来自犹他州大学亨茨曼癌症研究所（HCI）的科学家的研究，显示了上皮细胞如何自然地翻转，保持细胞分裂和细胞死亡之间的恒定数目。该研究于2月15日发表在《自然》上。 上皮细胞包括皮肤和皮肤样内衬，其覆盖内...即将发布日期：日 - 来自[]栏目
据日《日刊工业新闻》报道，日本京都大学大学院医学研究科三岛理晃教授的研究小组与京都大学iPS细胞研究所的长船健二副教授、京都大学的小川诚司教授等共同从人类iPS细胞（人工多能性干细胞）中成功分离出肺泡上皮细胞。这一研究成果对于肺的再生研究、呼吸器官疑难病症的治疗以及相关新药研发具有重要意义。&
“肺泡前驱细胞”是成长为肺泡上皮细胞前一阶段的细胞，研究小组首先详细研究了有望从中分离出“肺泡前驱细胞”并进行细胞浓缩的蛋白质，结果发现，CPM是有效的表面蛋白质。此外，研究小组在制作肺泡细胞时不可缺少的Ⅱ型肺泡上皮细胞中导入荧光蛋白质（GFP），制作出在分化过程中能够发光的人类iPS细胞。对从CPM中分离的“肺泡前驱细胞”进行三维培养制作成的肺泡上皮细胞进行分化诱导，结果发现GFP有发光现象，证明了能够分离Ⅱ型肺泡上皮细胞。迄今为止，肺的再生及呼吸器官疑难病症的治疗一直是医学难题，此次的研究成果对解决这一医学难题具有重要的意义，相关研究内容发表在美国科技期刊《Stem&Cell&Reports》电子版。&
日期：日 - 来自[]栏目
目的研究EBV感染人胃上皮细胞系GFS-1后PAR-2基因的表达状况及转化作用，以探讨PAR-2基因在Epstein-Baar病毒(EBV)相关胃癌发生中所起的作用。方法用携带NEO基因的重组EBV产生细胞系Akata 1061以密切接触法感染人胃上皮细胞系GF5-1，采用脂质体介导法将PAR-2基因转染至同一细胞，以pcDNA3空载体质粒转染同一细胞为对照;经G418筛选获得感染或转染的抗性细胞克隆;采用免疫细胞化学法测定EBNA1的表达以鉴定EBV感染细胞克隆，测定EBV感染和PAR-2基因转染细胞中PAR-2蛋白的表达;通过形态学观察、细胞生长曲线测定及流式细胞分析等方法观察细胞生物学特性的变化。结果与对照组相比，EBV感染及PAR-2转染后细胞发生明显的形态学变化，生长速度明显加快，S期细胞比例显著提高，分别为(70.35±0.91)%、(60.67±3.06) % 和(34.74±1.03)%，差异有显著性(P<0.05)，表明EBV感染及PAR-2基因转染均使细胞增殖加快。结论EBV感染及PAR-2基因转染可使人胃上皮细胞的增殖速度加快，细胞恶性程度增强，但并未导致肿瘤的发生。EBV对人胃上皮细胞的转化作用可能与PAR-2基因的过度表达有关。
【关键词】& Epstein-Barr 病毒(EBV);PAR-2;人胃上皮细胞;基因转染;细胞周期
　　Role of PAR-2 gene in EBV-transformed human gastric epititelial cells
　　LIU Huan-xin,CHEN Juan,LIU Mei,et al.The Hospital of Armed Police of Guangdong,Guangzhou 510507,China
　　[Abstract]ObjectiveTo define the role of PAR-2 gene in the carcinogenesis of EBV-associated gastric carcinoma, we examined the expression of PAR-2 in the human epithelial cell line GES1 infected with EBV and tested if EBV could induce cell transformation.MethodsAkata 1061 was used to infect GES-1 the intimate contact meth-od. pcDNA3-PAR-2 was hansfected into cells the UpofectAMINE method, whereas pcDNA3 vector was used as the control. Geneticin 418 (G418) was adopted to select positive clones that were either EBV or PAR-2 positive. Immuno-histochemical staining method was used to detect EBNAI expression in cell clones infected with EBV and the expressionof PAR-2 protein in EBV-infected or PAR-2-transfected cell clones. Morphological observations, cell growth curve de-terminations, soft agar gel formation tests, and flow cytometry were employed to measure changes in cell proliferationand cell cycle progress.ResultsCompared to the control, EBV-infected or PAR-2-transfected cells revealed significant morphological changes that were accompanied a significant increase in the cell growth velocity. The numbers of S ase cells were significantly increased(P<0.05), both EBV-infection (70.35&0.91%)and PAR-2-transfection(60.67%&3.06%)，compared to the control (34.74%&1.03%).Cell colony formation was not detected the soft agar gel clone formation test.ConclusionBoth EBV infection and PAR-2 transfection promote the proliferation of gastric epithelial cells result in an increased tendency of malignance. However, the both events failed to induce carcinoma. These data suggest that an over-expression of PAR-2 may play a role in EBV induced transformation on human gastric epithelial cells.
