谁可以帮我分析一道生物题?主要是第二问,为什么接到四环素的那个连接产物没有目的基因--载体连接物?
谁可以帮我分析一道生物题?主要是第二问,为什么接到四环素的那个连接产物没有目的基因--载体连接物?6．【海南卷】26、（18分）图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR 为四环素抗性基因,P启动子,T为终止子,ori为复制原点.已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点.据图回答：（1）将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有 、 、 三种 .若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行 .（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验.之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是 ；若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是 .（3）目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是 ,其合成的产物是 .（4）在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是 6．（1）目的基因—载体连接物 载体--载体连接物 目的基因--目的基因连接物 分离纯化（其他合理答案也给分） （2）载体--载体连接物 目的基因--载体连接物、载体--载体连接物（3）启动子 mRNA（4）EcoRI和BamHI还有,这个宿主细胞为什么能在这些培养基里生长?什么原理?
虽然你的问题写的乱七八糟,但是我还是回答一下：（2）含tctR重组质粒.含ampR重组质粒.回答你最后的问题：因为这些宿主细胞内已经包含有重组质粒,重组质粒DNA可以表达出相应分解四环素或者青霉素的酶,从而使这些抗生素失效,所以这个宿主细胞可以在含有抗生素的培养基中生长. 再问： 我就是想问第二问的第一个答案为什么不能有“目的基因--载体连接物”？
我有更好的回答：
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与《谁可以帮我分析一道生物题?主要是第二问,为什么接到四环素的那个连接产物没有目的基因--载体连接物?》相关的作业问题
1.控制变量法2.无图啊(3保持电压不变4.所选滑动变阻器阻值过小,或所用定值电阻阻值过大
对的这句是个倒装As it was published at such a time...意思是:尽管他的作品在那样一个时间发布,仍是受到了许多关注.选B表示被动这个一个很常见的被动句倒装
是DNA单链因为有T无U,所以是DNA不是RNA,DNA双链中,由于碱基互补配对,A的含量=T的含量由题意可知,A不等于T所以是DNA单链
额、、这个嘛.首先①：你切了以后,重组质粒中,两个EcoRI切点拼在一起的,构成了一个新的EcoRI切割位点,那么你用EcoRI切就可以把重组质粒切断,然后,在目的基因内部有一个PstI切点,那么用PstI来切的话,就可以再次将重组质粒切断了,那么两个断口,你想想看,是不是就把这个圆形的质粒切成了两种DNA片段?②：同
是问那幅图吗?还有一种情况是两对基因在同一对同源染色体上,不过A和B在一条染色体上,a和b在一条染色体上.
蛋白质的种类与细胞（细胞器）的功能相适应,所以分化结果不同,即不同的组织的细胞中的蛋白质种类一般不全相同.核酸就那四种,A,C,G,U,动物细胞中都一样.那两种噬菌体参考以下链接
这题有BUG,A,D应该都正确,肯定是出题人没注意.
如果DNA离心后位置为　( 轻带和重带 )　,则是全保留复制,如果DNA离心后位置为　　( 中带 )　,则是半保留复制. 分析：如果是全保留复制,新生的DNA全是轻的,老的DNA全是重的.第三步：为了进一步验证第二步的推测结果,将亲代大肠杆菌（含15N－DNA）转移到含14N的培养基上连续繁殖二代（Ⅱ）,请分析： 如果
A：太阳辐射D：地面辐射E：大气逆辐射F：吸收
信使RNA,信使RNA是用来翻译蛋白,胰腺细胞中的酶原颗粒（无活性酶）可达胰腺细胞自身蛋白质总量的40%,所以用来翻译形成酶原颗粒的 信使RNA也比一般细胞多.DNA ,基因 ,染色体一般细胞要多的是性母细胞,他们进行减数分裂时,前期染色体加倍.对体细胞,一般都一样多选A
　　最终来源于阳光：是阳光的能量,使草能产生光合作用,并得以生长；羊吃草,狼吃羊,形成一条食物链,只是间接地利用了阳光的能量.所以说太阳光是地球生命之源.
