戊二醛会使原核细胞的遗传物质是里面的物质流出来吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-05-19 10:08 标签： 构成细胞的基本物质
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【求助】配制2.5%戊二醛固定液（电镜用）出现絮状沉淀是什么原因？还能用于标本（细胞）固定吗？
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这个帖子发布于8年零134天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
配制2.5%戊二醛固定液（电镜用）时，将计算好体积的50%分析纯戊二醛（国产，2001年，新近开封)加入到刚配好的1M PBS（用双蒸水配制）中，溶液立即变成白色乳状，十分钟后才放到4度冰箱中，放入之前发现溶液中有白色絮状沉淀，请问大家是什么原因？这种溶液还能用于透射电镜标本（细胞）固定吗？
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参考这个配方吧：戊二醛固定液的配制：--------------------- 25% 戊二醛　　　　　　1ml 双蒸馏水　　　　　　　4ml 0.2mol/L磷酸缓冲液　　5ml 戊二醛最终浓度　　　　2.5% pH值7.3-7.4 0.2M磷酸缓冲液的配制：--------------------- 磷酸二氢钠（NaH2PO4.H2O）　　　　2.6克 磷酸氢二钠 (Na2HPO4.12H2O)　　　　29克 双蒸馏水 　　　　　　　　　　加至500毫升 pH调至7.4
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谢谢！下次会参考这个配方。这次我配的是100ml 1M的PBS,因为需要2.5%的戊二醛溶液，所以加入的50%戊二醛的体积是5.263ml,我稍多加了一点，大约是5.33ml.
最后没有调PH值。昨天我用这种溶液固定了两管细胞，取液时尽量避开吸取白色沉淀，4度固定两个半小时后发现乳白色的溶液变得澄清了，EP管底部的细胞变成黄色。不知正常情况是否是这样？
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国产大部分戊二醛质量不好！沃凯的还不错哦~可以试试~100ml/瓶的。另外配好的戊二醛要避光
4度 保存。用 0.1 M PB而不是PBS配！
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这种情况没遇见过，只是有时PBS放久了，会出现絮状的沉淀。最好重新配固定液再看看。
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建议购买电镜专用的戊二醛溶液，浓度一般为25%，10ml独立包装 TED PELLA、EMS的都可以
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关于丁香园【生物选修3—现代生物技术】（15分）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有DNA合成的S途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促进融合，获得杂种细胞（一般只考虑细胞两两融合）。请回答：（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有_____ 种融合细胞。（2）设计方法是（不考虑机械方法）从培养液中分离出杂种细胞，分析回答：
方法：在培养液中添加入_____ 再收集增殖的细胞。
原理：加入该物质后，使_____ 合成途径阻断，仅有该合成途径的_____ 细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的_____ 途径合成DNA而增殖。
（3）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三个细胞株。各细胞株内含有的人染色体如右表（“+”有，“－”无）。测定各细胞株中人体所具有五种酶的活性。结果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。如果人的基因作用不受鼠基因影响，则支配c、d和e酶合成的基因依次位于人的第_____ 、_____ 和_____ 号染色体上。
人染色体编号
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【生物选修3—现代生物技术】（15分）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有DNA合成的S途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促进融合，获得杂种细胞（一般只考虑细胞两两融合）。请回答：（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有_____ 种融合细胞。（2）设计方法是（不考虑机械方法）从培养液中分离出杂种细胞，分析回答：
方法：在培养液中添加入_____ 再收集增殖的细胞。
原理：加入该物质后，使_____ 合成途径阻断，仅有该合成途径的_____ 细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的_____ 途径合成DNA而增殖。
（3）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三个细胞株。各细胞株内含有的人染色体如右表（“+”有，“－”无）。测定各细胞株中人体所具有五种酶的活性。结果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。如果人的基因作用不受鼠基因影响，则支配c、d和e酶合成的基因依次位于人的第_____ 、_____ 和_____ 号染色体上。
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【生物选修3—现代生物技术】（15分）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有DNA合成的S途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促进融合，获得杂种细胞（一般只考虑细胞两两融合）。请回答：（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有_____ 种融合细胞。（2）设计方法是（不考虑机械方法）从培养液中分离出杂种细胞，分析回答：
方法：在培养液中添加入_____ 再收集增殖的细胞。
原理：加入该物质后，使_____ 合成途径阻断，仅有该合成途径的_____ 细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的_____ 途径合成DNA而增殖。
（3）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三个细胞株。各细胞株内含有的人染色体如右表（“+”有，“－”无）。测定各细胞株中人体所具有五种酶的活性。结果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。如果人的基因作用不受鼠基因影响，则支配c、d和e酶合成的基因依次位于人的第_____ 、_____ 和_____ 号染色体上。
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科目:最佳答案见解析解析
（1）人淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞混合培养，有三种融合细胞：淋巴细胞的自身融合细胞、骨髓瘤细胞的自身融合细胞、杂交瘤细胞。（2）为了筛选出杂交瘤细胞，除去其他细胞，可向培养液中加入氨基蝶呤，使D合成途径阻断，仅有该合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的瘤细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。（3）由于B株具有a酶活性，所以支配a酶合成的基因位于5号染色体上；由于A、B、C株均有b酶活性，所以支配a酶合成的基因位于1号染色体上；由于A、B株具有c酶活性，所以支配c酶合成的基因位于2号染色体上；由于C株有d酶活性，所以支配d酶合成的基因位于7号染色体上；由于A、B、C株均无e酶活性，所以支配e酶合成的基因位于8号染色体上。
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戊二醛的合成、杀菌性能、机理及有关动力学研究.pdf73页
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南京理工大学
硕士学位论文
戊二醛的合成、杀菌性能、机理及有关动力学研究
姓名：杨德红
申请学位级别：硕士
专业：物理化学
指导教师：叶静娴;严莲荷
南京理工大学硕士学位论文
用w 过氧化氢
30％的水溶液一步催化氧化环戊烯合成戊二醛，讨论了催化剂
用量、反应温度、时间、溶剂种类等因素的改变对戊二醛产率的影响规律，以钨酸．
反应温度35。c，反应时间2211r的优化工艺条件下，叔丁醇、异丙醇、正丁醇三种
溶剂体系下得到最高收率分别为62．5％，63．7％，56．2％。采用幂指数形式的模型求解
得到了合成反应的动力学方程。分别用化学方法和气相色谱法对合成体系的戊二醛
进行了定性、定量分析，结果准确、可靠：尝试了紫外法、热分析 DSC 法来定
性。对戊二醛在不同浓度、pH值、各种阳离子存在下及其对大肠杆菌和混合异氧
菌作用时的杀菌性能进行了研究，同时也考查了戊二醛的腐蚀性和配伍性，并对戊
二醛的鲞堕查螋佧了更深一步的探讨和研究，认为和细胞壁中的肽聚糖反应才是戊
二醛杀菌的主要原因：建立了一种杀菌剂作用模型，并求解了杀菌动力学方程。最
后，对该法合成工艺流程进行了简单的设计。
关键词：戊二醋环戊烯，过氧化氢，合莳动力学，性能，色谱分析_机理
戊二醛的合成、性能、机理及有关动力学研
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