直接胆红素 胆绿素被氧化成胆绿素吸光度怎么变

直接胆红素(DBIL)检测试剂盒(钒酸比色法)价格
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直接胆红素(DBIL)检测试剂盒(钒酸比色法)价格
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产品详细介绍
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货号:TC1126
储存条件:4℃,避光,6个月
用途:又称钒酸盐氧化法,定量检测血清、血浆或组织样本的直接胆红素含量
注意事项:直接胆红素被氧化成胆绿素,通过分光光度计检测钒酸盐氧化前后的吸光度的变化,计算出样品中总胆红素含量。
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& & 碱性磷酸酶(AlkP)测定
磷酸对硝基苯酚(4-NPP)在碱性溶液中为无色,在ALP催化下,此底物分裂出磷酸基团,生成游离的对硝基苯酚(4-NP),后者在碱性溶液中转变成醌式结构,呈现较深的黄色,在波长405nm处监测吸光度速率,计算ALP的活性单位。
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定7天,在23可稳定一个星期,在-20℃可稳定2个月.
ALP活力增高可见于下列疾病:
& 1:肝胆疾病如阻塞性黄胆、急慢性肝炎、肝癌。
& 2:骨骼疾病纤维性骨炎、佝偻病、骨软化病。
& &白蛋白(ALB)测定
在一定PH的缓冲液下,白蛋白作为一种阳离子与BCG形成蓝绿色复合物,在波长630nm处有吸收峰,其吸光度与白蛋白浓度成正比。
血清或血浆标本,在室温可稳定2.个月,在23可稳定5个月,在-20℃可稳定3个月.
& &临床意义
血清白蛋白增高,由于严重失水血浆浓缩。白蛋白降低主要是肝脏合成障碍形成和肾病时尿液中流失。另外球蛋白增高的原因除水份丢失的原因外,主要有下列因素:(1)感染性疾病、(2)自身免疫性疾病、(3)多发性骨髓瘤
谷丙转氨酶(ALT)测定
在一系列酶偶联反应中,NADH的氧化速率与标本中酶活性呈正比,在340nm波长处,NADH呈现特征性吸收峰,而NAD则没有。因此,可在340NM监测吸光度的下降而计算出酶的活性单位。
血清或临床意义
1 ALT活性在下列疾病可见增高:
(1)肝胆疾病:传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、脂肪肝。
& &(2)心血管疾病:心肌梗塞、心肌炎、脑出血。
& &(3)骨骼肌疾病、肌营养不良。
一些药物和毒物可引起ALT升高,如结核类药、酒精等血浆标本,在30℃可稳定3天,在23可稳定一个星期,在-40℃可稳
淀粉酶(Amy)测定
以2-氯-对硝基苯麦芽三糖苷(CNPG3)为底物,经2-淀粉酶催化,水解为2-氯-对硝基酚(CPNP)的形成,2-氯-对硝基苯麦芽二糖(CNPG2),麦芽三糖和葡萄糖.在404nm波长下,通过测量,
2-氯-对硝基酚(CPNP)的量可以反应2-淀粉酶的活性.
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定7天,在23可稳定7天,在-20℃可稳定1年.
&谷草转氨酶(AST)试剂
酶偶联反应后,在340nm波长下,监测NADH的氧化速率,即吸光度的下降速率与AST活性呈正比。
血清或血浆标本,在室温可稳定4天,在03可稳定一个星期,在-20℃可稳定12个星期.
AST主要存在于心肌细胞和肝细胞内,所以心梗时,此酶活力增高。中毒性肝炎也增高,另外肌炎、胸膜炎、肺炎也轻度增高。
&钙(CA)测定
在碱性条件下,血清钙与偶氮胂III(Arsenazo
III)络合形成紫蓝色的偶氮胂III-CA2+复合物,最大吸收峰在650nm处.通过比较标本,标准和试剂反应后的吸光度值,求得血清(浆)钙含量.加入8-羟基喹啉-5-磺酸可避免镁的干扰.
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定7天,在23可稳定3个星期,在-20℃可稳定8个月.
