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原是乙肝携带者，2年前检查为肝硬化，现在检查慢性肝损伤，彩超：肝硬化，肝大小正常，脾大，无腹水，双下肢对称轻度浮肿。肾功正常；化验：肝功示：ALT：105AST：160GGT：160；ALP163.胆红素稍高；蛋白正常；脾大导致血常规WBC2.7PLT36RBC正常。血脂稍高。AFP正常。HBV-DNA5.116E 5。目前用药甘利欣，扶正化瘀胶囊，后停药，改护肝片，可以用什么药对抗病毒治疗，且脾大、脾功能亢进有需要怎么治疗？如果肝损伤变成肝坏死还能治好吗
医院出诊医生
擅长：肝硬化、肝腹水、丙肝、肝炎
擅长：乙肝、大三阳、小三阳
擅长：大小三阳、肝腹水、肝硬化、丙肝、乙肝等
共2位网友提供帮助
会员9227744 16:22:02
你好，放化疗对身体有一定的副作用，不能全部杀死癌细胞，只能是按照比例杀死癌细胞，残余癌细胞在身体虚弱免疫力低的情况下发展很快，形成新的病灶．建议采用中医动态的疗法服用中草药全面调养综合治疗，减轻放化疗的副作用，杀死残余癌细胞，提高免疫力，有效的控制病情发展，使患者在最短时间内病情得到明显好转和控制，达到最理想的效果
会员9227667 16:22:06
你好，根据超声检查结果以及肝功能检测来看，你父亲的确有肝脏的损害，但其性质还没有确定，治疗结核药物已经停止使用了3年，不可能再是药物性肝损伤.应该做一个乙肝五项指标，确定是否存在病毒性肝炎的可能，你父亲是否有饮酒史酒精肝也会出现肝脏的损伤，要积极的寻找病因，祝早日康复.
问肝硬化、脾大、腹水
职称：医师
专长：肝病,结核
&&已帮助用户：134011
不知具体的肝功能是多呢？以上主要是积极进行保肝治疗
同时在必要的时候进行输人血白蛋白。
问咨询肝硬化腹水脾大
职称：医生会员
专长：外科相关疾病
&&已帮助用户：104917
问题分析：你现在的情况是由于肝硬化引起的门脉高压造成脾大，病的根源是肝硬化，只要肝硬化得到有效治疗脾大的问题就会好转，肝硬化用西药是无法治疗的，所以西医没有办法最后只能把脾切掉，你的病情用中药是可以治疗的，可以分解已增生的纤维组织，改善肝内血液循环、阻止肝细胞坏死。可使脾脏缩小肝硬化逆转。意见建议：禁酒.生活上建议,忌吃某些鱼. 忌食过多的蛋白质. 忌酒和烟. 忌食糖过多.　忌食辛辣食物.忌食盐过量.忌吃过硬食物.忌滥服药物.慎过性生活.忌劳累.忌情绪悲观.
问肝硬化脾大伴有少量腹水胆结石
职称：医师
专长：高血压、糖尿病、心血管疾病
&&已帮助用户：44260
病情分析： 你可先考虑溶石疗法，目前溶石治疗的药物主要是鹅去氧胆酸和其衍生物熊去氧胆酸。意见建议：注意多喝水，照B超看大小和位置来定治疗方法。除溶石法外还有超声波、微创手术。请临床医生检查后，才能定。
问硬化导致脾大有腹水？
职称：医生会员
专长：子宫肌瘤 月经不调
&&已帮助用户：119697
病情分析： 你好，可以不进行切脾手术，脾脏肿大是因为肝硬化的情况引起，意见建议：切除脾脏是为了解决门脉高压。目前治疗肝硬化腹水最先进的方法就是干细胞疗法，肝硬化病人要注意休息，避免剧烈运动;要保持乐观的情绪，树立战胜疾病的信心.所用食物应易消化、富营养.高蛋白、高糖、高维生素、低脂为肝硬化病人选择饮食的原则.
问慢性乙型肝炎后肝硬化患者，有腹水、脾大、水肿、低蛋...
