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鸡舍大肠杆菌的气溶胶发生及其传播模式
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【中文摘要】微生物是动物舍环境污染的主要因素,动物舍的生物污染可以引起一系列传染病的流行。近几年的研究表明,一些气载病原微生物能够通过空气传播很远的距离,造成传染病的流行,给畜禽和人类的健康带来很大的威胁。过去证明畜禽养殖环境微生物气溶胶的传播主要是通过舍内外环境中的细菌浓度的变化以及细菌耐药性及某些致病菌含量或者采用ERIC-PCR方法等方面来确认。然而,没能获得充分的证据证明畜禽舍微生物气溶胶向周围环境的传播。为了得到充分的证据证明微生物气溶胶向环境的传播,本实验以绿色荧光蛋白基因标记的大肠杆菌为指示菌,建立气溶胶传播模型。绿色荧光蛋白作为一种新型的标记基因,被广泛用做原核细胞和真核细胞的报告基因。在受到紫外光或蓝光激发时可高效发射清晰可见的绿色荧光,具有稳定、灵敏度高且无需底物或辅助因子参与等优点。自绿色荧光蛋白在大肠杆菌(Escherichia coli)和秀丽隐杆线虫中成功表达后,绿色荧光蛋白及其他荧光蛋白己得到广泛的应用。试验鸡摄入用绿色荧光蛋白(GFP)基因标记的E. coli JM109后,检测这种大肠杆菌在鸡体的排出及其形成气溶胶与传播过程。鸡饮完含E. coli JM109-pGFP饮水(5.0×1010 CFU/只)后,采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器分别在不同时间采集鸡栏框内、栏框外2 m、5 m、10 m、20 m收集气载E. coliJM109-pGFP。通过每一个采样点JM109-pGFP浓度的变化来评估动物舍微生物气溶胶向舍外环境的传播情形。结果显示,试验鸡饮完含E. coliJM109-pGFP的饮水, 0.5 h左右开始排出含E. coliJM109-pGFP的粪便,此时测量栏框内和栏框外2 m、5 m、10 m、20 m处JM109-pGFP气溶胶浓度达最高分别为1.531×103、8.080×102、3.360×102、2.250×102、6.600×10 CFU/m3;栏框内与栏框外不同距离间的JM109-pGFP浓度差异不显著(P>0.05)。30 h时只能在栏框内收集到JM109-pGFP,为7 CFU/m3;36 h后栏框内也消失,而且随着时间各个不同距离的气载JM109-pGFP的浓度逐渐减少。结果表明,说明源于动物舍的微生物气溶胶能够通过舍内外气体交换传播到舍外,依气象条件传播到舍外不同的距离,造成周边环境的生物污染以及病原微生物的扩散。
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一株以葡萄糖为底物产2_3_丁二醇微生物菌株的筛选及鉴定
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抗菌肽基因在E．Coli JM109中的克隆表达产甘油假丝酵母产甘油关键酶基因在酿酒酵母中的表达--《中国生物工程杂志》2006年01期
产甘油假丝酵母产甘油关键酶基因在酿酒酵母中的表达
【摘要】：甘油是一种极其理想的耐高渗透压介质。利用PCR方法,从产甘油假丝酵母WL2002-5中扩增出了2个产甘油的关键酶基因GPD和GPP,分别编码3-磷酸甘油脱氢酶(glycerol3-phosphatedehydrogenase,GPD)和3-磷酸甘油磷酸酶(glycerol3-phosphate phosphatase,GPP)。利用T-Vector在Escherichia coliJM109中克隆得到大量的GPD和GPP基因,并成功构建了重组质粒pYX212-GPD和pYX212-GPP;通过LiAc转化法将重组质粒导入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeW303-1A。初步实验结果表明发酵过程中pYX212-GPD/S.cerevisiaeW303-1A的生物量高于pYX212-GPP/S.cerevisiaeW303-1A和野生型S.cerevisiaeW303-1A;发酵72h后,pYX212-GPD/S.cerevisiaeW303-1A发酵液中甘油含量大约为12mmol/L,明显高于野生型S.cerevisiaeW303-1A的甘油含量,而pYX212-GPP/S.cerevisiaeW303-1A与野生型S.cerevisiaeW303-1A在甘油含量上相差不大,均只有4mmol/L左右。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：Q786【正文快照】：
甘油是一种极其理想的耐高渗透压介质。当环境渗透压升高时,酿酒酵母将合成并在胞内积累甘油以维持细胞内外的渗透压平衡;当在缺氧条件下生长时,酿酒酵母将合成并在胞内积累甘油以维持细胞的氧化还原平衡[1]。存在于胞浆中的3-磷酸甘油脱氢酶,以NAD+为辅酶,催化磷酸二羟丙酮
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重组菌JM109 (pEtac-dhaB-aldh)转化甘油为3-羟基丙酸的研究
重组菌JM109 (pEtac-dhaB-aldh)转化甘油为3-羟基丙酸的研究
Study of JM109(pEtac-dhaB-aldh) capable of producing 3- hydroxypropionic acid from glycerol
发布时间：　　浏览量：359　　收藏数：1　　评论数：
江南大学医药学院；
将编码乙醛脱氢酶编码基因aldh连接重组质粒pEtac-dhaB，转化大肠杆菌，得到产3-羟基丙酸重组大肠杆菌JM109 (pEtac-dhaB-aldh)，并对影响该重组菌发酵的营养因子进行研究。实验结果表明：该重组菌转化甘油合成3-羟基丙酸的适宜培养基组成为甘油40 g/L、维生素B12 0.02 g/L、KH2PO4 7.5 g/L以及酵母膏6 g/L，3-羟基丙酸产量和转化率分别达到4.9 g/L和12.3 %。
3-羟基丙酸；重组大肠杆菌；甘油；营养因子
Zhang Xiaomei*
School of Medicine and Pharmaceutics, Jiangnan University；
Abstract：
The expression vector pEtac harboring aldh gene and dhaB gene was transformed into E.coli JM109 to construct recombinant Escherichia coli JM109 (pEtac-dhaB-aldh). Some nutrient ingredient affecting fermentation results of this recombinant strain were also studied. The results demonstrated that the optimized medium comprised (g/L) glycerol 40, yeast extract 6.0, KH2PO4 7.5 and Vitamin B12 0.02. The 3- hydroxypropionic acid concentration, yield on glycerol could reach4.92 g/L and 12.3 % respectively.
Keywords：
3-Hydroxypropionic acid (3-HP); recombinant E nutrient ingredient
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&&&&（164）
作者简介：
张晓梅 女 博士
通信联系人：
【收录情况】
中国科技论文在线：张晓梅.&重组菌JM109 (pEtac-dhaB-aldh)转化甘油为3-羟基丙酸的研究[EB/OL].北京：中国科技论文在线&
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