鲸鱼是哺乳动物,理由如下1.于是卵生,鲸鱼是典型的海中胎生动物2.鱼用腮呼吸,鲸鱼用肺呼吸3.鲸鱼身上有细小的胎毛,而鱼身上是没有的综上,鲸鱼是哺乳动物
答案是(A)首先分析句子结构Despite作为介词表转折,Despite the wide-ranging curiosity about her personallife意思为,尽管对Eleanor Roosevelt 的个人生活有广泛的好奇.那么下句话肯定是要说：但是Eleanor Roosevelt享受很大程度的
等号右边是变限积分求导分部积分：∫f(x)dx=xf(x)-∫xd[f(x)].(*)后面的d[f(x)]=f'(x)dx而f'(x)=d[∫(x-1,2)e^y²]/dx=-d[∫(2,x-1)e^y²]/dx (交换上下限变成变上限积分)根据变上限积分求导公式d[∫(a,b(x))f(x)dx]
图画的不错.（1）多肽 3 图中你画的③的结构式（别忘了两边的横岗）（2）②④⑨⑧ 照着写就行,别忘了横岗（3）3 3（4）方式?麻烦给个例子（5）2
选D一个一个来看.首先这道题目的考点是什么?句子结构和是否使用了重复啰嗦.很明显的一个错误点就是：Until just recently 和Now 冲突,即啰嗦重复.这样的话经过排除只有D符合条件.D这里的“分号”是万能逻辑,使用于很多地方.答案是C的话：解释是这样咯.C中间是用分号连接分号是万能逻辑,在形式上可以把它
这道题有问题.问题在于指向不明. 如果只是问在寻找物象时的操作,那么应当选B.因为转动转换器不能调节焦距,此操作对寻找物象无任何作用； 如果只是问由低倍镜换成高倍镜的操作,那就应当选A,因为转动准焦螺旋只可调节焦距,而不可能改变镜头、使显微镜由低倍变为高倍.原因分析： 转换器是安装镜头的结构,高倍、低倍物镜都装在其上面
这样喽,分成三段分析,第一段是下滑过程,到底部时有,动能=重力势能=8/3Lmg（如果需要可求出速度）.第二段,有重力向下mg,有电场力向下Eq,故摩擦力为 f=u(mg+Eq),假设能通过II区,则克服摩擦力做功w=fL,如果fL>重力势能,则通不过II区,滑行距离应为s=（重力势能）/f,如果能通过II区,则进入I
（1）因为0~1s内受力大小不变,则竹竿上演员受合外力不变,又因为演员开始静止则0~1s内作匀加速运动,同理,分析可知1~3s内演员作匀减速运动.对系统受力分析得竿底部压力与演员受摩擦力相等.依题意,1s与1~3s速度变化量相同,前者时间是后者一半,则加速度前者为后者2倍,所受合外力前者为后者2倍,设演员重力为G,则G关注今日：0 | 主题：318998
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【求助】为什么慢病毒转染后荧光很强，但是目的蛋白却一点都没表达
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这个帖子发布于3年零316天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我实验中用慢病毒转染后荧光很强，达到80%-90%。我目的蛋白构建了flag标签，用抗flag抗体做western blot发现目的基因完全没有表达，空质粒组和构建目的基因质粒组WB图谱完全一致。不知道是哪里出了问题
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Could you detail your lentiviral vectors, try to show some restriction enzyme mapping? Could you describe how the lentivirl vector is generated and what the viral titer is? Is there any RT-PCR data from the lentiviral vector infected cells?
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我们用的是pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP+Puro, 上游用的是EcoRI，下游用的是NotI，序列末尾加了终止密码子。慢病毒是通过第三代包装质粒和载体质粒共转染到293T细胞，收集上清得到的。病毒的滴度没有测过。两组转染率都还可以，80%-90%的细胞都有表达绿色荧光，RT-PCR还没做过
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liuli101010 我实验中用慢病毒转染后荧光很强，达到80%-90%。我目的蛋白构建了flag标签，用抗flag抗体做western blot发现目的基因完全没有表达，空质粒组和构建目的基因质粒组WB图谱完全一致。不知道是哪里出了问题 pCDH很好用的 flag在n还是c端 有没有移码
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【求助】为什么目的基因扩增出来了，内对照反而不行
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这个帖子发布于10年零71天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我做的实验，扩增后跑电泳，目的基因跑出来了，而内对照反而没有，我想内对照应该是很容易出来的，反复调过反应体系，仍没有出来．不知道什么原因？
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引物会不会有问题？
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你有没有再重复做一次呢？
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我也认为可能是引物的问题，可能是引物的种属问题，也可能是引物的设计问题，除此之外应该不会有别的影响因素了。
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[求助]为什么我的PCR总是没有目的基因出现？
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这个帖子发布于12年零349天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我做RT-PCR，虽然总RNA的A260/A280的比值在1.8-2.0，但合成cDNA跑电泳后总是没有目的基因的条带出现，做内参可见只有其中一个标本有正确的条带出现（6个标本），其他的标本电泳都没有任何物质出现。我重复了好几次，结果都一样，弄得我都快崩溃了。我自认为我在操作过程中都尽量避免RNA酶的干扰了，所有的枪头和EP管都灭酶处理过。在做预实验时是能够跑出目的基因的，但现在条件一样，怎么就不行了呢？迫切请求高手指点！！！
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RNA跑过电泳吗？可能都降解了吧，内参是很容易跑的。
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我们的遭遇相同，cdna结果很好，就是pcr 没结果 ，我用温度剃度，浓度剃度都没结果。
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请问如何判断逆转录成cDNA是成功的呢？
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