职称：医师
专长：高血压、糖尿病、心血管疾病
&&已帮助用户：164373
病情分析： 乙肝的症状不一定典型的,主要表现肝区疼痛,黄疸,乏力等.主要还是看肝功能的检查。乙肝没有特效疗法.建议检查肝功,只要肝功检查正常,不要担心.但是平时一定要注意不要过于劳累,禁酒,不要吃肝损害的药物.意见建议：多喝水多吃蔬菜水果.如果要吃可以吃点:复方维生素B 维生素C 肌苷片 保肝治疗,但是药物不要过多,过多的药物反而会造成肝脏损害.因为任何药物都要通过肝脏代谢.都会或多或少加重肝脏损害.肝功能正常就不需要特别治疗,肝功正常才是目的.
问主要是肝硬化，腹水，脾大，怎么
职称：医生会员
专长：心脑血管，胃肠疾病
&&已帮助用户：24243
问题分析：您好，肝硬化是临床中常见的一种疾病，多是由于长期的饮食生活因素以及长期慢性肝炎而引起的，往往会导致肝功能低下进而就容易引起腹水，脾大等症状意见建议：根据你描述的情况，目前的情况建议主要还是积极通过药物治疗，比如利尿剂配合保肝药物等，也可配合脾脏切除术治疗，费用是根据病情以及治疗情况而定的，大概在三万左右，另外平时要注意多休息，饮食清淡，避免过度劳累以及熬夜。
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大鼠肝细胞线粒体形态的三维重建
来源：青年人()&更新时间： 16:08:32 &【字体： 】
【摘要】　目的　研究同一细胞内不同形态线粒体的数量、大小和超微结构。　方法　用三维重建和体视学测量的方法，研究成年大鼠肝细胞线粒体的形态类型。　结果　肝细胞线粒体按形态可分为5个基本类型：Ⅰ型(球形、椭球形和盘状)线粒体约占线粒体总数的21.4%；Ⅱ型(杆状)约占32.4%；Ⅲ型(不规则形)约占23.8%，Ⅳ型(分支形)约占19.6%，Ⅴ型(出芽形)仅占2.8%。Ⅰ～Ⅴ型线粒体的平均体积分别为0.11、0.21、0.32、0.51和0.64μm3。体现学分析显示，各型线粒体的体积密度有差异(P＜0.05或P＜0.01)，Ⅱ型线粒体体积密度最大，然后是Ⅲ、Ⅳ和Ⅰ型，Ⅴ型线粒体体积密度最小。Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ型线粒体嵴膜密度均高于Ⅲ或Ⅳ型(P＜0.05)。　结论　肝细胞内不同形态的线粒体都占有一定的比例，他们不仅体积差异很大，其超微结构亦有不同。　　【关键词】　肝细胞　线粒体　三维重建　体积密度　膜密度
THREE-DIMENSIONAL RECONSTRUCTION OF MITOCHONDRIA IN RAT HEPATOCYTEMu ChangzhengΔ, Xi Huanjiu*, Bao Cuifen, Liu Xia,Erik IISΦ Christensen*　*, Cui Shiying(Department of Histology and Embryology,* Department of Anatomy,Jinzhou Medical College,J*　*Department of Cell Biology, Institute of Anatomy,Aarhus & University, Denmark)
　　【Abstract】　Objective To examine the number,size and ultrastructure of the different forms of mitochondria in a cell.Methods Morphological types of the mitochondria in rat hepatocyte were studied by three－dimensional reconstruction and stereological analyses.Results The mitochondria may be classified into five basic types according to their morphological characteristic.The numbers(%)of type Ⅰ(sphere, ellipses and disc),type Ⅱ(rods),typeⅢ(irregulars),typeⅣ(branches)and typeⅤ(budding)were 21.4%,32.4%,23.8%,19.6% and 2.8%,respectively.And their average volume were 0.11μm3,0.21μm3,0.32μm3,0.51μm3 and 0.64μm3, respectively. Stereological