MMP-8,BIM兔基质金属蛋白酶8ELISA试剂盒
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MMP-8,BIM兔基质金属蛋白酶8ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中兔基质金属蛋白酶8（MMP-8）的含量。
MMP-8,BIM兔基质金属蛋白酶8ELIS 详细信息
MMP-8,BIM兔基质金属蛋白酶8ELISA试剂盒&l&本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中兔基质金属蛋白酶8（MMP-8）的含量。l&有效期：6个月l&保存条件：2-8℃l&本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断&实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被兔基质金属蛋白酶8（MMP-8）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔基质金属蛋白酶8（MMP-8）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。&样本处理及要求&&203. &组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000&g离心5~10分钟，取上清检测。4&标本处理1. &本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。2. &实验前应预测标本含量，如果标本浓度过高，应对标本进行稀释，使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3. &若所检样本不包含在说明书所列样本之中，建议进行预实验验证其有效性，并注意留存样本。4. &使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5. &若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。6. &某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。7. &建议使用新鲜样本，保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。&需要而未提供的试剂和器材&试剂盒组成8128633备1. &2. &经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。&注意事项&试剂准备2&操作步骤中入5&&（350）&实验结果计算所测标准品的OD值标准品的浓度或用相关软件绘制，并得到，的。说明1. &由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析，本产品可能存在一定的质量技术风险。2. &最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关，请务必准备充足的标本备份。3. &不同批次的同一产品可能会有少许差别，如：检测限、灵敏度以及显色时间等，请依据试剂盒内说明书进行实验操作，网站电子版说明书仅作参考。4. &只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果，不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到最好的检测结果。&问题解答若实验效果不好，请及时对显色结果拍照，保留所用板条及未使用试剂，并妥善保存，然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料：问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不精确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不精确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不精确校正移液器，精确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物，颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本，使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本，重复实验&
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主营产品：猪elisa试剂盒，鸡elisa试剂盒，兔elisa试剂盒,进口标准品，酶联免疫试剂盒，原装Elisa
该厂商的产品分类
& & 上海恒远elisa试剂盒批发商（隶属于上海恒远生物科技有限公司）于2008年成立，是一家生物高新技术企业，主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发及销售。主要产品有进口BIM/RD/TSZ原装ELISA试剂盒、进口ELISA试剂盒、猪ELISA试剂盒、鸡ELISA试剂盒、放免试剂盒、血清、抗体、生物科研试剂、实验耗材等。公司目前旗下有员工500余人，ELISA试剂盒年销量100万盒，年销售额近2亿元。& & 公司自成立以来，就非常注重企业信息化的建设，我们采用了先进的内部供应链信息处理平台，保证客户订单的准确、高效处理。我们的客户关系管理系统和客户关系管理团队，能第一时间响应客户的售前、售后需求，关注客户体验及满意度。我们拥有上百名专业的技术人员，为您提供专业、耐心的服务。我们专业，所以值得信赖；我们专注，所以我们高速发展；我们信奉&客户至上&，我们坚持&诚信创新，合作共赢&；我们将竭尽所能，为您提供最便捷、最专业的采购服务，节省您的时间和成本。& & 我们坚信，经过我们的不懈努力，上海恒远生物科技有限公司将成为&生命科学及化学领域最专业、规模最大、品种最全及配套服务最完善的专业
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【求助】关于脑组织进行流式细胞术检测样品制备的问题
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丁香园荣誉版主
这个帖子发布于9年零135天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
