嘌呤霉素转染细胞筛选和水的稀释比例是多少

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-09-28 07:00 标签： 嘌呤霉素转染细胞筛选

【摘要】：为了降低实验成本,解决悬浮细胞难转染问题,本研究进行逆转录病毒包装及感染悬浮细胞—白血病细胞的实验。采用磷酸钙转染方法将逆转录病毒质粒MSCV-PIG、Gag-pol与VSVG共转染入293T细胞,通过旋转法将病毒原液与KG-1a白血病细胞共孵育,最后用嘌呤霉素筛选稳定细胞株。逆转录病毒原液感染KG-1a细胞48 h后KG-1a细胞的感染效率约为10%。但嘌呤霉素稳筛后,携带逆转录病毒载体的KG-1a细胞阳性率可达85%以上。通过低成本的磷酸钙转染方法获取病毒,采用病毒原液成功感染较难转染的白血病细胞,为做基础研究的科研人员提供借鉴。


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