　　[Key words]Epstein-Barr virus(EBV ); PAR-2; Human gas G Cell cycle
　　胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤，发病率在世界范围内的恶性肿瘤中占第二位，其发病机制目前并不十分清楚。大多数学者认为，胃癌的发生是物理、化学、生物等多因素、多阶段的发展过程。1990年Burke等[1]首次报道了1例EBV阳性胃癌，自此EBV感染与胃癌的关系受到关注[2]。EBV最初是由Epstein和Barr从非洲伯基特淋巴瘤(BL)培养中发现的，它与多种人类肿瘤有关。目前，对EBV相关胃癌的研究主要在临床病理方面，而EBV感染后胃上皮细胞变化的分子机制尚不明确。笔者采用EBV感染和PAR-2基因转染体外培养的胃上皮细胞系GES-1,对比分析细胞生物学特性的变化，从而探讨PAR-2基因在EBV致胃癌发生发展中的作用。
　　1材料与方法
　　1.1主要试剂脂质体Lipofect AMINETM 2000 regent,G418购自Invitrogen公司;小量质粒提取试剂盒、限制性内切酶、XDNA/Hind m maker，200 by DNA stepladder、琼脂糖购自华美生物技术工程公司;RPMI1640培养基购自美国Gibco公司;胎牛血清(FCS)购自基因公司;免疫细胞化学染色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司;胃癌病人血清为来自本院肿瘤科;载体和细胞株：pcDNA3空载体质粒、pcDNA3-c-myC重组质粒及携带NEW基因的重组EBV产生细胞系Akata 1061均为广州安必平生物科技有限公司提供;人胃上皮细胞系GFS-1由南方医科大学肿瘤研究所提供;大肠杆菌HB 101由安必平生物科技有限公司提供。
　　1.2细胞的培养人胃上皮细胞系GES-1用含10%FCS,100 U/ml青霉素、100 U/ml链霉素的RPMI 1640培养基，置于37℃，5% CO2培养箱中培养。细胞2~3天换1次液，细胞融合约达80%时，以0.25%胰蛋白酶消化传代。Akata细胞为悬浮生长的淋巴细胞，具有G418抗性。常规悬浮细胞培养方法，另含700mg/L G418。
　　1.3pcDNA3-PAR-2重组质粒及pcDNA3空载体质粒的获得取感受态的大肠杆菌，按质粒小量提取方法进行质粒DNA的提取和纯化，用BamHI酶切后电泳鉴定，用Quantity one图像分析软件进行灰度测定，计算提取质粒的浓度，并根据此浓度确定转染所需的量。
　　1.4基因转染及阳性克隆筛选将pcDNA3-c-myc重组质粒及pcDNA3空载体质粒按1：2~1：3的量用脂质体法分别转染24孔板中90%~93%融合的GES-1细胞，按试剂盒操作手册进行。37℃转染5h后，加人FCS至终浓度10%。48h后用有限稀释法进行阳性克隆，并置于含300mg/L G418(根据预实验结果而定)的选择培养基中，筛选培养2周，待抗性单克隆长至足够大，挑取单克隆集落，扩大培养，制备细胞片。EBV感染及阳性克隆筛选：感染前3天，Akata1061细胞稀释至2&103/ml，加入终浓度为0.5%山羊抗人降解血清，于37℃培养2h，不时轻轻摇动，然后以PBS洗2次，以含10 % FCS的RPMI 1640培养基继续培养。感染前1天，将GES-1细胞以2mmol/LEIYI'A/PBS消化下来，置于12孔培养板中，每孔2ml培养基，含5&103细胞。转染当天更换等体积培养基。转染时每孔加人1ml Akata细胞悬液，于37℃，5%CO2培养箱中共同培养3天。在第2天更新一半培养基，使FCS浓度降至5%。此过程结束后，以PBS洗4次，加人2 ml含10% FCS的培养基。感染后第5天，将细胞消化下来，稀释至2&102/ml，接种于96孔板中培养至克隆形成。此过程中，培养基中加入终浓度为300mmol/L的G418和终浓度为1mmol/L的更昔洛韦(仅第1周)。将所获得的细胞克隆常规培养并制备细胞片。
　　1.5EBNAl及PAR-2蛋白的检测将EBV感染细胞片用FTIC标记的免疫细胞化学方法检测EBNAI的表达;感染和转染细胞片检测PAR-2蛋白的表达。免疫细胞化学检测方法按说明书操作，以PBS代替一抗作为阴性对照，以细胞内出现明确亮绿色判定为阳性结果。
　　1.6细胞生长曲线测定取EBV感染、c-myc基因转染及对照细胞培养至对数生长期，用0.25%胰酶消化制成单细胞悬液，经计数后以3&103个/孔接种于24孔板，每孔加人无血清培养基2ml培养1天使细胞同步化，换入含10% FCS的RPMI 1640培养基2ml继续培养。每天取4孔进行细胞计数，每孔重复计数3次，取其平均值，连续计数7天，以时间为横坐标，细胞数为纵坐标绘制细胞生长曲线。
　　1.7软琼脂克隆形成试验在6孔细胞培养板中，每孔先加入0.66%底层琼脂3ml(1.5ml 1.3%琼脂冷却至55℃左右，与1.5ml预温的37℃含2&RPMI1640培养基混匀)，待凝固后，加入0.33%的含细胞的上层琼脂3ml，每组细胞均做复孔。置湿盒，在37℃,5% CO2及饱和湿度环境下培养2~3周，观察软琼脂中细胞集落的形成。
　　1.8细胞周期的测定分别收集各组细胞，经0.25%胰酶消化，离心收集细胞，冷PBS洗涤2次。加入预冷的70%酒精，4℃固定过夜。800~1000&g离心弃上清，冷PBS离心洗涤2次并重悬，制成单细胞悬液，注意离心速度不宜过快。等体积细胞悬液和碘化丙啶( PI)染液混合，4℃放置20min&300目尼龙过滤，加样入流式细胞分析仪样品室，进行细胞周期检测。
　　1.9统计学处理采用SPSS13.0统计分析软件对数据进行单因素方差分析。设定P<0.05为差异有显著性。
　　2.1PWNA3-PAR-2重组质粒的鉴定扩增纯化的pcDNA3- PAR-2重组质粒经BamHⅠ酶切、电泳，可见PAR-2基因大小为1.3kb，pcDNA3载体为5.4kb，恰好在pcDNA3的BamHⅠ位点，与所提供的质粒图谱相符(图1)和PAR-2蛋白表达，转染了PAR-2基因的GES-1细胞有PAR-2蛋白表达，细胞均被染成亮绿色，阳性结果主要出现在细胞核，部分在细胞质，而空载体转染组及正常GES-1细胞均为阴性(图2、图3)。
　　2.2细胞形态学变化正常的GES-1细胞呈短梭形，大小较为一致，核较小呈圆形或椭圆形;感染及转染组细胞体积变大，呈椭圆形或多角形，核变大，核浆比增大，折光性增强，与正常GES-1细胞相比较，细胞增殖迅速，细胞生长的接触性抑制不明显，出现&成瘤性&生长(图4)。
　　2.3免疫组织化学染色结果FlTC标记免疫细胞化学染色显示，感染了EBV的GES-1细胞有EBNA1。
　　2.4细胞生长曲线测定细胞生长曲线如图3，可见EBV感染细胞及c-myc基因转染细胞数量均显著高于空载体转染细胞，并随培养时间增加，这一差异越来越明显;空载体转染细胞数与正常GES-1细胞相比差异无显著性(图3)。
　　2.5细胞周期测定经流式细胞仪进行细胞周期分析发现，EBV感染和c-myc基因转染细胞S期细胞比例[(70.%&0. 91%)和(67%&3 .06%)]显著高于pcDNA3转染对照细胞(34.74%&1.03%),差异有显著性(P<0.05)。而EBV感染与PAR-2基因转染细胞之间，以及pcDNA3转染细胞与正常GES-1细胞(49.35 %&1.16%)之间差异无显著性。