1 血清钙增高常见下列疾病 甲状腺机能亢进、维生素D过多症、多发性骨髓瘤、结节病引起肠道过量吸收钙。
2血清钙减低可引起神经肌肉应急性增强而使手足式样搐搦,常见下列疾病:
1)甲状旁腺机能减退
&(2)活性维生素D3摄入不足,使钙吸收受到影响
&(3)佝偻病与软骨病及吸收不良性低血钙。
&(4)大量输入柠檬酸盐抗凝血后克引起低血钙。
& &肌酸激酶(CK)测定
CK催化磷酸肌酸(CrP)与二磷酸腺苷(ADP)反应产生三磷酸腺苷(ATP)与肌酸 ;偶联己糖激酶(HK)及葡萄糖—6-
磷酸脱氢酶(G6PD)的催化反应。HK催化葡萄糖(Glu)与ATP反应,形成葡萄糖—6—磷酸(
G6P),G6PD催化G6P氧化,形成6一磷酸葡萄糖内酯(6一pG)及NADPH。NADH生成的速率代表CK活力
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定2天,在23可稳定一个星期.
CK主要存在骨骼肌和心肌,所以各种类型进行性肌萎缩时,CK活性增高。急性心肌梗塞后2-4H可增高到正常上限的10-12倍。病毒性心肌炎时也明显升高。此外脑血管意外、脑膜炎、甲状腺机能底下等疾病也增高。
& &二氧化碳(CO2)测定
血浆(血清)中的碳酸氢根在磷酸烯醇式丙酮酸羟化酶(PEPC)的催化下和磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)反应,生成草酰乙酸和苹果脱氢酶(MDH)反应,生成苹果酸,同时将NADH氧化成NAD,在340nm处吸光度的降低与样本中的HCO3含量成正比.
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定1天,在23可稳定一个星期,在-20℃可稳定2个星期.&
1 增高:代谢性碱中毒,如幽门梗阻、柯兴综合征等。呼吸性酸中毒如呼吸中枢抑制、呼吸肌麻痹、肺气肿、气胸。
降低:代谢性酸中毒,如腹泄、糖尿病等。慢性呼吸性碱中毒
& 肌酐(CREA)测定
苦味酸速率法,肌酐与苦味酸反应,20至80秒生成桔红色的苦味酸肌酐复合物的拟一级反应碱性反应环境中,
样品的肌酐或干扰物质和苦味酸的反应速度不同选择适宜的速率监测时间,可以提高肌酐测定的特异性
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定7天,在23可稳定一个星期,在-20℃可稳定3个月.
肌酐值如升高至176-353μMOL/L,提示为中度至严重的肾损害。所以血肌酐测定对晚期肾脏病临床意义较大。
& 直接胆红素(DBIL)测定
血清中直接胆红素被亚硝酸钠氧化成胆绿素,随着胆红素被氧化,在444nm处其吸光度值下降,下降程度与胆红素被氧化的量有关.因而检测444nm吸光度的下降值可以反映直接胆红素的含量.
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定2天,在23可稳定7天,在-20℃可稳定3个月,在-80℃可稳定3个月..
总胆红素包括直接胆红素和间接胆红素,直接胆红素即与葡萄糖醛酸结合的结合胆红素。总胆红素增高,直接胆红素、间接胆红素也增高,常见于肝细胞性黄疸
总胆红素和直接胆红素增高,而间接胆红素增高不明显,见于阻塞性黄疸
总胆红素和间接胆红素增高,而直接胆红素增高不明显,见于溶血性黄疸
& γ-谷氨酰转肽酶(GGT)测定
本法以L-γ谷氨酰—3-羧基—对硝基苯胺为底物,双甘肽为谷氨酰基的受体。在GGT的催化下,谷氨酰基转移到双甘肽分子上,同时释放出黄色的2-硝基—5-氨基苯甲酸,引起405-410nm处吸光度的增高。吸光度增高速率与GGT活性呈正比关系。
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定7天,在23可稳定一个星期,在-20℃可稳定大于一年.&
此酶主要存在肾脏和肝脏,但肾病时,血中酶活力却很低,主要从尿液中排除,肝癌、胰腺癌时,此酶升高,特别在诊断恶性肿瘤者有无肝转移和肝癌术后有无复发时,阳性率可达90%
& 葡萄糖(GLU)测定
在己糖激酶催化下,葡萄糖和ATP发生磷酸化反应,生成葡萄糖-6-磷酸和ADP。前者在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化下脱氢,生成6-磷酸葡萄糖酸,同时使NAD
还原成NADH。NADH的生成速率与葡萄糖浓度呈正比,在波长340nm监测吸光度升高速率,计算血清中葡萄糖浓度。
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定1天,在23可稳定一个星期,在-20℃可稳定1天.
