MH培养基的原理
　　MH培养基为MH琼脂培养基，微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母缩写，指的是水解酪蛋白。所以MH培养基也成为水解酪蛋白培养基。常用作培养基原材料，提供细菌生长所需的生长因子。　　　　MH培养基的原理：　　　　牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、维生素和氨基酸；可溶性淀粉吸收有毒的代谢产物。　　　　MH培养基的成分：　　　　酸水解酪蛋白/酸水解酪素17.5g　　　　牛肉浸膏粉2g　　　　淀粉1.5g　　　　琼脂12g　　　　MH培养基的用法：　　　　称取本品21.0g,加热溶解于1000ml?蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。　　　　MH培养基的质量控制：　　　　质量控制是用与常规实验相同的操作方法，测定质控菌株的抑菌环。应使用新鲜传代菌种。接种菌液的涂布方法等均同常规操作，测定的抗菌素种类也应与常规测定的种类相同。　　　　GPR105G蛋白偶联受体GPR105蛋白抗体　　　　GPR12G蛋白偶联受体GPR12蛋白抗体　　　　GPR110proteinG蛋白偶联受体GPR110蛋白抗体　　　　GPR125G蛋白偶联受体GPR125蛋白抗体　　　　GPCRRTAG蛋白偶联受体RTA蛋白抗体　　　　GPR155G蛋白偶联受体GPR155蛋白抗体　　　　GPR30G蛋白偶联受体GPR30蛋白抗体　　　　GPR86G蛋白偶联受体GPR86蛋白抗体　　　　GPCRHM74G蛋白偶联受体HM74蛋白抗体　　　　GMCL1L细胞样蛋白1样蛋白抗体　　　　phospho-GAB2磷酸化接头蛋白Gab2抗体　　　　phospho-GAB2磷酸化接头蛋白Gab2抗体　　　　GRIM19干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因抗体　　　　phospho-GAB2磷酸化接头蛋白Gab2抗体　　　　GALNT13多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶13抗体　　　　gammaAdaptin衔接蛋白&/&1-Adaptin抗体　　　　ELISA试剂盒
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医药、卫生
目的 体外试验检测左氧氟沙星对幽门螺杆菌(Helicobacter.pylori)的敏感性，并以克拉霉索和阿莫西林进行对照研究。方法 琼脂稀释法检测左氧氟沙星对52株幽门螺杆菌的最低抑菌浓度，同时比较在MH培养基pH为4．0、5．0、7．0条件下的MIC。结果 左氧氟沙星耐药菌株1．9％，阿莫西林耐药菌株11．5％，克拉霉索耐药菌株25％。同时对阿莫西林和克拉霉索耐药的菌株(9．6％)，对左氧氟沙星均敏感。左氧氟沙星耐药率明显低于克拉霉素(P＜0．01)，阿莫西林的耐药率也低于克拉霉素(P＜0．05实验六、抗菌药物的体外药效试验
（药敏试验）
各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同，同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性有差异，检测细菌对抗菌药物的敏感性，可筛选最有疗效的药物，用于临床对控制细菌性传染病的流行至关重要。此外，通过药物敏感试验可为新抗菌药物的筛选提供依据。药敏试验的方法很多，普遍使用的有滤纸片扩散试验（Kirby-Baueer Dice Diffusion）；最低抑菌浓度试验（Minimum Inhibitory Concentration, MIC）和最低杀菌浓度试验（Minimum Bactericidal Concentration, MBC）。