　　EBV是人类疱疹病毒N型，属DNA肿瘤病毒，EBV在人群中广泛存在，多数人幼儿期就感染EBV,且终生携带。EBV与BL、鼻咽癌(NPC)的关系最为明确，近年来EBV在上皮源性肿瘤发生、发展中的作用备受关注。1990年等[1]Burke首次报道了1例EBV阳性胃癌以来，EBV感染与胃癌的关系受到关注。c-myc原癌基因在多种人类肿瘤细胞中均有扩增和高表达。有研究表明，在EBV相关的多种肿瘤如BL、NPC中都存在。my基因高表达[3]，而PAR-2基因过度表达可以改变细胞内基因调控，引起其他癌基因的活化或抑癌基因的失活，使细胞易于转化为恶性表型，从而启动或加速肿瘤发生[4，5]。在对人鼻咽上皮细胞的研究中发现，c- my基因表达增高能激活端粒酶活性，从而诱发肿瘤。有报道EBV阳性胃癌表达EBNA 1、BARFO、BARE 1和EBERs[6~8]，将BARE 1基因导入非致瘤性louckes淋巴细胞中可活化PAR-2原癌基因[9]。另外，临床病理学研究发现患有PAR-2产物阳性浸润性胃癌的病人预后明显差于PAR-2产物阴性肿瘤的病人[10]。因此推测PAR-2基因在EBV相关胃癌的形成过程中起到一定的作用。实验中用的GES-1细胞为SV40感染原代培养的胎儿正常胃黏膜上皮细胞建立的细胞系，染色体为近三倍体(50~60之间)。除了转化特性之外，GES-1细胞基本保留了正常的细胞骨架结构，角蛋白反应阳性，接种在裸鼠中6个月观察无致瘤性，此细胞系为研究胃上皮细胞癌变提供重要的模式系统。Akata细胞来源于EBV阳性BL病人，通过同源重组插入一个新霉素抗性基因(Neo)，因此具有G418抗性。经抗免疫球蛋白处理后，能产生大量重组EBV(每个细胞含EBV质粒20个拷贝)。Akata细胞适合重组EBV克隆繁殖，是探测EBV遗传学的有效工具，使EBV作为基因治疗的载体成为可能[10]。本实验中，感染上皮细胞前，Akata细胞以0.5%山羊抗人降解血清预处理，目的即是产生大量重组EBV。由于Akata细胞中含另一个药物敏感基因(大T基因)，因此培养基中加人1pmol的更昔洛韦后，Akata细胞被除去。用Imai等[11]创立的密切接触法使人胃上皮细胞系GES-1感染重组EBV，用碱裂解法获得质粒，经过酶切鉴定后采用脂质体介导法将PAR-2基因转入GES-1细胞，以pcDNA3空载体质粒转染同一细胞为对照，由于pcDNA3携带GADPH基因，因此也具有G418抗性。经过G418筛选得到EBV感染和PAR-2基因转染的阳性克隆。对感染和转染细胞进行鉴定，用荧光(ME)和辣根过氧化物酶(HIiP)两种标记方法，细胞均被染成亮绿色或棕褐色，说明感染和转染获得成功，细胞均为阳性克隆。本实验中，用细胞计数和Mil两种方法测定细胞生长曲线，结果均显示从第3天开始EBV感染组与c-myc基因转染组细胞生长速度与对照组相比明显加快，并且随着培养时间的延长，这一差距越来越明显，到第7天EBV感染组细胞达到3.85&105个，几乎为对照组细胞数量的2倍，PAR-2基因转染组细胞数为3.14&105个，与感染组相比差异无显著性。细胞周期测定显示感染与转染组细胞S期细胞数目增多，两组之间差异无显著性，说明处于增殖期的细胞较多，此结果与细胞生长曲线结果相一致。经过荧光染色发现EBV感染细胞中有c-myc基因表达，提示EBV感染上皮细胞后可能通过某种方式上调PAR-2基因，引起其他癌基因变化，进一步影响细胞周期，使细胞增殖加快，从而使细胞发生永生化。实验中EBV感染的GES-1细胞发生明显形态学改变，由原来的短梭形变得更为饱满，细胞及细胞核体积明显增大，核浆比增大，细胞增殖迅速，细胞生长的接触性抑制不明显，说明EBV感染的细胞已经具有肿瘤细胞的某些特性。正常细胞生长依赖锚泊，有密度依赖抑制或接触抑制，肿瘤细胞则缺乏这种生长限制，甚至可在半固体琼脂中成悬浮生长，不需要依附固定表面，不受密度限制，可持续分裂堆积生长。软琼脂集落形成试验是测定细胞成瘤性的一种有效方法。单细胞在体外持续增殖6代以上所组成的细胞群体，称为集落或克隆，可含有50个以上的细胞，大小在0.3~1.0mm之间。通过计数集落形成率，可对细胞的增殖潜力做定量分析[11]。本实验中软琼脂中未见有细胞集落形成，提示EBV感染虽然可使胃上皮细胞增殖加快，但尚未转化为肿瘤细胞，即胃上皮细胞尚未发生癌变。究其原因，可能是因为实验中EBV感染上皮细胞的时间相对较短，而EBV相关胃癌的发生可能与EBV的长期潜伏有关。另外，肿瘤发生过程中癌基因与抑癌基因的相互作用也是一个漫长的发展过程。这种增殖加快的上皮细胞是否属于癌前病变的细胞，有待进一步研究。综上所述，EBV相关胃癌的发生及发展过程是十分复杂的。EBV感染胃上皮细胞后，表达诸如BARF1之类的病毒基因，通过这些基因产物激活c-myc、PAR-2基因等癌基因及一系列抑癌基因，进而影响细胞周期，细胞增殖加快，再在某些因素的影响下转变为肿瘤细胞。因此，PAR-2基因基因可能是EBV阳性胃癌发生发展过程中的关键介导基因。(本文彩图见封三)
【参考文献】
& 　　1DI Burke AP,Yen I'S,Shekitka KM,et al. Lymphoepithelial carcinoma o' the stomach with Epstein-Bar virus demonstrated by polymerise chain reaction. Mod Pathol,):377-380.
　　2Ishii H，Gobe G，Kawakubo Y，et al. Interrelationship between stein-Barr virus infection in gastric carcinomas and the expression of optosis-associated proteins. Histopathology，):111-119.
　　3Shimizu N，Tanabe-Tochikum A，Kuroiwa Y，et al. Isohrt-Ep- stein-Barr virus (EBV)-negative cell clones from the EBV positive Bur-kitt's lymphoma (BL) line Akata: malignant phenotypes of BL cells，dependent.EBV J Virol,):.
　　4Imai S，Koizumi S，Sugiura M，et al. Gastric carcinoma:monoclonal epithelial malignant cells expressing Epstein-Barn virus latent infection protein. Proc Nail Acad Sci USA，):.
　　5Zur Hausen A，Brink AA，Craanen ME，et al. Unique transcription pattern of Epstein-Barr virus (EBV) in EBV-carrying gastric adenocarcinomas: expression of the transforming BARFI gene. Cancer Res，):.