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定,否则出现高血糖或低血糖。
& 1 病理性高血糖:多出现摄入高糖食物1-2小时后。
& 2 病理性高血糖:
(1)内分泌腺功能障碍或其它内分泌疾病引起的各种对抗胰岛素的激素分泌过多也会出现高血糖。
& &(2)颅内压增高
&(3)脱水如呕吐、腹泄、高热等。
3 生理性低血糖: 饥饿、剧烈运动。
4 病理性低血糖:
(1)胰岛素分泌过多。
&(2)对抗胰岛素的激素分泌不足。
(3)严重肝病患者。
&钠、钾、氯离子测定
电解质检测是测定样品中的电位为基础的定量分析方法。C8000上使用集成晶片技术(ICT)来检测钠,钾和氯。ICT技术是将固项的离子选择电极组合在一个单一的晶片上,从而减少了在进行电极检测中所需要的保养程序。样品(血清、血浆、脑脊液)与标准液要用指定离子强度与PH值的稀释液作1:24倍稀释,再送入电极管道,测量其电位,这时样品和标准液的pH和离子强度趋向一致,所测离子活度等于离子浓度。ICT系统包括一个ICT的吸样针和一个ICT的模块。ICT吸样针从反应杯中吸入稀释样品并送入ICT模块进行检测(分析前先吸入经加热的参比液,以提供一个参比浓度用于最后结果的计算)。四种电极的组份如下:
 钠电极:整合于离子选择塑料膜中的乙醚覆盖的电离层(非玻璃电极,所以不会受到PH值大干扰)
 钾电极:整合于离子选择塑料膜中的缬氨霉素
 氯电极:固相氯化银
 参比电极:包含在氯化钾凝胶中的银/氯化银电极,用多孔的瓷管与样品分开
血清或血浆标本应避免溶血,在室温可稳定7天,在23可稳定7天到14天,在-20℃可稳定1年左右.尿液标本,脑脊液标本。
临床意义:
&1 血清钠低于135mmol/L为低钠血症,临床常见于
&(1)胃肠道失钠 &(2)尿钠排出增多 (3)皮肤失钠
&(4)抗利尿激
& & &素过多。
&2 血清钠浓度超过145mmol/L为高钠血症,临床常见于
&(1)肾上腺皮质机能亢进(2)严重脱水(3)中枢性尿崩症时ADH分泌
量减少,尿量增加,供水不足,血钠增高。
&3 血清钾增高可见于肾上腺皮质功能减退、休克、重度溶血。
&4 血清钾降低常见于腹泄、呕吐、服用利尿剂。
&5血清(浆)氯化物增高临床常见于高钠血症、失水大于失盐、氯化物相对浓度增高等。
&6 血清(浆)氯化物降低常见原因有严重呕吐、腹泄、胃液胰液或胆汁大量丢
&失。脑脊液低 & &
&氯血症常见有重症结核性脑膜炎、化脓性脑膜炎、中枢神经系统感染等。尿液氯化物排泄量的增减情况基本同尿钠一致.
乳酸脱氢酶(LDH)测定
乳酸脱氢酶催化在反应过程中,乳酸氧化成丙酮酸,同时NAD还原成NADH,引起340nm吸光度的增高,吸光度的增高速率与标本中LD活性呈正比关系。
血清或血浆标本应避免溶血,在20-25℃可稳定7天,在23可稳定4天,在-20℃可稳定6个星期.&
乳酸脱氢酶增高主要见于心肌梗塞、肝炎、肺梗塞、某些恶性肿瘤、白血病等。某些肿瘤转移所致的胸腹水中乳酸脱氢酶活力往往、升高。目前,常用于心肌梗塞、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。
&总胆红素(TBIL)测定
血清中总胆红素被亚硝酸钠氧化成胆绿素,随着胆红素被氧化,在444nm处其吸光度值下降,下降程度与胆红素被氧化的量有关.因而检测444nm吸光度的下降值可以反映总胆红素的含量.
血清或血浆标本应避免溶血,在20-25℃可稳定1天,在23可稳定7天,在-20℃可稳定6个月,在-80℃可稳定6个月.
总胆红素包括直接胆红素和间接胆红素,直接胆红素即与葡萄糖醛酸结合的结合胆红素。总胆红素增高,直接胆红素、间接胆红素也增高,常见于肝细胞性黄疸
总胆红素和直接胆红素增高,而间接胆红素增高不明显,见于阻塞性黄疸
总胆红素和间接胆红素增高,而直接胆红素增高不明显,见于溶血性黄疸
& & 总胆红素(TBIL)测定
血清胆红素在加速剂二甲亚酮(DMSO)作用中,胆红素与重氮试剂反应产生偶氮胆红素,在548nm波长比色测定,其吸光度值与总胆红素浓度成正比.