analyses showed that there were significant difference in volume,density and crista membrane density among five types of mitochondria(P＜0.05 or P＜0.01).The volume density of mitochondria type Ⅱ was the highest,that of type Ⅴ the lowest and that of type Ⅲ,type Ⅳ and type Ⅰ the medium.Mitochondrial cristamembrane density of type Ⅰ,type Ⅱ and type Ⅴ was higher than both that of type Ⅲ and type Ⅳ.Conclusion Each type of mitochondria kept a suitable proportion in normal rat liver cell.There were significant difference not only in volume among different forms of mitochondria,but also in ultrastructure.　　【Key words】 H M Three-dimens V Membrane density　　线粒体在生长过程中以及在不同的生理或病理状态下，其形态会发生很大改变［1～3］。自60年代以来，各种细胞线粒体微细结构的研究报道甚多，但对同一细胞内线粒体形态结构和功能差异的研究较少。我们利用三维重建技术研究大鼠肝细胞线粒体的立体形态，并对其体积密度和嵴膜密度进行体视学测量，为研究线粒体的结构与功能变化提供了形态学依据。
材料和方法
　　雄性Wistar大鼠5只，体重200～320g，Inactin(Bjk-Golden,Knostanz,FRG)腹腔注射麻醉(150mg/kg)。以140mmHg的压力经腹主动脉灌注1%戊二醛(溶于0.1mol/L二甲砷酸钠缓冲液中，pH7.2)，20min后，摘除肝，切取肝组织块，2.5%戊二醛继续固定1h。再以1%锇酸(溶于0.1mol/L巴比妥-醛酸缓冲液中，pH7.2)后固定1h，逐级酒精脱水，环氧树脂Epon 812包埋。每只大鼠取3个肝组织块，每块组织在LKB UltrotomeⅢ型超薄切片机上切1组连续切片，分别收集在贴有Formar膜的单孔铜网上。枸橼酸铅染色2min，醋酸铀染色10min。JEOL JEM-1200EX电子显微镜观察。　　电镜下，在每组连续切片中，随机选取3个肝细胞进行连续观察。在放大10 000倍的条件下，对选定的肝细胞以蒙太奇法进行全细胞摄片，洗印时放大3倍，通过照片组合制成完整的肝细胞照片。组合后的肝细胞照片数与其相应的连续切片相等，即每个肝细胞制成1组与其连续切片相应的照片。校正仪器放大倍数后，测得照片实际放大倍数为28 920～29 600倍。通过测量球形小泡(内吞泡、溶酶体等)的直径和球形小泡的连续切片数，计算切片厚度(切片厚度=球形小泡直径/球形小泡连续切片数)［4］。各组连续切片的厚度为38.5～51.0nm。　　在每个肝细胞的1组连续切片照片中，取其中位数照片上的所有线粒体为观察对象(例如：1个细胞连续切片55张，第28张即为中位数切片。其上如有线粒体105个，该105个线粒体则全部为观察对象)。通过连续切片观察分析每个线粒体的立体形态，按随机原则从中选取10个线粒体用于三维重建。重建时，根据每个肝细胞切片厚度的不同，分别选用不同厚度的胶板(胶板厚度=平均切片厚度×照片实际放大倍数)，以连续切片照片中的线粒体为模板，按其原位重建三维模型。本研究共观察线粒体总数29 010个(来源于5只大鼠)，重建线粒体模型450个。　　应用点计数法，通过方格测试系统测量线粒体体积密度，嵴膜密度，以及其他细胞器的体积密度［5］。利用模型排水法测量线粒体模型的体积，再除以其放大倍数的3次幂，得出实际线粒体体积［6］。