　　6Sugiura M，Imai S，Tokunaga M，et al. Transcriptional analysis of Ep steirr-Barr virus gene expression in EBV-positiunique viral latency in the tumour cells. Br J Cancer，): 625-631.
　　7Wei MX，Moulin JC，Decaussin G，et al. Expression and tumorigenici-ty of the Epstein-Barr virus BARFI gene in human Louckes B-lympho-cyte cell line. Cancer Res，):.
　　8Imai S，Nishikawa J，Takada K. Cell-to-cell contact as an efficient mude of Epstein-Barr virus infection of diverse human epithelial cells. J Viral，):.
　　9U XN，Du ZW，Huang Q，et al. Growth-inhibitory and ditferentitation inducing activity of dimethynomtamide in cultured human malignant cells. Neurosuegery，):.
　　10Fujimoto D，hirono Y，goi T,et al.Expression of protease activated receptor-2(PAR-2)in gastric cancer. J Surg Oncol，):139-144.
　　11Wang H，Wen S,Bunnett NW，et al. protease activated receptor-2 induces cyclooxygenase-2 expression through β-catenin and cyclic AMP-response element-binding protin. J Biol Chem，):809-815.
日期：日 - 来自[]栏目
前不久，由四川大学、香港中文大学主办，四川大学―香港中文大学生殖医学联合实验室、四川大学华西第二医院、香港中文大学上皮细胞生物学研究中心等承办的“2012年生命科学前沿国际研讨会”在四川举行。本次研讨会以“生殖与发育及相关疾病的分子与细胞机制：转化医学时代的研究策略”为主题，来自美国、日本、澳大利亚、加拿大、中国香港、中国台湾和中国大陆知名大学、医院、研究所的专家共同探讨如何利用多学科交叉与多种技术手段，并应用转化医学的思路，通过临床与基础研究一体化的模式，从细胞与分子层面进一步揭示疾病的分子机制，为疾病诊断和个体化治疗服务。
&
&
&
推动生命科学发展
&
&
&
上皮细胞覆盖机体表面和多个器官管腔内表面，是机体的四大组织细胞之一。各种器官和组织功能的正常发挥取决于它们上皮细胞的性质和功能，上皮细胞功能紊乱与缺陷导致机体重要生理功能的异常，引发各类疾病、感染甚至肿瘤的发生。从生理角度上看，上皮与多种生命现象有关，如附睾上皮与精子成熟，子宫内膜上皮与胚胎着床，黏膜上皮与机体防御免疫等。从分子机制上看，这些过程又涉及信号转导，基因调控与表达。
&
&
&
“因此，对上皮细胞的研究涉及生理学、免疫学、细胞生物学、发育和生殖生物学、分子生物学等多个学科，因而成为生命科学中一个重要的多学科交叉领域，对推动生命科学发展具有重要意义。”国家自然科学基金委员会一位负责人对《中国科学报》记者说。
&
&
&
1999年7月，在国家自然科学基金委员会的大力支持和协助下，香港中文大学和军事医学科学院共同创建了我国第一个“上皮细胞生物学研究中心”。十几年来，该中心以上皮细胞作为多学科交叉的切人点，致力于将功能基因组学、生殖生物学、肿瘤生物学、免疫学、干细胞生物学等不同学科的研究融合到上皮细胞生物学相关的领域，并取得了一系列突破性进展，在相关疾病发生机制研究上有重要发现，并建立了新的理论。
&
&
&
该中心关注世界生命科学研究的最新进展，为推动学术交流与合作，中心创办了“生命科学前沿国际研讨会”，十余年来，该研讨会在北京、香港、台湾、重庆、郑州、青岛、长沙、宁夏等地举办多届，得到国内外同行的肯定，有效地推动了多方面实际性的合作。
&
&
&
“这有助于加深对上皮细胞生物学的认识，并推动相关学科的发展。”香港中文大学教授、香港中文大学上皮细胞生物学研究中心主任陈小章对《中国科学报》记者说。
&
&
&
取得系列突破
&
&
&
上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，其功能紊乱与缺陷会导致多种疾病发生，因此研究上皮细胞与各类生物活性分子及相关细胞的相互作用，揭示其调控的分子与细胞基础，阐述各类上皮细胞功能及其在病变过程中信号转导机制的共性、特异性及其变化，是上皮细胞生物学的重要研究内容。
&
&
&
上皮细胞对机体多个器官、系统具有重要生理意义，并参与了肿瘤等疾病的发生。该研究中心以上皮细胞作为多学科交叉的切入点，在多个学科领域均取得重要突破，如中科院上海生物化学研究所有关附睾特异表达新基因功能研究中，通过建立附睾上皮细胞和精子的共培养体系，发现这个基因产物对精子运动有启动作用，并在细胞水平上阐明了其作用机制。
&
&
&
该中心与浙江省医学科学院、南京医科大学、浙江大学、香港大学和四川大学等单位的合作，从上皮细胞对生殖系统中精子和卵子发生、结合、胚胎发育和胚胎着床等进行研究，证明了上皮细胞对生殖事件发生的重要意义。此外在免疫防疫、功能基因、癌症防治等研究领域，通过上皮细胞及相关技术均取得了重要突破。
&
&
&
“如果以单一学科的研究方法和思路进行研究，这些突破都无法取得。”陈小章说。
&
&
&
结缘科学基金
&
&
&
“我们国家第一个上皮细胞生物学研究中心成立于1999年，但中心的策划和筹备以及国家自然科学基金委员会在其中的支持与协助却要追溯到五六年前。”陈小章说。
&
&
&
1993年，陈小章从美国到香港中文大学生理学系任教，便开始了解我国在上皮细胞相关领域研究的进展。但出乎陈小章意料的是：在走访内地几个大城市的主要研究单位或院校时，竟找不到国内的同行。就这个发现，陈小章向当时正在香港访问的国家自然科学基金委员会国际合作局汤锡芳先生提起。
&
&
&
“没想到从此开始了我与国家自然科学基金委员会的渊源，也开始了国家自然科学基金委员会对我国上皮细胞生物学相关领域研究和发展的关注和支持。”陈小章说。
&
&
&
上皮细胞研究已经成为生命科学中一个多学科交叉的基础研究领域，在世界上愈来愈引起关注。然而，当时国内对上皮细胞所进行的多手段、多途径、多侧面研究还很缺乏。通过与多个学科专家商讨，要在我国建立一个旨在推动上皮细胞生物学和相关学科在我国的发展，提高我国在相关领域基础研究水平和国际竞争力的上皮细胞生物学研究中心的构思逐渐在陈小章的头脑中形成。
&
&
&