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定1天,在23可稳定7天,在-20℃可稳定6个月,在-80℃可稳定6个月.
总胆红素包括直接胆红素和间接胆红素,直接胆红素即与葡萄糖醛酸结合的结合胆红素。总胆红素增高,直接胆红素、间接胆红素也增高,常见于肝细胞性黄疸
总胆红素和直接胆红素增高,而间接胆红素增高不明显,见于阻塞性黄疸
总胆红素和间接胆红素增高,而直接胆红素增高不明显,见于溶血性黄疸
& & 总蛋白(TP)测定
凡分子中含有两个甲酰胺基(-CONH2-)的化合物都能与碱性铜溶液作用,形成紫色复合物,这一反应称双缩脲反应。蛋白质分子中有许多肽腱(-CONH-),都能起此反应,而且各种血浆蛋白显色程度基本相同。因此,在严格条件下,双缩脲反应可作为血浆蛋白量测定的理想方法,从测定的吸光度值计算出蛋白质含量。
血清或血浆标本应避免溶血,在室温可稳定7天,在03可稳定一个月,在-20℃可稳定2个月.
1:血清总蛋白浓度增高
(1)血清中水份减少,而使总蛋白浓度相对增高(如呕吐、腹泄、高热等)
(2)血清蛋白质合成增加,大多数发生在多发性骨髓瘤(球蛋白增加)
2:血清总蛋白浓度降低
(1)血浆中水份增加,血浆被稀释。(如静脉注射过多低渗溶液、水钠滁留)
(2)营养不良和消耗增加。(如蛋白质摄入不足、慢性肠道疾病)
(3)合成障碍,肝功异常。
& &(4)蛋白质丢失(如烫伤、出血)
& &尿素氮(UREA)测定
尿素在尿素酶催化下,水解生成氨和二氧化碳,氨在α—酮戊二酸和还原型辅酶Ι存在下,经谷氨酸脱氢酶崔化生成谷氨酸。同时,还原型辅酶Ι被氧化成氧化型辅酶Ι。还原型辅酶Ι在340nm波长处有吸收峰,其吸光度下降的速率与待测样品中尿素的含量成正比。
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定7天,在23可稳定一个星期,
临床意义1 生理因素:高蛋白饮食引起血清尿素浓度和尿液排出量显著升高。
& &2 病理因素:常见于肾脏因素,其次为非肾脏因素。
&血液尿素增加的原因分为以下三个方面:
(1)肾前性:失水引起的血液浓缩使肾小球两滤过率降低而使血尿素滁留
(2)肾性:急性肾小球肾炎、肾病晚期等。
(3)肾后性疾病:如前列腺肥大、尿路结石等。
& &尿酸(URIC)测定
尿酸在尿酸酶催化下,氧化生成尿囊素和过氧化氢与4-AAP和DHBS在过氧化物酶的作用下,生成有色物质,其色泽与样品中尿酸浓度成正比。
血清或血浆标本,在20-25℃可稳定3天,在23可稳定一个星期,在-20℃可稳定半年.
1 大多痛风患者血清中尿酸增高。
2 核酸代谢增加时,血清尿酸值增高。
3肾功能减退时,常伴有血清尿酸值增高。 & &
4 氯仿中毒、四氯化碳中毒、子痫等疾病血清中尿酸含量增高。
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钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析评价
作者:苏少华
【摘要】& 目的:对测定胆红素的钒酸盐氧化法进行 分析 评价。 方法 :用钒酸盐氧化法测定胆红素,并对其的精密度、稳定性、灵敏度及干扰因素进行分析。结果:钒酸盐氧化法测定胆红素的批内、批间CV&3.25%,可信检测范围可达:钒酸盐总胆红素(TBil)684 μmol/L,直接胆红素(DBil)342 μmol/L,回收率达到98.1%~102.4%。用1∶8肝素抗凝,测定直接胆红素明显降低,P&0.01;1∶10肝素抗凝,测定直接胆红素,有轻度的负干扰。维生素C≤0.05 g/L时,无干扰,而溶血及脂质对钒酸盐氧化法干扰小。结论:钒酸盐氧化法
方便,重复性好,灵敏度高,抗干扰性强。
【关键词】& 胆红素;钒酸盐氧化法;肝素抗凝
  1993年日本学者Tokuda了血清胆红素的钒酸盐氧化测定法。随着商品化钒酸盐胆红素氧化法试剂的推广, 目前 国内用户众多[1]。本文对其精密度、稳定性、灵敏度及干扰因素进行评价和分析。
  1& 材料和方法