［目的要求］
1、熟悉体外抗菌试验操作技术。
2、掌握药物抗菌能力体外测定的常用方法及其用途。
［实验原理］
常用的体外测定药物抑菌能力的方法有两大类：琼脂渗透法与浓度系列稀释法。琼脂渗透法时利用药物能够渗透至琼脂培养基的性能，将实验菌混入琼脂培养基后倾注成平板；或将试验菌均匀涂于琼脂平板的表面，然后用不同的方法将药物置于已含试验菌的琼脂平板上。根据加药的操作方法不同而有滤纸片法、打洞法、管碟法及挖沟法等。经适宜温度培养后观察药物的抑菌能力。浓度系列稀释法时把药物稀释成不同的系列浓度，混入培养基内，加入一定量的试验菌，经适宜温度培养后观察结果，求得药物的最低抑菌浓度（MIC）。
1、细菌：所用细菌应包括主要致病菌。革兰氏阳性球菌包括金黄色葡萄球菌(产酶与不产酶菌株)、表皮葡萄球菌，链球菌、肠球菌等。革兰氏阴性球菌如淋球菌等。革兰氏阴性杆菌包括流感杆菌、肠杆菌科细菌8～10种，绿脓杆菌与其它假单孢菌属及不动杆菌属等，厌氧菌包括脆弱类杆菌、消化球菌和消化链球菌等。对临床应用有代表性的菌株数量，创新药应不小于1000株。其它类新药根据新药抗菌谱宽窄可作200-500株。试验时应包括有国际公认质控菌株(如金葡菌ATCC25925，大肠杆菌ATCC25922和绿脓杆菌ATCC27853等)。
2、培养基：选MH(Muelkr-Hintop)培养基。链球菌、流感杆菌需接种到巧克力琼脂平板或加5％羊血。淋球菌接种到哥伦比亚培养基上。
3、药物配制：试验样品与阳性对照药品均应用称重法求出效价并按盐基比例折算出实际效价。所试药物用磷酸缓冲液或灭菌注射用水溶解，配制成溶液。少数难溶药物可加少许相应助溶剂，再用缓冲液或灭菌注射用水稀释至所需浓度。
4、试验方法：
① 最小抑菌浓度(MIC)测定法，采用平皿或试管二倍稀释法测无细菌生长
平皿或试管中所含药物的最小浓度即为最小抑菌浓度。
② 最小杀菌浓度（MBC）测定法，先测出MIC，再依次存未见细苗生长
各管培养物分别吸取0.1ml，倾倒于平皿上，37再培养18小时，平皿上菌落数小于5个的最小稀释度的药物浓度即为最低杀菌浓度。
③ 杀菌曲线（KCs）实验 ，将所试菌液约105菌落计数单位(CFU／ml)
与抗菌药物混合，定量取样于平皿培养基，孵育后计算其活菌数，并绘制出时间杀菌曲线。实验应设空白对照管与已知药物对照试验。
5、培养条件对MIC的影响：
① pH值的影响，将培养基的pH调整，测定药物对所试细菌(临床常见致病菌)1～2株MIC的影响。
② 细菌接种量的影响, 在其它条件不变时改变细菌接种量，比较不同菌量对MIC的影响。
③ 血清蛋白结合的影响：如采用25％、50％、75％等不同的血清浓度与不含血清的培养基观察血清含量对MIC的影响。
［试验内容］
（一） 滤纸片法（圆纸片扩散试验）
［材料］无菌平皿1只, 无菌1ml吸管1支,无菌小滤纸片, 待检药（1个平板可做1种或多种药物实验）, 琼脂培养基（瓶装或定量分装15～20ml于大试管，灭菌，备用）, 实验菌肉汤培养基，镊子，95％酒精等。
① 琼脂培养基置于水浴中加热融化，冷却至50℃左右，用无菌操作法吸
取菌液（制备每只平板约需0.1～0.2ml）加入琼脂培养基中，迅速混匀，倾注于无菌平皿内，素转动平皿使细菌均匀分布其中，水平放置
待凝（也可预先在平皿中铺一层琼脂培养基作底层，冷却后再加一薄层含菌琼脂培养基，如此，可使抑菌圈更加清晰）。
② 镊子沾酒精后通过火焰，烧灼灭菌，反复3次，镊取无菌滤纸片，浸
沾药液，贴于平板表面，各纸片间的距离药大致相等。③37℃培养一昼夜后，观察此滤纸片周围有无抑菌圈，并量取其直径。抑菌圈即无菌生长区，药液在一定浓度范围内，抑菌圈的大小表示抑菌作用的强弱。