“在酝酿成立研究中心的过程中，国家自然科学基金委员会有关领导，包括基金委前主任张存浩院士和生命科学部原副主任叶鑫生教授，认真听取了我关于国内该领域研究欠缺的状况介绍后，又组织有关专家进行了论证，认为有必要推动上皮细胞生物学相关研究在我国的发展。”陈小章说，“时任基金委港澳台事务办公室主任的汤锡芳也在关键时刻起到重要推动作用，推荐军事医学科学院与香港中文大学的合作，使研究中心的构思进一步具体化。”
&
&
&
就这样，在国家自然科学基金委员会的直接支持和协助下，香港中文大学和军事医学科学院合作创办了我国第一个上皮细胞生物学研究中心。
&
&
&
该中心成立十多年来，已拥有遍及全国和世界各地的合作网络，并成为我国在该领域研究发展的一个学术交流、人材培养以及合作研究基地。其中，与中国科学院上海生命科学院生化研究所的一项合作研究获得美国CONRAD研究基金，研究成果2001年发表在美国《科学》杂志上，充分体现了中心合作研究的优势。近年来，该中心通过广泛合作，在一系列研究中取得突破性的进展，相关成果先后发表在《自然医学》、《自然细胞生物学》、《柳叶刀》及《美国科学院院刊》等国际权威杂志上。
&
&
&
“如果没有国家自然科学基金委员会领导对上皮细胞生物学在我国研究状况的高度重视和关注，没有基金委工作人员的热心协助，中心的成立和今天的发展壮大都是不可能的。”陈小章说。
&
&
&
回顾研究中心的发展历程，陈小章对《中国科学报》记者说：“科学基金的支持使我国上皮细胞生物学研究迈开了艰辛而又关键性的第一步。我们相信，在国家自然科学基金委员会的继续支持下，研究中心将不断促进内地与香港地区及世界的交流，加深对各类相关疾病机制的理解并带动新药研究，为提高我国在该领域的研究水平作出应有的贡献。”&'
日期：日 - 来自[]栏目
目的 研究瘦素(Leptin)对小鼠着床窗口期子宫内膜上皮细胞分泌金属蛋白酶-9(MMP-9)及细胞粘附分子-1(ICAM-1)的影响。 方法 离体培养着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞，用不同浓度Leptin干预，通过免疫组织化学SP法对子宫内膜上皮细胞MMP-9、ICAM-1蛋白的表达进行检测。 结果 (1)随着Leptin浓度的增加，原代培养的子宫内膜上皮细胞分泌MMP-9表达量呈浓度依赖性升高(P<0.01)。(2) 随着Leptin浓度的增加, 原代培养的子宫内膜上皮细胞分泌ICAM-1表达量呈浓度依赖性升高(P0.01)。 结论 一定水平的Leptin可以促进子宫内膜上皮细胞MMP-9及ICAM-1的分泌，有利于胚胎着床。
【关键词】& 瘦素;子宫内膜上皮细胞;免疫组化;金属蛋白酶-9;细胞粘附分子-1;小鼠
[Abstract] Objective To investigate the effect of Leptin on matrix metalloproteinases-9(MMP-9) and intercellular adhesion molecule-1(ICAM-1)secreted from endometrial epithelial cells during embryo implantation widow stage in mice.Methods Endometrial epithelial cells from mice in the embryo implantation stage were fertilized in vitro. The endometrial epithelial cells were treated with Leptin. The immunohistochemical method was applied to test the expression of MMP-9, ICAM-1 in the endometrial epithelial cells.Results With the increase in the concentration of Leptin, both the amount of MMP-9 secreted from the endometrial epithelial cells fertilized in vitro and the amount of ICAM-1 secreted from the endometrial epithelial cells fertilized in vitro increased in a dose-dependent manner(P<0.01).Conclusion It can be concluded that Leptin up to a certain level can increase the expression of MMP-9 and ICAM-1 secreted from endometrial epithelial cell in mice, thus improving embryo implantation.
　　[Key words] L endometr immunoMMP-9; ICAM-1; mice
　　近年的研究表明，多种细胞因子和激素在胚胎生长发育及妊娠母体中起着不可低估的调控作用。其中，瘦素(Leptin)是近年发现的Ⅰ型细胞因子，是肥胖基因的产物，由白色脂肪细胞分泌的一种含146个氨基酸的蛋白质。Margetic等[1]报道Leptin通过调节下丘脑-垂体-性腺的功能影响性激素的合成和分泌，也可通过直接或间接的外周作用对生殖系统功能产生影响，抑或通过直接结合卵泡细胞膜表面瘦素受体影响细胞的功能，但其具体机制尚不明了。本研究拟通过免疫组化方法检测围着床期小鼠子宫内膜上皮细胞在不同浓度Leptin作用下MMP-9、ICAM-1的表达量，以探讨Leptin在胚胎着床过程中的可能调控作用。
　　1 材料与方法
　　1.1 材料
　　1.1.1 实验动物
　　成年昆明种雌性小白鼠，6～8周龄，体重25～30g。雄性3～4月龄，体重40～50g。由烟台绿叶生物制药公司实验动物中心提供[许可证号：SCXK(鲁)]。实验动物房光、暗周期均为12h，饲养温度为 24℃～26℃，喂普通小鼠饲料，自由摄食饮水。
　　1.1.2 试剂
　　DMEM/F12培养基 (Hyclone，美国);胎牛血清(FBS)( Gibco，美国 );双抗(Hyclone，美国);孕马血清促性腺激素(PMSG)(宁波第二激素厂);人绒毛膜促性腺激素(HCG) (烟台北方制药厂) ;鼠重组瘦素(Leptin)(Sigma，美国);MMP-9、ICAM-1兔抗鼠单克隆抗体(武汉博士德);SP免疫组化试剂盒(北京中杉金桥);DAB 试剂盒(Invitrogen，美国)。
　　1.2 方法
　　1.2.1 小鼠子宫内膜细胞的原代培养与鉴定
　　取成年雌性昆明种小白鼠，体重25～30g，4～5pm腹腔注射PMSG 10IU，48h后腹腔再注射HCG 10IU。雌雄按 2:1合笼 ,自然交配 ,次晨查见阴栓者定为妊娠第一天。取妊娠第四天雌鼠脱颈处死，按照石运芝[2]报道的方法培养上皮细胞并做鉴定。细胞计数以1&105/ml加入含10%灭活FBS的DMEM/F12培养液，接种于六孔培养板中(板内放有多聚赖氨酸包被的盖玻片)。置入37℃、95%空气、5%CO2培养箱中培养。
　　1.2.2 加入Leptin进行调控