1. 线粒体的形态类型　　连续切片的观察分析和三维重建术显示，肝细胞线粒体形态多样，按其形态特征可划分为5个基本类型，Ⅰ型为球形、椭球形和盘状；Ⅱ型为杆状；Ⅲ型为不规则形；Ⅳ型为分支形；Ⅴ型为出芽形(图1～5)。在每个肝细胞中，各型线粒体都占有一定的比例，其中以Ⅱ型线粒体最多，其次为Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅰ型，Ⅴ型线粒体数量最少(表1)。2. 线粒体的体积、体积密度及嵴膜密度　　通过线粒体模型测量的线粒体体积总均数为0.29μm3。各型线粒体体积差异显著(P＜0.01)。线粒体体积与形态有很大关系，一般讲，形态越复杂者体积越大(表1)。体视学分析显示，成年大鼠肝细胞线粒体体积密度明显高于其他膜相结构的体积密度(P＜0.01)。线粒体体积占肝细胞胞质体积的18.6%(表2，图6)。　　分析还显示，各型线粒体的体积密度有所不同，除Ⅰ型与Ⅳ型无差异外，其余两两比较均有差异或显著差异(P＜0.05或P＜0.01)。其中Ⅱ型线粒体体积密度最大，然后是Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅰ型，Ⅴ型的体积密度最小(表1)。
表1　各型线粒体形态计量参数
Table 1 Morphometric parametor of different types of mitochondria
数量与百分数(%)number and percentage
平均体积(μm3)average volume±s
体积密度Δ(μm0)volume density±s×100
嵴膜密度▲(μm1)crista membrane density±s
0.11±0.028
3.31±0.06
4.88±0.89**
0.21±0.048
5.85±0.75
5.02±0.97**
0.32±0.056
4.76±1.09
3.69±0.74 *
0.51±0.017
3.91±0.27
3.85±0.68 *
0.64±0.054
0.72±0.16
5.14±1.02**
　　各型线粒体平均体积每两者相比均有显著差异　P＜0.01　　Δ 参照系为胞质，除Ⅰ与Ⅳ两者比较外，其他两者相比，P＜0.05或P＜0.01　　▲ 参照系为线粒体，*　*表示与*比较有差异P＜0.05　　Significant difference of average volume(P＜0.01)was detected among all the types.　　Δ Reference system is cytoplasm.Significant difference (P＜0.05 or P＜0.01) was detected among all the types.except Ⅰ and Ⅳ.　　▲ Reference system is mitochondria.*　*represent significant difference at P＜0.05,as compared to *.
表2　大鼠肝细胞胞质体积密度
Table 2 Volume density of the cytoplasm in rat liver cell
structure composition
结构成分structure composition
线粒体mitochondria
溶酶体lysosome
滑面内质网smooth endoplasmic reticulum
糖原glycogen
粗面内质网rough endoplasmic reticulum
脂滴fat drop
高尔基复合体Golgi complex
基质stroma
参数系为胞质，n=5 Reference is cytoplasm,n=5
　　线粒体嵴膜密度分析表明，各型线粒体间有所不同，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ型之间无显著性差异，Ⅲ、Ⅳ型之间亦无显著性差异，而Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ型与Ⅲ、Ⅳ型比较，每两两之间均有差异(P＜0.05)，Ⅴ型线粒体嵴膜密度最大，Ⅳ型线粒体嵴膜密度最小，其余各型居此两者之间(表1)。
图1　Ⅰ型(球形、椭球形和盘状)线粒体三维重建模型图2　Ⅱ型(杆状)线粒体三维重建模型图3　Ⅲ型(不规则形)线粒体三维重建模型图4　Ⅳ型(分支形)线粒体三维重建模型图5　Ⅴ型(出芽形)线粒体三维重建模型　Fig.1 Three-dimensional models of mitochondria type Ⅰ(sphere,ellipese and disc).Fig.2 Three-dimensional models of mitochondria type Ⅱ(rods).Fig.3 Three-dimensional models of mitochondria type Ⅲ (irregulars).Fig.4 Three-dimensional models of mitochondria type Ⅳ(branches).Fig.5 Three-dimensional models of mitochondria type Ⅴ(budding).
