酒石酸缓冲溶液，然后再稀释到250mmol/L，稀释过程不影响pH值。除非无限稀释，因为那时就要考虑的水的pKa了。

    当然，按250mmol溶质算酒石酸钠和酒石酸的用量，然后加蒸馏水定容至1L，不再稀释也可以。

氨基酸和多肽的等电点（isoelectric point）的计算方法：

例4. 将含有天冬氨酸(pI=2.98)、甘氨酸(pI=5.97)、亮氨酸(pI=6.53)和赖氨酸(pI=5.98)的柠檬酸缓冲液，加到预先同样缓冲液平衡过的强阳离交换树脂中，随后用爱缓冲液析脱此柱，并分别收集洗出液，这5种氨基酸将按什么次序洗脱下来？[Asp, Thr, Gly, Leu, Lys]

例5。根据氨基酸的pKa值（请自行查阅生物化学教材），计算下列氨基酸的pI值：丙氨酸、半胱氨酸、谷氨酸和精氨酸。[pI:6.02;5.02;3.22;10.76]

例6.三个lys连在一起，即三肽Lys-Lys-Lys的等电点如何计算？解：这题不是我原创的，是张来群

例8.见：王镜岩 主编，生物化学（上），高教出版社，2002，第三版，166页。

例9.写出混合氨基酸对于阳离子交换的洗脱规律。写出强酸性阳离子交换柱上Asp，His，Gly，Leu，Thr的洗脱顺序(先下的列在前面)。

例15．有一种多肽，其侧链上羧基30个（pK＝4.3），嘧唑基有10个（pK＝7），－N＋H3（pK＝10），设C末端－羧基pK＝3.5，N－末端氨基pK＝9.5，计算此多肽的pI。    解：要计算多肽的等电点，首先应该找到静电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有（30＋1）个单位负电荷，而正电荷最多只有（15＋10＋1）个，相差了5个电荷。要想让正负电荷数相等，只能让30个羧基（侧链－COOHpK＝4.3）少带5个负电荷（－COOHpK＝3.5，它比侧链－COOH易于解离，难于接受质子），即在30个侧链－COOH中有25个处于解离状态（－COO－），5个不解离（－COOH）。

例16. 计算以下肽和蛋白质的等电点：

例18.请问已知氨基酸序列的情况下，怎么计算等电点？还需要了解其他什么信息吗？因为需要做离子交换，还在摸条件，却不知道蛋白的PI值？

解：freecell：有许多生物软件和网上软件都可计算出pI.例如expasy服务器就提供如此服务，把氨基酸序列输入就可以看到了：   

例19.指出用电泳技术分离下列物质，pH是多少时最合适?

例20.将固体氨基酸溶于pH7的水中所得的氨基酸溶液，有的pH大于7，有的小于7，这种现象说明什么? 答：氨基酸既带有氨基也有羧基，是两性电解质。当固体的氨基酸溶于纯水中时，酸性基团解离出质子使溶液变为酸性，碱性基团接受质子使溶液变为碱性。  在20种蛋白质中的常见氨基酸中，一氨基一羧基的氨基酸溶于水后溶液基本为中性，一氨基二羧基的氨基酸溶于水后溶液pH小于7为酸性，二氨基一羧基的氨基酸，如Lys、Arg溶于水后溶液pH大于7为碱性。

例21.某氨基酸的水溶液pH值为6.0，问此氨基酸的等电点是大于6，等于6，还是小于6？

等电点：如果调节溶液的PH值使得其中的氨基酸呈电中性，我们把这个PH值称为氨基酸的等电点：PI。PI是氨基酸的重要常数之一，它的意义在于，物质在PI处的溶解度最小，是分离纯化物质的重要手段。等电点的计算：对于所有的R基团不解离的氨基酸而言（即解离只发生在α-羧基和α-氨基上），计算起来非常简单：PI＝（PK1’+PK2’）/2若是碰到R基团也解离的，氨基酸就有了多级解离，这个公式就不好用了，比如Lys、Glu、Cys等。aa 12.48（胍基）在这种情况下可以按下面的步骤来计算： 由PK’值判断解离顺序，总是PK1’ 按照解离顺序正确写出解离方程式：简式，注意解离基团的正确写法。 找出呈电中性的物质，其左右PK’值的平均值就是氨基酸的等电点：PI＝（PK左’+PK右’）/2以Lys为例：在黑板上用简式演示等电点的测定：等电聚焦法：这是一种特殊的电泳，其载体上铺有连续的PH梯度的缓冲液，然后将氨基酸点样，只要该处的PH与氨基酸的PI不同，则氨基酸就会带电，PH值>PI时，aa带-电；PH值 　　　

我在今年年初回答别人的提问以及以前的资料汇编，因为我也有教学工作。

    本帖部分例题内容摘自：网上的发的王镜岩 主编，生物化学（上），高教出版社，2002，第三版的课后习题解答。谢谢解答者！我大致看了一下，把有错的地方给改过来了，连同楼上我摘录的张来群 等，生物化学习题集，科学出版社，2002，第一章的Lys-Lys-Lys的等电点计算，还有我自己写的“酒石酸缓冲溶液的配置（附录缓冲溶液的配制方法小结）”应对生物化学考研试题应该足够了。