  1.1& 试剂和仪器     1.1.1& 试剂& 钒酸盐总胆红素(TBil)试剂盒、直接胆红素(DBil)试剂盒由东瓯生物工程有限公司提供,用20%英脱利匹特脂肪乳由华瑞制药有限公司提供,维生素C由湖北中天爱白药业有限公司提供,12 500 U/2 ml肝素注射液由天津市生物化学制药厂提供。血红蛋白液的制备:取1份约3 ml肝素钠抗凝血,反复加入生理盐水洗涤,最后加入蒸馏水离心取上清液,用KX?21N血细胞分析仪测Hb为100 g/L。
  1.1.2& 仪器& 日立7060全自动生化分析仪,Sysmex KX?21N血细胞分析仪。
  1.1.3& 学处理& 计量资料数据以±s表示,采用配对t检验。P&0.05具有统计学意义,使用SPSS 10.0进行统计分析。
  1.2& 测定原理& 在pH 3附近,表面活性剂和钒酸作用于血清TBil,使之氧化成胆绿素,使胆红素所特有的黄色减少,由此测定钒酸作用前后450 nm吸光度的变化求出血清中TBil的浓度。在pH 3附近,当试剂中缺少表面活性剂时,钒酸只与血清中结合胆红素作用,使之氧化成胆绿素,此时测定450 nm吸光度下降值求出血清中DBil的浓度。
  1.3& 主要测定参数& 在日立7060型全自动生化分析仪商用钒酸盐氧化法测定血清胆红素主要参数如下:波长450/546 nm;温度37°;方法为二点终点法。试剂Ⅰ280 μl,样本10 μl, 反应5 min,读取第1点吸光度;然后加入试剂Ⅱ 70 μl,再反应5 min,读取第2点吸光度。
  2& 结果
  2.1& 精密度& 用一中值质控物,连续测定20次,再每天测1次,共20 d,结果见表1。
  表1& 钒酸盐法测定胆红素的精密度(略)
  从表1可以看出,钒酸盐测定胆红素,批内及批间都有良好的重复性。
  2.2& 线性范围& 取TBil为5.8 μmol/L,DBil为1.2 μmol/L的低值血清对TBil为684 μmol/L、DBil为342 μmol/L的患者高值血清分别按1∶5、2∶5、3∶5、4∶5、5∶5的比例稀释,用钒酸盐法测定每份标本的TBil及DBil含量,各浓度均重复测定4次,观察其线性,结果表明TBil在684 μmol/L内、DBil在342 μmol/L内仍保持良好的直线关系。
  2.3& 回收试验& 在0.9 ml TBil浓度为20.90 μmol/L,DBil浓度为5.90 μmol/L的血清标本中加入0.1 ml胆红素标准液。胆红素标准液浓度:高值TBil为255.60 μmol/L,DBil为19.40 μmol/L;中值TBil为148.68 μmol/L,DBil为48.16 μmol/L;低值TBil为72.82 μmol/L,DBil为24.46 μmol/L。测定标本中TBil、DBil浓度。钒酸盐氧化法测定TBil的回收率分别为101.59%、99.3%、98.9%,平均回收率为99.93%;DBil回收率分别为102.4%、98.3%、98.1%,平均回收率为99.6%。
  3& 干扰试验
  3.1& 肝素干扰试验& 将新鲜血液分别加入预先备制好的无肝素液、1∶8肝素抗凝液、1∶10肝素抗凝液、1∶12肝素抗凝液20 μl(每毫升血液加入量),使每毫升含肝素0 U、15.6 U、12.5 U、10.4 U,测定TBil、DBil。结果用1∶8肝素抗凝,测定DBil明显降低,P&0.01;1∶10肝素抗凝,测定DBil,有轻度的负干扰,见表2。
  表2& 肝素对胆红素测定的 影响 (略)
  注:*示比较差异有显著性,P&0.01,平均偏差:(2)、(3)、(4)组测定结果与(1)组之差。
  3.2& 溶血干扰试验& 将已知值的100 g/L血红蛋白样品,作0,1/2,1/4,1/8,1/16稀释后, 分别按1∶9加入高低两个水平临床新鲜血清中进行分析,检测TBil、DBil。结果Hb≤10 g/L时对TBil无影响,对DBil有轻度负干扰。Hb≤5 g/L时对DBil无影响,见表3。转贴于论文联盟
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