为什么要提高重组dna能量转化效率率

【图文】实验三 重组质粒DNA转化大肠杆菌_百度文库
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实验三 重组质粒DNA转化大肠杆菌
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重组DNA分子的转化
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第九章 &重组 DNA 导入宿主细胞的方式
[本章摘要]
&&&&重组 DNA 导入宿主有:转化、转导、转染、感染、结合等常见方法。转化现象于 1928 年被发现,现在有 CaCl2 转化法、原生质体转化法和电穿孔转化法三种常用转化法。转导由噬菌体介导,分为普遍性转导和局限性转导。转化、转导、转染、感染概念有部分交叉,注意区分。
&&& 1928Grffith Diplococcus pneumoniaeSR S
R Stransformation() DNA ()()() DNA DNA(competent cell) DNA ssDNA DNA
B.subtilis
10-15% CaCl2 CaCl2?H2O
107-109 cell/gD NE.coli: DH5, TG1, XL-1Blue, JM1051 30min&& 2 42& 90&
&&&3 12min
&&4 37 45-60 min& protoplast G+
1Lysozyme2()electroporation10%() Mg2+
2.5 KV/0.2cm&&& 25F&&& 200-400
transductionλ 转导噬菌体的形成如图 9-1 所示。
(generalized transduction)
DNA 1 phage DNA (phage DNA )DNA abortive transduction(complete transduction) ,Salmonella typhimurium CP22 phage
()Specialized (or restricted) transduction)
λdgal gal- E.coli
gal+ E.coli
10-6λdgal+
gal- E.coli
(transfection) M13(or M13mp18) SV40
infection Virus/phage multiplicity of infection, MOI DNA
conjugation
F'R(triparental mating)【图文】重组DNA的转化_百度文库
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重组DNA的转化
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&&重组DNA的转化
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