［结果判定］根据药物纸片周围有无抑菌圈及其直径大小，来判断该菌对各种药物的敏感程度。依次可分为：高度敏感，中毒敏感，低度敏感，不敏感四种。细菌对磺胺类药物的敏感度的标准，按Hawking所定，若磺胺药物浓度在每毫升10μg即能抑制细菌生长者，则该细菌对磺胺药很敏感；如需每毫升50μg才能抑制生长，为敏感；每毫升1000μg才能抑制为中度敏感；每毫升超过1000μg仍不能抑菌者，则为耐药菌株。
（二） 试管稀释法
［材料］菌种：金黄色葡萄球菌肉汤培养物；培养基：普通肉汤；抗菌药物：含青霉素64IU/ ml；其他材料：麦氏比浊管，灭菌1 ml刻度吸管，橡皮胶头，无菌试管。
［方法］以葡萄球菌对青霉素的敏感性为例。将1ml/管排成一列，编上19的管号，在第一个管内加入含64IU/ ml青霉素肉汤1 ml。混匀后吸取1 ml到第二管，混匀，再取1 ml至第3管，以此类推至第八管。第9管不含青霉素的肉汤做为对照管。然后每管加入0.1 ml含菌当量相当于麦氏比浊管第1管1/2的金黄色葡萄球菌（相当于1.5亿/ ml），操作术式见表
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水解酪蛋白胨(MH)肉汤
商品类别：药敏试验培养基
货 号 ：028040
价 格 ：您还不是会员登录
规 格 ：100g
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添加日期：
　　028040&水解酪蛋白胨(MH)肉汤
　　(Mueller Hinton Broth)
　　用 途：
　　水解酪蛋白胨(MH)肉汤适用于稀释法进行药敏试验。
　　原 理：
　　牛肉浸出粉和酪蛋白水解物提供氮源、维生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代谢产物。对氨基苯甲酸及其类似物证明对磺胺起拮抗作用;胸腺嘧啶脱氧核苷降低甲氧苄氨嘧啶的活性，使其抑菌圈缩小。因此对氨基苯甲酸和胸腺嘧啶或胸腺嘧啶脱氧核苷尽量减少至最低限度。
　　培养基配方(每升)：
　　牛肉 300g(从中提取浸出粉)
　　可溶性淀粉 1.5g
　　酪蛋白水解物 17.5g
　　最终pH7.3&0.2
　　使用方法：(两倍稀释法)
　　1、称取水解酪蛋白胨(MH)肉汤21g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，定量(等体积)分装于一系列灭菌试管中。
　　2、药液稀释：于第一管中加入同体积的药液，以对倍稀释法逐管稀释药液，于倒数第二管中取出一半体积的溶液作为空白对照，不加试验菌，以便观察供试液是否被污染，最后一支管作为阳性生长对照管。
　　3、取适宜的稀释级菌液加入到各抑菌管中，(一般接种量为每mL药液含10&105个细菌)摇匀，使试验菌与药液能充分接触。
　　4、将各试验管置于36&1℃培养16&24h，特殊试验菌可适当延长一定时间。
　　5、最低抑菌浓度(MIC)的确定：
　　经培养后的试验管呈现澄明，摇匀后仍澄清者，认为该管无菌生长，若培养管呈现混浊状态，表明有菌生长。从无菌生长的各管中找出最低浓度的试验管，该管的药物浓度即为最低抑菌浓度。
　　6、最低杀菌浓度(MBC)的确定：
　　当药物浓度在稍高于MIC值浓度下的抑菌作用是不可逆的，称为杀菌作用。最低杀菌浓度的确定即依次将未见细菌生长和各管各吸取适量涂布于合适的琼脂培养基平板上，在规定的温度下培养18&24h，平板上的菌落数小于5个的最小稀释度的药物浓度即为最低杀菌浓度。
　　质量控制：
　　质控菌株添加下列抗菌素后，于36&1℃培养16&24h后抑菌浓度如下：
　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
　　规 格：100g