图6　正常大鼠肝细胞　N.细胞核　m.线粒体　标尺示1μmFig.6 Normal rat hepatocyte.N:nucleus,m:mitochondria Bar=1μm
　　早在60年代即证实肝细胞线粒体具有多样性和可变性。近年的研究表明：小鼠胚着床前线粒体由球形向椭球形和长杆状转变［1］；发育不同时期的肾小管和肠上皮细胞内线粒体变化也很大，即由简单的球形、椭球形向复杂的分支形转化［5］。一般认为，线粒体常以出芽方式生长，以分裂方式增殖，这都会导致形态变化。本研究通过连续切片的观察及重组线粒体三维模型，进一步证实了肝细胞线粒体形态的多样性。除球形和椭球形外，还有相当数量的不规则形、分支形和出芽形，这表明正常肝细胞内同时存在着发育不同阶段的线粒体。我们根据线粒体的形态特征，并参考前人的研究成果［1，6～8］，将线粒体划分5种类型。　　传统观点认为，哺乳类动物每个肝细胞内大约有1 000～2 000个线粒体，这种估计是基于二维图像分析的结果，由于忽略了线粒体断面之间的联系，常错把一个不规则形或分支形的大线粒体当成几个线粒体来处理，因此，其数据常常有偏差。我们通过连续切片观察，认为肝细胞线粒体形态多样，其数量仍需进一步准确测定。已有研究表明，正常肝细胞内各型线粒体均占有一定的比例，当肝细胞处于不同的生理或病理状态时，这种比例可能会发生改变［2，3］，例如，随着年龄的增长，线粒体数量减少，不规则形和分支形线粒体比例增大［8］。某些病理情况下，线粒体不仅数量减少，嵴膜异常和膨胀也引起外形的改变，从而使各型线粒体比例发生变化［3］。　　肝细胞内不规则形和分支形线粒体占有相当的数量，用直径表示线粒体的大小是不准确的。本研究利用模型排水法测量线粒体体积，尽管其结果与实际体积尚有差距，但对于比较各型线粒体的大小来说还是很有意义的。体积密度尽管不能表示线粒体的实际大小，却能在一定程度上反映细胞内线粒体的含量。如肝细胞内Ⅴ型线粒体平均体积最大，但因其数量甚小，因此其体积密度最小，Ⅱ型线粒体平均体积虽小，但其数量最多，所以体积密度最大。　　一般认为，线粒体嵴的多少能反映其氧化磷酸化程度，进而反映线粒体的功能状态［3］。本研究显示，肝细胞内Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ型线粒体嵴膜密度都明显高于Ⅲ或Ⅳ型，这表明前三者的功能状态明显比后两者活跃。Ⅱ型线粒体数量最多，体积密度最大，功能很活跃，我们推测它们可能是肝细胞最主要的能量提供者。从体积大小、功能状态及线粒体发育特点上看，Ⅰ型线粒体可能是较为幼稚的线粒体，Ⅲ和Ⅳ型线粒体可能是成熟的或接近衰老的线粒体，Ⅴ型线粒体则处于出芽生长阶段。总之，肝细胞内各型线粒体都占有一定的比例，由于处于不同的生长阶段，因此不仅体积不同，其功能状态亦有所差异。
作者单位：穆长征　席焕久*?包翠芬　刘霞　Erik IISΦ Christensen* *?崔士英　锦州医学院组织学胚胎学教研室，?解剖学教研室，锦州　121001；奥尔胡斯大学解剖学系细胞生物学研究室，丹麦
［1］韩贻仁，赵晖.小鼠胚着床前线粒体的分布和超微结构变化.解剖学报，)：303［2］Beretiter-Hahn J.Dynamics of mitochondria in living cell:shape changes dislocation,fusion,and fission of mitochondria.Microse Rec Tech,):198［3］Sherratt HS.Mitochondria:structure and function.Rev Neurol(pairs),-7):417［4］Cui SY,Christensen EI.Three-dimensional organization of the vacuolar apparatus involved in endocytosis and membrane recycling of rat kidney proximal tubule cells.Exp Nephrol,):175［5］郑富盛.