哪位站友进行过脑实质组织的流式细胞检测，本人目前在做大鼠皮层的流式细胞术，在细胞悬液制备方面有些问题，希望各位能分享经验：1.园子内流式细胞术讨论贴中用到的多是培养细胞或细胞株或血液，关于脑组织实质的讨论不是很多，不知哪些站友做过实质组织的流式细胞术，是何种组织？效果如何？2.文献中实质组织细胞制备的方法差异较大：从最简单的胰酶消化、机械吹打到RPMI＋Ⅱ型胶原酶＋DNase I联合消化，各种protocol都有，但是实际操作中，发现细胞崩解的比例很大，最后细胞悬液的细胞密度不佳，哪位站友有成功经验能否分享？再次致谢！
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我做的是用流式检测大鼠海马的细胞凋亡，结果还可以，不知道你做的实验是不是对细胞要求比较高，我的大鼠海马细胞悬液制备方法如下：
1.冰上断头处死大鼠，迅速取出海马。
2.剪碎，加PBS。
3.500转，离心3min左右，弃上清。
4.加胰酶，37℃，30min后加小牛血清终止。
5.500转，离心3～4min左右，弃上清。
6.加PBS后，这步可过滤也可不过滤，如果不过滤的话我的办法是让其混匀后自然下
沉，取上清，尽量不要取到团块。（另外我发现不过滤要好些。）
我在做实验时发现，如果要避免太多的细胞碎片，可以用低速短时的离心方法，如500转2～3min。要想实验效果好，应尽量减少离心的次数。
因为实验目的不一样，不知道这些对你的实验有没有帮助。
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我也在找这方面的资料啊，前几天做了脑组织一次流式，结果出来的全部是碎片，FS值及SS值都很小，根本没有办法区分细胞群。我也正在郁闷，自己用了胰酶消化以及机械分离的办法，两种都好像行不通，不知楼主现在找到好的办法没有？
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dongminlyl站友，最近我也在查这方面的资料，发现对组织直接分离后做流式的文献有，但是很少，而且文献之间的方法差别很大，推测，这种实验方法应该在操作时有很大的难度。相比之下，许多文献采取了“迂回”的策略比如：1.提取患者或模型动物的血浆，分离上清，用上清对培养细胞或细胞系进行培养，然后认为这些细胞或细胞系“模拟”患者或模型动物的细胞特性，并进行流式细胞检测。（这种做法与直接取材做流式相比，说服性差了不少，但是仍有文献采用，可能是为了易于操作）。2.取胶质细胞、前体细胞等进行培养，随后在培养皿中加入药物，建造细胞模型，进行流式检测，同样，本人认为这种方法仍旧说服性差。3.研究全身性疾病的脑部症状时，有些文献直接用血浆进行流式，用以间接说明脑部细胞的变化。4.还看到一篇文献比较“震撼”中的方法，直接用组织匀浆器研磨组织，随后筛网过滤，离心，进行流式检测。这种方法做液相色谱也用到，一般研磨后细胞都崩解了，因此没有尝试。...................个人认为，以之前做神经元单细胞分离的经验来看，组织直接消化分离做流式细胞应该有一定的难度，主要是：1.成年脑组织中细胞分离比较困难，对于消化酶种类、剂量、吹打的力度，孔径等等都要进行细致的摸索。2.5周以上大鼠认为脑成熟，成熟脑中神经元突起长，与胶质连接多，分离过程中细胞损伤大，即便分离的当时能够成活，但是存活时间短。当然，这些都是理论的推测，希望进行过此方面实验的站友进行指点。
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流式已经于7月份做完了，结果还可以，样本是用机械法分离出来的，反复吹打很重要
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dongminlyl 流式已经于7月份做完了，结果还可以，样本是用机械法分离出来的，反复吹打很重要能介绍一下详细的方法吗？谢谢～～
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看来大家都碰到了类似的问题，我最近也在为这个头痛呢，请dongminlyl战友详细讲讲他的方法吧～
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我做的是用流式检测大鼠海马的细胞凋亡，结果还可以，不知道你做的实验是不是对细胞要求比较高，我的大鼠海马细胞悬液制备方法如下：
1.冰上断头处死大鼠，迅速取出海马。
2.剪碎，加PBS。
3.500转，离心3min左右，弃上清。
4.加胰酶，37℃，30min后加小牛血清终止。
5.500转，离心3～4min左右，弃上清。
6.加PBS后，这步可过滤也可不过滤，如果不过滤的话我的办法是让其混匀后自然下
沉，取上清，尽量不要取到团块。（另外我发现不过滤要好些。）
我在做实验时发现，如果要避免太多的细胞碎片，可以用低速短时的离心方法，如500转2～3min。要想实验效果好，应尽量减少离心的次数。
因为实验目的不一样，不知道这些对你的实验有没有帮助。
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好贴一定要顶，回头看
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正在准备，谢谢
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组织用液氮先保存，有没有影响？
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adapopoer 组织用液氮先保存，有没有影响？液氮保存后细胞会破裂吧
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海马组织单细胞悬液制备步骤，求指点
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mark，不知道现在是否有更好的方法呢，之前用机械分离法做了预实验，结果不是很好，做的是大鼠大脑皮层的神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞的细胞比例分析，有的话麻烦推荐一下了，最近就要开展正式实验了，谢谢。
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我最近做了一次大鼠纹状体组织的流式细胞测凋亡，但是全是细胞碎片，不知道为什么呀。
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