抽血可以检查艾滋病吗兹病

& & 目前检测HIV的方法有100多种,总体来说可以分为抗体检测和病毒检测两大类。病毒检测包括细胞培养(病毒分离)、p24抗原检测和病毒核酸检测。
&&&&抗体通常是在感染后3~8周能够被检测出来。目前,大多应用双抗原夹心法,这种方法具有很好的灵敏性和特异性。抗体检测由初筛和确认试验组成,初筛试验呈阳性的必须进行确认试验。酶联免疫吸附分析(ELISA)方法有一定的灵敏度,且操作简单、快速,适合对大量样品的检测。因此是目前临床通用的初筛检测方法。国际上有3种确认试验方法,包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验,目前以免疫印迹试验最为常用。
&&&&在窗口期,病毒抗体不能被检出,但可以检测到病毒相关抗原或分离病毒。抗原能够在个体感染后先于血清转化2~18天被检测到。因此,在血清转化期通过检测p24抗原有着很大的优势,可以作为早期辅助诊断HIV感染的一种方法。
&&&&病毒培养是检测HIV感染最精确的方法。一般采取培养外周血单个核细胞(PBMC)的方法进行HIV的诊断。
&&&&病毒核酸检测通常是通过检测HIV&RNA水平来反映病毒载量,具有很高的灵敏度,使用适时荧光聚合酶链反应(PCR)技术,能够在HIV感染的前两周检测到病毒核酸。病毒核酸检测方法可用于HIV的早期诊断,如窗口期辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效测定、预测疾病进程等。目前常用的测定方法有逆转录PCR实验(RT-&PCR)、核酸序列扩增实验(NASBA)、分支DNA杂交实验(bDNA)等。使用高灵敏度的适时荧光PCR技术,能够在HIV感染的前两周检测到病毒核酸。
(一)艾滋病主要的检测方法:
抗体检测&&&主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)。快速检测法,也称为金标法,也是抗体检测的一种方法,根据免疫层析法的原理,用于HIV抗体检测的定性检测。
抗原检测&&&用ELISA检测P24抗原,在HIV感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太少,阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原,来提高敏感性。核酸检测
用PCR法检测HIV基因,具有快速、高效、敏感和特异等优点,目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中。
病毒分离&&&常用方法为共培养法,即用正常人外周血液分离单个核细胞,加PHA刺激并培养后,加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。
艾滋病检测试剂与方法
人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体检测试剂盒
珠海丽珠试剂股份有限公司(成品)
人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体检测试剂盒
艾博生物医药(杭州)有限公司
雅培人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体检测试剂
美国雅培公司
人类免疫缺陷病毒(HIV1+2)抗体/HIV(A2)
上海荣盛生物物业有限公司
人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒&HIV(3代)
珠海丽珠试剂股份有限公司
人类免疫缺陷病毒(HIV1+2)抗体检测试剂盒(4代)
北京万泰生物药业股份有限公司
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂
英科创新(厦门)科技有限公司
人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂
法国BIO-RAD公司
HIV免疫印迹法试剂
WB免疫印迹法
MP&Biomedical&Asia&Pacific&Pte.Ltd
(二)艾滋病检测方法介绍
1.胶体金法&&&&采用胶体金免疫技术和层析原理,定性测定全血、血清或血浆样本中的HIV1/2型抗体。检测阳性样本时,样本中的HIV抗体与胶体金标记抗原结合形成复合物,由于层析作用复合物沿纸条向前移动,经过检测线时与预包被的重组HIV-Ag结合形成&Au-HIV(1+2)-Ag-HIV-Ab-HIV(1+2)-Ag&夹心物而凝聚显色,游离的胶体金标记重组Au-HIV(1+2)-Ag则在对照线处与抗HIV单克隆抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色,30分钟内观察结果即可。
2.乳胶法&&&人类免疫缺陷病病毒(HIV1/2)抗体检测试剂盒(乳胶法)采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析乳胶标记技术原理。试剂上含有事先固定在检测区(T)的重组HIV-1