例2.酒石酸缓冲溶液的配置（附录缓冲溶液的配制方法小结）

“酒石酸钠的分子量”=所要的酒石酸钠的质量。    酒石酸是液体，我们用在1mol 溶质中: 酒石酸的物质的量(摩尔数)-----也就是：1/30mol/“酒石酸溶液的摩尔浓度”=酒石酸所需的体积。“酒石酸溶液的摩尔浓度"是指你们实验室的现货酒石酸溶液的摩尔浓度，当然要比最终缓冲溶液浓度大，不然还要先浓缩。    这样，1mol溶质中酒石酸钠和酒石酸就凑齐了，先把两者都放进1L的烧杯中，然后向里注蒸馏水直到总体积到达1L或略少，搅拌均匀，测定PH，可往里面加极少量的酒石酸钠或酒石酸把PH值跳到4.5. 如此，你就有了1L的1mol/L的PH=4.5酒石酸缓冲溶液，然后再稀释到250mmol/L，稀释过程不影响pH值。除非无限稀释，因为那时就要考虑的水的pKa了。

    当然，按250mmol溶质算酒石酸钠和酒石酸的用量，然后加蒸馏水定容至1L，不再稀释也可以。

氨基酸和多肽的等电点（isoelectric point）的计算方法：

例4. 将含有天冬氨酸(pI=2.98)、甘氨酸(pI=5.97)、亮氨酸(pI=6.53)和赖氨酸(pI=5.98)的柠檬酸缓冲液，加到预先同样缓冲液平衡过的强阳离交换树脂中，随后用爱缓冲液析脱此柱，并分别收集洗出液，这5种氨基酸将按什么次序洗脱下来？[Asp, Thr, Gly, Leu, Lys]

例5。根据氨基酸的pKa值（请自行查阅生物化学教材），计算下列氨基酸的pI值：丙氨酸、半胱氨酸、谷氨酸和精氨酸。[pI:6.02;5.02;3.22;10.76]

例6.三个lys连在一起，即三肽Lys-Lys-Lys的等电点如何计算？解：这题不是我原创的，是张来群

例8.见：王镜岩 主编，生物化学（上），高教出版社，2002，第三版，166页。

例9.写出混合氨基酸对于阳离子交换的洗脱规律。写出强酸性阳离子交换柱上Asp，His，Gly，Leu，Thr的洗脱顺序(先下的列在前面)。

例15．有一种多肽，其侧链上羧基30个（pK＝4.3），嘧唑基有10个（pK＝7），－N＋H3（pK＝10），设C末端－羧基pK＝3.5，N－末端氨基pK＝9.5，计算此多肽的pI。    解：要计算多肽的等电点，首先应该找到静电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有（30＋1）个单位负电荷，而正电荷最多只有（15＋10＋1）个，相差了5个电荷。要想让正负电荷数相等，只能让30个羧基（侧链－COOHpK＝4.3）少带5个负电荷（－COOHpK＝3.5，它比侧链－COOH易于解离，难于接受质子），即在30个侧链－COOH中有25个处于解离状态（－COO－），5个不解离（－COOH）。

例16. 计算以下肽和蛋白质的等电点：

例18.请问已知氨基酸序列的情况下，怎么计算等电点？还需要了解其他什么信息吗？因为需要做离子交换，还在摸条件，却不知道蛋白的PI值？

解：freecell：有许多生物软件和网上软件都可计算出pI.例如expasy服务器就提供如此服务，把氨基酸序列输入就可以看到了：   

例19.指出用电泳技术分离下列物质，pH是多少时最合适?

例20.将固体氨基酸溶于pH7的水中所得的氨基酸溶液，有的pH大于7，有的小于7，这种现象说明什么? 答：氨基酸既带有氨基也有羧基，是两性电解质。当固体的氨基酸溶于纯水中时，酸性基团解离出质子使溶液变为酸性，碱性基团接受质子使溶液变为碱性。  在20种蛋白质中的常见氨基酸中，一氨基一羧基的氨基酸溶于水后溶液基本为中性，一氨基二羧基的氨基酸溶于水后溶液pH小于7为酸性，二氨基一羧基的氨基酸，如Lys、Arg溶于水后溶液pH大于7为碱性。

例21.某氨基酸的水溶液pH值为6.0，问此氨基酸的等电点是大于6，等于6，还是小于6？

等电点：如果调节溶液的PH值使得其中的氨基酸呈电中性，我们把这个PH值称为氨基酸的等电点：PI。PI是氨基酸的重要常数之一，它的意义在于，物质在PI处的溶解度最小，是分离纯化物质的重要手段。等电点的计算：对于所有的R基团不解离的氨基酸而言（即解离只发生在α-羧基和α-氨基上），计算起来非常简单：PI＝（PK1’+PK2’）/2若是碰到R基团也解离的，氨基酸就有了多级解离，这个公式就不好用了，比如Lys、Glu、Cys等。aa 12.48（胍基）在这种情况下可以按下面的步骤来计算： 由PK’值判断解离顺序，总是PK1’ 按照解离顺序正确写出解离方程式：简式，注意解离基团的正确写法。 找出呈电中性的物质，其左右PK’值的平均值就是氨基酸的等电点：PI＝（PK左’+PK右’）/2以Lys为例：在黑板上用简式演示等电点的测定：等电聚焦法：这是一种特殊的电泳，其载体上铺有连续的PH梯度的缓冲液，然后将氨基酸点样，只要该处的PH与氨基酸的PI不同，则氨基酸就会带电，PH值>PI时，aa带-电；PH值