细胞形态立体计量学，北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，［6］Stempark J.Laurencin M.Mitochondrial form in hepatic parenchymal cells in rats of several ages.Am J Anat,):261［7］Gaffiero P,Bergeron M,Thiery G.Morphological study of cell organells,during development Ⅱ-The mitochondria of the renal and intestinal epithelium. Cell Biol,):163［8］Vassy J,Kraemer M,Bchalumea MT,et al.Liver:Ultrastructural and stereological study of hepatocytes.Cell Differ,):9［9］Bertoni-Freddari C,Fattoretti F,Casoli T,et al.Morphological plasticity of synaptic mitochondria during aging.Brain Res,):193
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COFs对肝细胞线粒体损伤及能量代谢障碍机制的研究
【摘要】：研究背景及目的烹调油烟(Cook oil fumes,COFs)是我国室内生活环境中最常见的空气污染物之一,其成分复杂,严重威胁着居民(特别是女性)的健康。COFs中含有的大量脂溶性化合物,经呼吸道进入机体后,肝脏是其主要的代谢器官,在此过程中可能会产生肝毒性物质导致肝细胞损伤。氧化损伤是COFs最主要的毒作用,体内体外研究均已证实COFs可导致细胞内SOD活性降低、MDA的含量增加、ROS的堆积甚至抑制细胞ATP酶的活性。肝脏作为机体最重要的解毒器官,虽然已有动物实验已经证实,COFs可导致肝脏发生炎症、充血、水肿,微量元素代谢紊乱等病理性改变,但COFs致肝毒性的作用机制并不清楚,而线粒体作为细胞发生氧化损伤的靶,COFs能否诱导其功能损伤更是鲜见报道。本研究除了阐明COFs诱导肝细胞线粒体功能损伤外,还对其诱导肝细胞能量代谢障碍机制进行了探讨。线粒体是细胞能量合成的主要场所,能量代谢障碍是线粒体功能损伤后的另一种细胞毒性结局,与氧化损伤后ROS的大量堆积相关,因此从分子水平上探索COFs诱导肝细胞氧化损伤及能量代谢障碍,有利于深入了解COFs对肝细胞的毒作用机制,从而为相关的生物学监测、病因探索与预防提供科学依据。研究方法1.COFs对肝细胞的毒作用及线粒体功能的损伤首先用不同浓度COFs分别处理体外培养的HL7702人正常肝细胞24h,MTT法检测不同浓度COFs对肝细胞存活率的影响,SPSS曲线拟合求出COFs对细胞的半数致死浓度,并确定染毒剂量。COFs染毒细胞24h后,激光共聚焦显微镜检测细胞内ROS的水平,高效液相色谱法检测细胞内腺苷酸(ATP\ADP\AMP)含量;肝细胞线粒体酶活性、线粒体膜通透性转运孔(MPTP)的开放度、线粒体跨膜电位(ψm)及线粒体呼吸链复合体(I~V)活性分别采用酶标仪、荧光分光光度计、激光共聚焦显微镜及紫外分光光度计法测定。2.COFs对肝细胞能量代谢障碍机制的影响COFs处理肝细胞24h后,荧光定量PCR法检测线粒体DNA编码的能量代谢相关基因COX I-III、ATPase6和ATPase8的表达水平,以及核DNA编码的能量代谢相关基因miR18lc的表达水平,并采用Spearman相关分析各指标间的相关性。研究结果1.cofs对肝细胞的毒作用及线粒体功能的损伤1.1cofs对肝细胞的毒作用①cofs染毒肝细胞24h后,可引起肝细胞存活率显著降低(f=365.568,p0.05),cofs染毒浓度与细胞生存率之间关系符合对数模型(r=0.929),对hl7702细胞的半数抑制浓度为318.10μg/ml,95%可信区间为277.31~366.87μg/ml。确定染毒剂量组为20,40,80,160μg/ml及dmso溶剂对照组。②cofs染毒肝细胞24h后,40~160μg/mlcofs组肝细胞内ros含量增高,与对照组相比差异有统计学意义(f=241.95,p0.01),cofs染毒浓度与ros水平之间存在正的线性相关关性(r=0.978,p0.01)。