为啥蛋白质与双缩脲试剂剂可以作为菲林试剂而不可相反,

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鉴定DNA的试剂是
A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲试剂D.二苯胺试剂
题型:单选题难度:偏易来源:同步题
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据魔方格专家权威分析,试题“鉴定DNA的试剂是[]A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲试剂D.二苯胺试..”主要考查你对&&DNA的粗提取与鉴定&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下:
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DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定:一、实验原理提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。1、DNA的溶解性(1)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14mol/L溶解度最低),利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。&(2)DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分离。2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。3、DNA的鉴定在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。二、实验设计1、实验材料的选取凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是使用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。2、破碎细胞,获取含DNA的滤液&动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。3、去除滤液中的杂质&方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分离。4、DNA的析出与鉴定(1)将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。(2)取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。实验步骤——以洋葱为实验材料:1、称取30克已切碎的洋葱,放入研钵中,加入少量石英砂助研,倒入10mL 2mol/L的氯化钠溶液,充分研磨。 洋葱含有挥发性刺激物,有效减少刺激,才能使实验顺利进行。上课前,教师可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿,使其凉透但又不能结冰;或将洋葱切成几大块,放入清水泡一会儿,让其挥发性刺激物溶于水,可以减轻刺激。然后将洋葱切碎备用。研磨的目的主要是使洋葱细胞破裂,使DNA溶于2mol/L的氯化钠溶液,没必要将洋葱研成粥糊状,后者既浪费时间又影响实验效果。研磨时,切忌使用搅拌器(榨汁机)。使用搅拌器虽可以提高研磨效率,但搅拌器将洋葱切成极细小的颗粒,无法通过过滤将洋葱颗粒剔除。只能将酒精直接倒入滤液中,许多洋葱小颗粒因为轻会漂浮起来,DNA藏在其中,无法分辨。学生看不到白色纤维状粘稠物的DNA。2、研磨后,用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中,得到滤液。3、向滤液中加入95%的酒精溶液20mL,沿烧杯壁缓缓倒入,不要震动或搅拌。此时,烧杯中的液体分为上、下两层,下层较浑浊,上层澄清,很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出,用玻璃棒可将其轻轻卷起。这就是记录生命遗传信息的重要物质——DNA。DNA析出的过程中,切忌震动和搅拌(不震动易于分层,我们就能很容易观察到上清液中的丝状物;搅拌会使非常柔软的DNA断裂成小段,不易取出)。如果用玻璃棒DNA不易卷起,可改用表面打毛的牙签,DNA提取物就缠绕在牙签上了。4、鉴定:取两支试管,编为1、2号,各加入2mol/L的氯化钠溶液2mL,向1号试管中加入一些白色纤维状物,振荡使其溶解,然后向两支试管中各加入2mL二苯胺试剂,沸水浴加热5分钟。DNA与蛋白质在NaCl溶液中溶解度比较:
知识点拨:1、为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),从而释放出DNA。2、加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶3、如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。4、为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。5、以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠防止血液凝固。6、加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。7、二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。8、DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系:当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时,随浓度的升高,DNA的溶解度降低;当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时,随浓度升高,DNA的溶解度升高。9、盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程的DNA的损失。10、本实验不能用哺乳动物成熟的红细胞作实验材料,原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。 11、实验中两次使用蒸馏水,第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA,第二次日的是稀释 NaCl溶液,使DNA从溶液中析出。
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807568094080725800259579570113斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑_百度文库
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斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑
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你可能喜欢搜集健康人体内的4种液体,分别用双缩脲试剂和斐林试剂检验,不能出现紫色反应和能出现砖红色沉淀的依次分别是①尿液 ②血清 ③唾液 ④胃液 A.①②B.②③C.③④D.①④ 题目和参考答案——精英家教网——
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搜集健康人体内的4种液体,分别用双缩脲试剂和斐林试剂检验,不能出现紫色反应和能出现砖红色沉淀的依次分别是(&)①尿液&②血清&③唾液&④胃液&&A.①②B.②③C.③④D.①④
解析试题分析:①尿液中没有蛋白质,所以和双缩脲反应没有紫色反应,BC错误,血清中含有葡萄糖是还原糖,与斐林试剂反应呈砖红色,D错误,本题选A。考点:细胞内有机物的检测点评:本题考查了学生的识记能力,难度不大,只要记住相关的知识点即可得出正确答案。
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科目:高中生物
来源:山西省太原五中学年高一10月月考生物试题
搜集健康人体内的4种液体,分别用双缩脲试剂和斐林试剂检验,不能出现紫色反应和能出现砖红色沉淀的依次分别是
科目:高中生物
来源:学年河南省郑州市智林学校高一10月月考生物试卷
题型:单选题
搜集健康人体内的4种液体,分别用双缩脲试剂和斐林试剂检验,不能出现紫色反应和能出现砖红色沉淀的依次分别是①尿液& ②血清& ③唾液& ④胃液&&A.①②B.②③C.③④D.①④
科目:高中生物
来源:学年安徽定远三中高一上期第一次月考生物卷(解析版)
题型:选择题
搜集健康人体内的4种液体,分别用双缩脲试剂和斐林试剂检验,不能出现紫色反应和能出现砖红色沉淀的依次分别是①尿液& ②血清& ③唾液& ④胃液A.①②&&& B.②③&&& C.③④&&&D.①④&
科目:高中生物
来源:2015届广西桂林中学高一上学期期中考试生物试卷(解析版)
题型:选择题
搜集健康人体内的4种液体,分别用双缩脲试剂和斐林试剂检验,不能出现紫色反应和能出现砖红色沉淀的依次分别是(&)①尿液&②血清&③唾液&④胃液&&A.①②&&&&&&&&&&&& B.②③&&&&&&&&&&&& C.③④&&&&&&&&&&&& D.①④&
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斐林试剂和双缩脲试剂都是用NAOH和CUSO4组成的,他们有区别么?为什么叫法不一样?RT
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斐林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液组成,但二者有如下三点不同:(1)溶液浓度不同 斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲,其浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05g/ml;双缩脲试剂中NaOH溶液(双缩脲试剂A)的浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液(双缩脲试剂B)的浓度为0.01g/ml.(2)使用原理不同 斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2O沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀).鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应.双缩脲反应实质是在碱性环境下的Cu2+与双缩脲试剂发生的紫色反应.而蛋白质分子中含有很多与双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应,可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在.(3)使用方法不同 斐林试剂使用时,先将 NaOH溶液和CuSO4溶液混合(将4~5滴CuSO4溶液滴入2mlNaOH溶液中),而后立即使用:双缩脲试剂使用时,先加入NaOH溶液(2mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,振荡摇匀后观察现象.
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斐林试剂是用来检验是否有还原糖的存在,而且是先加NaOH再加流酸铜溶液,加热,如有砖红色沉淀就说明有还原糖,双缩尿是检验DNA的,两试剂混合使用,无需加热,如有DNA就成蓝色丝状
比例不同吧
NaOH和CuSO4的浓度和比例不同,而且斐林是先混合后使用,双缩脲是先加一种到所测溶剂中后加另一种
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