　　24h细胞生长完全贴壁后，每孔更换含不同浓度Leptin的DMEM/F12的培养液1ml。设置正常对照组，每个组设五孔。培养液中Leptin浓度分别为10ng/ml、50ng/ml、500ng/ml。培养48h后，进行检测。
　　1.2.3 细胞免疫组织化学染色
　　取出盖玻片，PBS漂洗5min&3次，4%多聚甲醛室温下固定20min，PBS漂洗5min&3次，3%H2O2 室温下封闭15min，PBS漂洗5min&3次，10%的正常山羊血清37℃封闭30分别滴加一抗MMP-9(1:200)、ICAM-1(1:150)，4℃冰箱内孵育过夜。滴加生物素化羊抗兔IgG(1:200)，37℃孵育30PBS漂洗5min&3次，DAB 显色液显色10苏木素复染，中性树胶封片后显微镜下观察。阴性对照以PBS代替一抗，其余步骤相同。
　　1.3 图像处理和统计学分析
　　采用IMAGE-PRO PLUS图像分析系统对阳性细胞进行分析，每个组随机取5张片子，每张片子选择5个不重复视野定量分析，结果以阳性细胞数及平均光密度(OD值)表示。采用SAS统计软件(9.1.3版)分析实验结果，所获数据用x&s表示，进行方差分析及t检验。
　　2 结果
　　2.1 Leptin对小鼠子宫内膜上皮细胞分泌MMP-9蛋白的影响
　　见表1、图1。原代培养的着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞经10ng/ml、50ng/ml、500ng/ml Leptin处理后，分泌的MMP-9蛋白主要分布在上皮细胞胞质内。因为细胞表达的蛋白量不同，经DAB染色显示出深浅不同的棕黄色颗粒。与空白对照组相比，所有实验组MMP-9蛋白表达量都增加，差异有统计学意义(P<0.01);随着Leptin浓度的增加，上皮细胞MMP-9蛋白分泌量的增加，呈现一定的剂量效应关系，差异有统计学意义(P<0.01)。
　　2.2 Leptin对小鼠子宫内膜上皮细胞分泌ICAM-1蛋白的影响
　　见表1、图2。原代培养的围着床期小鼠子宫内膜上皮细胞经10ng/ml、50ng/ml、500ng/ml Leptin处理后，上皮细胞分泌的ICAM-1蛋白与二抗结合出现阳性反应，阳性产物呈棕黄色颗粒状，主要分布在上皮细胞胞质内。因为细胞表达的蛋白量不同，经DAB染色后显示出深浅不同的棕黄色颗粒。与空白对照组相比，随着Leptin浓度的增加，上皮细胞ICAM-1蛋白分泌量增加，呈现一定的剂量效应关系，与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。表1 不同浓度Leptin干预后小鼠子宫内膜上皮细胞MMP-9、ICAM-1表达
　　3 讨论
　　哺乳动物胚胎对子宫内膜的粘附和植入是非常复杂的生理过程。小鼠胚胎&着床窗&出现在妊娠第4～5天，持续24h左右，受到各种细胞因子、生长因子和激素凋节。MMP-9是MMPs家族成员之一，在早孕母胎表面的基质细胞、上皮细胞和蜕膜细胞中均有表达。具有酶解作用消化蜕膜基质、基底膜，在胚胎植入时溶解ECM以利着床[3]。哺乳动物模型研究表明，MMP-9对胚胎种植起重要作用。MMP-9敲除的小鼠生育力下降[4]。MMP-9抗体能阻止ECM降解，使囊胚生长停止，阻碍胚泡与子宫内膜上皮之间的粘附。可见，MMP-9在胚胎对子宫内膜着床中起着重要作用。实验中笔者用Leptin作为调控因素，探讨不同浓度的Leptin对着床窗口子宫内膜容受性的影响，发现随着Leptin浓度的增加，小鼠子宫内膜上皮细胞分泌MMP-9蛋白的表达量亦随之增加，具有量效关系。这与Gonzalez[5] 报道瘦素可以明显增强MMP-9的活性和国内徐可树[6]的研究是相符的。根据实验还得出，Leptin浓度在10～500ng/ml可使小鼠子宫内膜上皮细胞MMP-9的表达量稳步增长具有浓度依赖性关系。说明一定水平的Leptin可以与着床窗口期子宫内膜上皮细胞瘦素受体结合，通过影响MMP-9的表达，作用于滋养细胞识别粘附子宫内膜，并降解基质，侵入内膜从而参与胚泡着床。
　　细胞粘附分子-1( ICAM-1)属于免疫蛋白超家族的主要成员，是一种重要的细胞粘附分子。在子宫内膜上皮细胞、蜕膜、滋养层细胞上均有表达。主要作用是介导细胞与细胞间的粘附，且对胚胎着床过程中介导子宫内膜容受性的建立和胚泡在子宫内膜的粘附发挥着重要作用。本文研究发现围着床期小鼠子宫内膜上皮细胞ICAM-1的表达随着Leptin浓度的增加，表达量逐步升高。Leptin的浓度在10～50ng/ml 之间时，可诱导ICAM-1表达上升，且具有浓度依赖性关系。据此可以看出一定浓度的Leptin可以上调ICAM-1的表达，促进其与配体如淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)和巨噬细胞抗原复合体-1(Mac-1)等结合来介导胚泡与内膜间的粘附，且ICAM-1/LFA-1对话导致前炎性细胞因子迁移至着床位点，促使蜕膜的树突状细胞成熟，诱发局部辅助T细胞(Thl)增加并参与母胎面的免疫耐受形成，避免了子宫内膜对胚泡的免疫排斥作用，从而调节子宫内膜的容受性，进而有利于胚泡的着床。笔者研究还发现Leptin的浓度在500ng/ml时，ICAM-1的表达与对照组比较无差异。推断是否因为着床窗口期的子宫内膜因瘦素受体饱和从而不再刺激ICAM-1的表达，还值得进一步研究。
　　(本文图片见封三)
【参考文献】
& 　1 Margetic S, Gazzola C, Pegg GG, et al. Leptin:a review of its peripheralactions and interactions. Int J Obes Relat Metab Disord, ):.
　　2 石运芝，刘凯. 着床窗口小鼠子宫内膜上皮细胞的原代培养及形态学观察. 泰山医学院学报, ):570-572.
　　3 Elsebeth Staun-Ram, Shlomit Goldman, Diana Gabarin，et al. Expression and importance of matrix metalloproteinase 2 and 9(MMP-2and -9) in human trophoblast invasion. Reprod Biol Endocrinol, ):59-61.
　　4 Opdenakker G,Vanden Steen PE,Dubois B,et al.Gelatinase B functions as regulator and effector in leukocyte biology.J Leukoc Biol,):851-859.
　　5 Gonzaiez RR,Devoto L,Campana A,et al.Effects of Leptin,interleukin-1α，interleukin-6,and transforming growth factor-on markers of trophoblast invasive phenotype:integrins and metalloproteinases.Endocrine,):157.
　　6 徐可树，钟少平.Leptin对人早孕期滋养细胞CXCR-4、MMP-9及VEGF表达的影响.中国妇幼保健，):.