③与对照组相比,cofs处理组肝细胞内atp、adp、amp及tan的含量均呈明显下降趋势(f=60.16,p0.01;f=281.05,p0.01;f=86.90,p0.01;f=130.37,p0.01);在dmso~40μg/ml范围内,三组的atp/adp比值随着染毒剂量的升高而升高(f=234.21,p0.01);除80μg/ml组ec值较高外,其余各剂量组间ec值无明显变化。1.2cofs对肝细胞线粒体功能的损伤作用①cofs处理肝细胞24h后,对线粒体酶活性存在显著抑制性(f=587.185,p0.05),与对照组相比,则有20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml和160μg/mlcofs组对线粒体酶活性的相对抑制率分别为47.26%、90.30%、91.40%、95.83%。②随着cofs浓度的升高,mptp孔相对开放度越高(f=195.3,p0.05),以dmso组为参照,则有20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml和160μg/mlcofs组mptp孔相对开放度(%)分别为23.43%、33.22%、45.44%、56.64%。③在40~160μg/mlcofs浓度范围内,可促使ψm下降(f=43.796,p0.05)。④20~160μg/mlcofs对线粒体呼吸链复合体Ⅰ-Ⅴ的活性有不同程度的抑制作用(f=91.673,p0.01;f=434.581,p0.01;f=11.904,p=0.01;f=111.063,p0.01;f=79.111,p0.01)。2.cofs对肝细胞能量代谢障碍机制的影响①cofs染毒24h后,可使呼吸链复合体Ⅴ亚基atpase6及atpase8mrna总体呈上升趋势(f=130.297,p0.05;f=14.451,p0.05);呼吸链复合体Ⅳ亚基coxⅠ~Ⅲmrna总体呈上升趋势,(f=161.518,p0.05;f=8.282,p0.05;f=46.648,p0.05);ndna编码的mirna181mrna表达总体呈上升趋势(f=6.31,p0.05)。研究结论1.COFs可抑制HL7702肝细胞的活性,其半数抑制浓度为318.10μg/ml,95%可信区间为277.31~366.87μg/COFs可使肝细胞内ROS堆积、腺苷酸合成受阻。2.COFs诱导线粒体酶活性降低、MPTP孔开放、ψm崩解及MRCCⅠ~Ⅴ活性降低等功能性损伤,COFs所致线粒体功能损伤与ROS堆积及腺苷酸合成受阻相关。3.COFs可通过上调ATPase6和ATPase8 mRNA的表达抑制MRCCⅤ活性干扰ATP合成,导致细胞能量代谢障碍,即COFs可通过ATPase6/ATPase8-MRCCⅤ-ATP通路诱导能量代谢障碍;及上调线粒体DNA编码的呼吸链复合体Ⅳ~Ⅴ亚基基因表达;COFs可使核DNA编码的miRNA181过表达,调控MRCCⅣ活性及其线粒体DNA COXⅠ~Ⅲ基因的表达上调,来影响细胞内ATP水平,即COFs可通过miRNA181-COXⅠ~Ⅲ-MRCCⅣ-ATP通路影响ATP合成,导致能量代谢障碍。4.mtDNA基因表达水平改变,可使MRCCI~V活性下降,诱导ROS升高的因素,而高浓度的ROS又可以反过来攻击mtDNA的表达,引起细胞氧化损伤及能量代谢障碍,即能量代谢相关基因表达水平改变,导致线粒体呼吸链复合体活性下降,可能是COFs诱导肝细胞线粒体能量代谢障碍和氧化损伤的原因之一。
【关键词】：
【学位授予单位】：福建医科大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2015【分类号】：R575【目录】：
英汉缩略词表(按字母顺序排列)4-6中文摘要6-9Abstract9-13前言13-16技术路线图16-17第一部分 烹调油烟对肝细胞及线粒体功能的影响17-48 1 材料17-20 2 实验方法20-29 3 实验结果29-42 4 讨论42-48第二部分 COFs诱导的能量代谢障碍相关机制的研究48-66 1
材料49-50 2 实验方法50-55 3 实验结果55-63 4 讨论63-66结论66-67参考文献67-72综述72-81 参考文献78-81致谢81-82攻读学位期间的成绩82
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