和HIV-2型抗原。检测时,将样本滴入试剂的加样孔中,样本中HIV-1,2型抗体与预包被在膜上的重组抗原-乳胶颗粒标记结合物反应,然后,混合物在毛细效应下向上层析,在检测区(T)与固定在膜上的重组HIV-1和HIV-2型抗原反应。如果样本中含有HIV抗体,在检测区(T)会出现红色条带,检测区内出现红色线条表明是阳性结果。如果在检测区内(T)没有出现红色条带,则样本中不含HIV抗体,表明是阴性结果。无论抗HIV抗体是否存在于样本中,混合物都会继续向上层析至质控区(C),出现一条红色条带。质控区(C)内所显现的红色条带是判定层析过程中是否正确的标准,同时也作为检测试剂的内控标准。
3.胶体硒法&&&&利用免疫层析法原理测定血样中HIV-1/2抗体。试剂为试纸条形式。(见下图)&
(1)滤血纸(加样区);&
(2)玻璃纤维膜,膜上吸附着干燥的金标抗原;
(3)硝酸纤维素膜,膜上包被的抗原和抗体呈线状;
(4)吸水纸。&
以上各组份首尾互相衔接,因此在(1)处滴加液体标本,液流即向(4)处移动。当液体到达(2)处时,硒标抗原被溶解,与标本中的抗体反应形成复合物。液流继续前移至(3)时,带有硒标记的复合物被膜上的抗原捕获,呈现红色线条。未结合的金标抗原继续前移至(4)处。&
4.酶联免疫法(ELASE法)&&&采用夹心ELISA方法检测血清或血浆标本中人类免疫缺陷病毒HIV(1+2)型抗体,预包被高纯度基因重组HIV(1+2)型抗原,可与标本中的抗-HIV抗体反应,加入HRP标记HIV(1+2)型抗体抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,然后加入TMB底物产生显色反应。通过酶标仪检测吸光度(OD值),根据OD值判断HIV抗体的存在与否。
5.WB免疫印迹法&&&艾滋病确诊实验室常用的方法,主要用于确认试验,当初筛出现阳性时,需采用此方法进行确认实验。基本原理是HIV全病毒抗原经过SDS-PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应,血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合。加入抗人IgG酶结合物和底物后,即可使有反应的抗原抗体结合带呈现紫褐色,根据出现条带情况判定结果。有报告说,免疫印迹试验的特异性不是很好,&有大约2%的假阳性率,但免疫印迹试验依然是目前最常用的HIV确认试验。
6.核酸检测&&&&随着生物技术的发展,核酸检测得到了人们越来越多的重视,它可直接检查HIV&RNA,可在发现血清学变化之前检测HIV感染,而且比P24抗原检测方法更灵敏。简单的说就是病毒感染人体后,一般情况下可通过一系列检测被发现,而最早能被检测到的是病毒核酸。现有的酶联免疫等血清学检测方法检测的是抗原或抗体,而核酸检测技术检测的是病毒核酸,所以能更早地发现病毒感染。HIV核酸检测将艾滋病病毒的检测&窗口期缩短至11天。目前常用的测定方法有逆转录PCR实验(RT-&PCR)、核酸序列扩增实验(NASBA)、分支DNA杂交实验(bDNA)等。使用高灵敏度的适时荧光PCR技术,能够在HIV感染的前两周检测到病毒核酸。
重庆市沙坪坝区疾病预防控制中心&周灵兵
《国际检验医学杂志》编辑部&方琪
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艾滋病检测的最佳时间
全网发布: 18:53
很多人对十分恐惧,有高危行为后不知道什么时间做检测,造成身心健康受到极大伤害,严重影响了工作、学习和生活。下面以科普形式提供给广大朋友,希望能给您带来帮助。检测的最佳时间,对于一个怀疑的人来说是件非常重要的事情。因为患有的人,在早期极少出现让人们感到异常的症状,所以常常被人们所忽略。一直到了发现症状的时候才就诊,治疗已经极为不容易了。所以在早期及时进行抗测、及时发现者并及时预防对极大地降低他人的机率是十分重要的。&&& 高危行为后一般需要2-4周时间就可以检测出HIV抗体。高危行为后2周开始可检测出抗体,也就是说2周后就适合做抗测了。时间越往后,检测的准确性就越高;绝大多数被HIV的人在4周后就能够产生足够多的抗体。需要注意的是人体后,都有一段“窗口期”。窗口期的长短存在个体差异, 大约为2周到3个月。窗口期的计算应从高危行为之时或是接受输血之时算起,一般HIV后产生血清抗体的平均时间为45日或更短些。高危行为后出现血清抗体阳性的时间为 2-8周,这应该是检测比较好的时间段。窗口期内的检测结果都不是最终的结果。目前国内专家认定的窗口期是高危后3个月。著名专家曹韵珍教授的最新研究成果表明窗口期是6周即42天。一个个体假如3个月后不产生血清抗体是极其罕见的。3个月检测为阴性就不需要再进一步检测了,除非这个个体心理极度恐惧或又发生了高危行为。建议:科学研究表明:高危后2-4周做初检,满4周结果是阴,则可排除率为98%左右;满8周后复检,结果是阴,可排除率99.99%;只有约万分之一的人窗口期在8周到3个月,为了100%排除的可能性,最好满3个月做最终复查,阴性即可完全排除。
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