日期：日 - 来自[]栏目
目的 研究苦杏仁甙(Amygdalin)对体外培养的兔晶状体上皮细胞增生的影响。方法 取第2代对数生长期的兔晶状体上皮细胞，培养24h后，加入不同浓度的苦杏仁甙(4.0、2.0、1.0、0.5、0.25、0.125mg/L)作用24h后，采用MTT法观察苦杏仁甙对兔晶状体上皮细胞增生的影响。结果 苦杏仁甙随着浓度的增加，兔晶状体上皮细胞增生的抑制作用逐渐增强。结论 苦杏仁甙能有效抑制体外培养的兔晶状体上皮细胞增生，其抑制作用在一定浓度范围内有剂量依赖性。
【关键词】& 苦杏仁甙;兔晶状体上皮细胞;后囊浑浊;MTT比色法
The effects of Amygdalin on proliferation of lens epithelial cells in vitro
　　ZHOU Fan，ZENG Xianli，PENG Min.Eye Center of Wangwang Hospital in Hunan,Changsha 410016,China
　　[Abstract] Objective To study the effects of Amygdalin on the proliferation of rabbit lens epithelial cells(RLECs)in vitro.Methods RLECs were primary cultured.After the second generation of RLECs were incubated for 24 hours，we added different concentraions of Amygdalin for 24 hours.The cell proliferation of RLECs was determined by MTT assay.Results The inhibitory rates of RLECs proliferation were increased in dose.dependent ways by Amygdalin in vitro.Conclusion Amygdalin could effectively inhibit the proliferation of RLECs，and it might have broad prospects in the prevention of posterior capsular opacification.
　　[Key words]rabbit lposterior aMTT assay
　　后囊浑浊(posterior capsular opacification，PCO)是现代白内障囊外摘出人工晶状体植入术后最常见的并发症。后囊混浊的发生主要由于术后残留的晶状体上皮细胞(lens epithelial　cells，LECs)发生增生及后囊的纤维化有关。其发生率往往与年龄相关，年龄越轻，发生率越高。在成人，术后发生率为30%～50%，在儿童则为100%。因此，如何有效地抑制晶状体上皮细胞增生对于PCO的防治具有重要意义。苦杏仁甙(Amygdalin)是中药桃仁的主要成分，是一种能生氰(cyanogensic)的化合物。存在于水果果核和坚果中。有研究表明它能有效抑制纤维母细胞增生[1]，而且可以明显地抑制组织的纤维化[2]。这里我们采用MTT比色法研究其对体外培养的兔晶状体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells，RLECs)增生的影响，为进一步探索其作用机制提供理论依据。
　　1 资料与方法
　　1.1 试剂与仪器 主要试剂苦参碱购自西安天丰生物科技有限公司;胰蛋白酶、小牛血清、DMEM干粉培养基、噻唑蓝、二甲基亚砜。二氧化碳培养箱、倒置相差显微镜、超净工作台、自动酶标读数仪(E2500型，美国BioRad)。
　　1.2 细胞培养方法 健康雄性新西兰大白兔5只，体重1.4～1.6kg，以空气栓塞法处死。立即取出眼球置于1∶8000的庆大霉素生理盐水中，无菌手术台上将其晶状体取出。在手术显微镜下，剥离晶状体囊膜，剪为大小约1mm2的小块，均匀平贴于培养皿中，间隔3～5mm。放置2～3h待囊贴牢后后，加入含20%小牛血清的DMEM培养基至刚好浸没囊膜，置入二氧化碳培养箱培养。3～5天换液1次，待细胞长满后，用0.25%胰蛋白酶消化。按1∶2的比例接种到培养瓶中。倒置显微镜下动态观察细胞生长情况，取第2代细胞进行实验。
　　1.3 细胞处理 取第2代RLECs，用胰酶消化并调整细胞浓度为5&104个/ml，接种于96孔培养板，每孔200&l。置入二氧化碳培养箱，培养24h静待细胞贴壁;加入1g/L苦杏仁甙PBS溶液并调整浓度为4.0、2.0、1.0、0.5、0.25、0.125mg/L，空白对照组则加入等量的PBS溶液，培养24h后，每孔加入MTT(5mg/L)溶液20&l，继续培养4h后中止培养，吸去孔内培养上清液，加入150&l二甲基亚砜溶液，室温下微量振荡器振荡10min，自动酶标仪比色(波长570nm)，测定吸光值。以此计算细胞存活率和细胞抑制率(细胞存活率%=药物组平均吸光度值/正常对照组平均吸光度值&100%，细胞抑制率%=100%-细胞存活率)。
　　1.4 统计学分析 本研究获取的数据采用(&s)表示，用SPSS13.0进行成组资料的方差分析进行统计学分析，对检验显著性水准为&=0.05。
　　2 结果
　　2.1 不同浓度的苦杏仁甙溶液对RLECs增殖的影响 见表1。表1 不同浓度的苦杏仁甙溶液对RLECs增殖的影响注：经统计学处理，对照组与各试验组比较差异有显著性(P<0.05);各浓度组组间比较差异有显著性(P<0.05)
　　2.2 不同浓度的苦杏仁甙溶液对RLECs增殖的影响 见图1。我们MTT比色法检测显示，苦杏仁甙对体外培养的兔晶状体上皮细胞增生有抑制作用(表1、图1)，在同样处理24h的时间段内，细胞的存活率随苦杏仁甙浓度梯度的上升呈逐渐下降的趋势，其对细胞增殖的抑制能力也逐步增强。
　　图1 不同浓度苦杏仁甙溶液对RLECS增殖的影响
　　3 讨论
　　目前，对于晶状体手术后晶状体后囊浑浊的抑制研究已经非常深入。其发生机制与手术刺激、残存的晶状体上皮细胞的特性、眼房水屏障的破坏及多种细胞因子的作用等有关。人们有针对性地对后囊混浊的特点进行多种思路的抑制研究，应用抗代谢药物，如5FU、秋水仙碱、甲氨蝶呤、柔红霉素、丝裂霉素等。这些药物的毒副作用较大，对眼内组织的影响较大，目前还没有较好的解决方案，限制其临床应用。
　　苦杏仁甙属于芳香族氰甙，存在于多种植物的种子中，其抗肿瘤、抗纤维化及抗氧化作用已经得到多方的证实，有研究表明，它可以有效抑制人胎肾成纤维细胞的增殖，并可以诱导其凋亡[3]。我国洪长福等研究证实其能有效地延缓肺纤维化的形成[4]。我们的实验结果证实苦杏仁甙对晶状体上皮细胞的增生有明显的抑制作用，并具有良好的剂量依赖性，对晶状体上细胞的抑制效果相当的明显。苦杏仁甙分子结构含有两个分子的葡萄糖，一个分子的氰氢酸和一分子的苯甲醛。在体内苦杏仁甙被&糖苷酶(Glucosidase)作用分解成其组成成分，释放出氰化物而发挥其抑制作用，氰化物本身具有很强的细胞毒性，能抑制线粒体的功能，使细胞窒息死亡，因此，作用较强。由于体内还有种酶叫硫氰酸酶(rhodanase)。硫氰酸酶可以将游离的氰化物变成无毒的硫氰酸化合物，其应用有较高的安全性。因此，我们认为苦杏仁甙在防治后囊浑浊方面具有一定的应用前景。但其安全使用的方法是浸泡即将植入的人工晶体还是按一定比例加入白内障手术的灌注液中，仍需进一步研究。
【参考文献】
& 　1 宋月莲，郑应昭，李素慧.中药桃仁对体外纤维母细胞增生的抑制作用的实验研究.中西医结合眼科杂志，.
