常用的分子生物学技术实验常用的载体有哪些？它们的特点是什么

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-03-17 05:00 标签： 分子生物学实验室
分子生物学实验复习_百度文库
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分子生物学实验复习
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分子生物学实验复习题附答案
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分子生物学各章习题..doc 118页
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分子生物学各章习题.
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一、选择题(单选或多选)1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是：()(a)从被感染的生物体内重新分离得到DNA，作为疾病的致病剂(b)DNA突变导致毒性丧失(c)生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能(d)DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子(e)真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代2．1953年Watson和Crick提出：()(a)多核营酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋(b)DNA的复制是半保留的，常常形成亲本—子代双螺旋杂合链(c)三个连续的核苷酸代表一个遗传密码(d)遗传物质通常是DNA而非RNA(e)分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变3．双链DNA中的碱基对有：()(a)A-U(b)G-T(c)C-G(d)T-A(e)C-A4．DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述：()(a)哺乳动物DNA约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的(b)依赖于A—T含量，因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少(c)是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值(d)可通过碱基在260mm的特征吸收峰的改变来确定(e)就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度5．DNA的变性：()(a)包括双螺旋的解链(b)可以由低温产生(c)是可逆的(d)是磷酸二酯键的断裂(e)包括氢键的断裂6．在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中，发夹结构的形成：（）(a)基于各个片段间的互补，形成反向平行双螺旋(b)依赖于A-U含量，因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少(c)仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生(d)同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对(e)允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基7．DNA分子中的超螺旋：()(a)仅发生于环状DNA中。如果双螺旋在围绕其自身的轴缠绕后(即增加缠绕数)才闭合，则双螺旋在扭转力的作用下，处于静止(b)在线性和环状DNA中均有发生。缠绕数的增加可被碱基配对的改变和氢键的增加所抑制(c)可在一个闭合的DNA分子中形成一个左手双螺旋。负超螺旋是DNA修饰的前提，为酶接触DNA提供了条件(d)是真核生物DNA有丝分裂过程中固缩的原因(e)是双螺旋中一条链绕另一条链的旋转数和双螺旋轴的回转数的总和8．DNA在10nm纤丝中压缩多少倍(长度)?()(a)6倍(b)1O倍(c)40倍(d)240倍(e)1000倍(f)．DNA在3nm纤丝中压缩多少倍?()(a)6倍(b)10倍(c)40倍(d)240倍(e)1000倍(f)．DNA在染色体的常染色质区压缩多少倍?()(a)6倍(b)10倍(c)40倍(d)240倍(e)1000倍(f)100000倍l1．DNA在中期染色体中压缩多少倍?()(a)6倍(b)10倍(c)40倍(d)240倍(e)1000倍(f)．组蛋白的净电荷是：()(a)正(b)中性(c)负13．核小体的电性是：()(a)正(b)中性(C)负14．当新的核小体在体外形成时，会出现以下哪些过程?()(a)核心组蛋白与DNA结合时，一次只结合一个(b)一个H32-H42核形成，并与DNA结合，随后按顺序加上两个H2A—H2B二聚体(c)核心八聚体完全形成后，再与DNA结合15．当一个基因具有活性时：()(a)启动子一般是不带有核小体的(b)整个基因一般是不带有核小体的(C)基因被核小体遮盖，但染色质结构已发生改变以致于整个基因对核酸酶降解更加敏感二、判断题1．在高盐和低温条件下由DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性，这一过程可看作是一个复性(退火)反应。2.在核酸双螺旋(如DNA)中形成发夹环结构的频率比单链分子低。发夹结构的产生需要回文序列使双链形成对称的发夹，呈十字结构。3．B型双螺旋是DNA的普遍构型，而Z型则被确定为仅存在于某些低等真核细胞中。4．病毒的遗传因子可包括l到300个基因。与生命有机体不同，病毒的遗传因子可能是DNA或RNA(但不可能同时兼有!)，因此DNA不是完全通用的遗传物质。5.Cot1／2与基因组大小相关。6．C0C1/2与基因组复杂性相关。7．非组蛋白染色体蛋白负责30nm纤丝高度有序的压缩。三、简答题1.碱基对间在生化和信息方面有什么区别?2.在何种情况下有可能预测某一给定的核苷酸链中“G”的百分含量?3.真核基因组的哪些参数影响Cot1／2值?4.请问哪些条件可促使DNA复性(退火)?5.为什么DNA双螺旋中维持特定的沟很重
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问答题就你所知，分子生物学实验中所涉及的引物有哪几种，各有何用途和特点？（至少3种）
(1)PCR引物：一对。在一对引物之间引发聚合酶链反应。
(2)随机引物：一定数量的核苷酸任意排列。引发DNA聚合反应......
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RACE是一项基于已知cDNA序列快速克隆5&或3&端缺失序列的技术。方法大致是先获取RNA，去掉mRNA 5&端帽子...... 3.问答题
可能的原因有：
(1)酶切条件不合适：温度不适合，缓冲液浓度不正确，离子浓度过高或过低。
(2)酶量不足；...... 4.问答题
克隆2 kb的cDNA片段，质粒是最合适的。其他载体，如噬菌体载体、黏粒载体、YAC、BAC：等载体的克隆容量都较大，不利于2 kb...... 5.问答题
组氨酸标签的存在：
(1)可利于蛋白质的纯化；
(2)表达的融合蛋白避免了细菌蛋白酶的破坏。
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