　　2 郭君其，盛明雄，谭建明，等.苦杏仁甙抑制大鼠肾脏纤维化的实验研究.实用医学杂志，)：.
　　3 屈燧林，方勤，陈高翔，等.汉防己甲素、川芎嗪和苦杏仁甙对人肾成纤维细胞的影响.中华肾脏病杂志，)：1820.
　　4 洪长福，娄金平，周华仕，等.桃仁提取物对大鼠实验性矽肺纤维化的影响.浙江省医学科学院学报，)：711.
日期：日 - 来自[]栏目
经过形式审查、同行评议、专家评审会答辩和国家自然科学基金委员会委务会审批等程序，国家自然科学基金委员会生命科学部重大项目（生命科学与医学交叉）&& &上皮细胞转分化过程的生理调控机制&日前启动。项目由浙江大学教授冯新华领衔主持。
上皮细胞间质转分化（EMT）是一个多步骤、有序的、可高度调节的过程，许多生长因子都能诱导其发生。TGF-&是胚胎发育、成纤维化以及肿瘤转移过程中上皮细胞间质转分化发生的一个关键诱导子，但TGF-&等信号通路如何调控上皮细胞间质转分化的发生和逆转的分子机制尚不清楚。为此，国家自然科学基金设立重大项目进行资助，资助期限为2011年1月至2014年12月，资助经费为1000万元。项目公开受理时，吸引了国内该领域较多高水平科研队伍的参与，基金委共计收到项目申请8项，课题申请22项，参加申请的依托单位多达18家，竞争十分激烈。
此次获得资助的重大项目，将以TGF-&信号通路作为切入点并将延伸到整个分子信号网络，采用分子、细胞、动物模型以及基因组筛选等方法，围绕&上皮细胞极性调控与EMT形成的分子机制&、&炎症与细胞内外环境调控EMT的机制&以及&TGF-&等信号通路诱导、维持和逆转上皮细胞转分化过程的分子机制&等三个课题开展研究。拟通过探讨上皮细胞间质转分化过程中细胞极性信号受调控的机制及其极性蛋白直接、间接调控下游信号通路的机制，从而获得上皮细胞间质转分化过程中控制及维持上皮细胞间质转分化的极性信号通路，以期发现新的上皮细胞间质转分化标志物及分子阻遏物。通过体内、体外上皮细胞间质转分化模型，明确上皮细胞间质转分化部位的炎症环境，阐明炎症因子和炎症细胞通过TGF-&信号通路调控上皮细胞间质转分化的机制，以及上皮细胞间质转分化过程中炎症环境、内质网应激及AMPK信号通路的相互调控关系。通过研究TGF-&信号通路（包括Smad途径、非Smad途径）和整个信号网络如何交叉协同作用和调控上皮细胞间质转分化的分子机制，试图发现新的上皮细胞间质转分化调控基因，从而更加深入地了解上皮细胞间质转分化在相关的胚胎发育和疾病发生、发展过程中的重要作用及分子机制。（殷文璇）
《科学时报》 ( A4 科学基金)
日期：日 - 来自[]栏目&&&&&&&&国家自然科学基金委生命科学部重大项目（生命科学与医学交叉）――&&“上皮细胞转分化过程的生理调控机制”的评审工作已顺利结束。此项目吸引了国内该领域较多高水平科研队伍的参与，共计收到项目申请8项，课题申请22项，参加申请的依托单位多达18家，竞争十分激烈。经过形式审查、同行评议、专家评审会答辩和委务会审批等评审程序，由浙江大学冯新华教授领衔主持的申请项目&&“上皮细胞转分化过程的生理调控机制”&&最终获得资助。&&
　　上皮细胞间质转分化(Epithelial-Mesenchymal&&Transition，EMT)是一个多步骤、有序的、可高度调节的过程，许多生长因子都能诱导EMT的发生。TGF-β是胚胎发育、成纤维化以及肿瘤转移过程中EMT发生的一个关键诱导子，但TGF-β等信号通路如何调控EMT的发生和逆转的分子机制尚不清楚。此次获得资助的重大项目，将以TGF-β信号通路作为切入点并将延伸到整个分子信号网络，采用分子、细胞、动物模型以及基因组筛选等方法，围绕“上皮细胞极性调控与EMT形成的分子机制”、“炎症与细胞内外环境调控EMT的机制”以及“TGF-β等信号通路诱导、维持和逆转上皮细胞转分化过程的分子机制”等三个课题开展研究。通过探讨EMT过程中细胞极性信号受调控的机制、及其极性蛋白直接、间接调控下游信号通路的机制，从而获得EMT过程中控制及维持EMT的极性信号通路，以期发现新的EMT标志物及分子阻遏物；通过体内、体外EMT模型，明确EMT部位的炎症环境，阐明炎症因子和炎症细胞通过TGF-β信号通路调控EMT的机制，以及EMT过程中炎症环境、内质网应激及AMPK信号通路的相互调控关系；通过研究TGF-β信号通路（包括Smad途径、非Smad途径）和整个信号网络如何交叉协同作用和调控EMT的分子机制，试图发现新的EMT调控基因，从而更加深入地了解EMT在相关的胚胎发育和疾病发生、发展过程中的重要作用及分子机制。日期：日 - 来自[]栏目共 11 页，当前第 1 页
1&&&&&&&&&&&
Copyright & 2008
All rights reserved. 医源世界 版权所有
医源世界所刊载之内容一般仅用于教育目的。您从医源世界获取的信息不得直接用于诊断、治疗疾病或应对您的健康问题。如果您怀疑自己有健康问题，请直接咨询您的保健医生。医源世界、作者、编辑都将不负任何责任和义务。
本站内容来源于网络，转载仅为传播信息促进医药行业发展，如果我们的行为侵犯了您的权益，请及时与我们联系我们将在收到通知后妥善处理该部分内容联系Email: