为什么要摇菌管啊，什么时候摇

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-12-17 10:44 标签： 摇菌多久可以提质粒
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【求助】关于摇菌
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这个帖子发布于8年零95天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
如果用1L 的三角烧瓶（或者锥型瓶）摇菌的话，怎么封口才能保证可以是细菌得到很好的通气效果，避免氧气不足而大量死亡？还有1L的瓶子一般装多少毫升的LB液？恳请各位大侠解答，我急用！
不知道邀请谁？试试他们
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500MLLB没问题的, 用牛皮纸加纱布封口绳子绑好,灭菌后烘干,直接可用.
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谢谢大侠指点，我想问一下是牛皮纸包着纱布，还是纱布包着牛皮纸啊？这个问题虽然有点白痴，但是我还是想搞清楚一点，谢拉
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摇菌时一般1L的锥形瓶放200-300 ml的培养基，不要放太多，我摸过体积梯度，这个范围细菌的状态较好，蛋白表达量较高。用4层纱布覆盖瓶口，用绳子固定牢就可了，纱布太厚或加盖牛皮纸、报纸影响通气，4层纱布足够了！
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呵呵，谢谢xiaonizi的恢复，四层纱布应该是医院用的那种无菌纱布吧，我回去实验一下，但是我是摇菌提取质粒的，1L的锥形瓶放200-300 ml的培养基是不是少了点，400ml可不可以？盼回答！
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如果空气湿度不大，4层纱布足够；不然要多加几层，做过8-12层（要用新的纱布），也可以。1L装量200-300合适，400ml太多，实在要较多菌液，多养几瓶呗。
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同意chipher意见，菌密度过大容易质粒丢失，还是多摇一瓶吧，不麻烦
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再问一句，为什么说湿度不大用4层纱布，而湿度大了要多加几层纱布，什么原理啊？
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ljwan edited on
培养基一般装容器体积的20%吧，容器大可以适当增加一点，封口的话我感觉封口滤膜就不错啊。
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请问楼上的，你用的封口滤膜具体值得是什么？是我们用的封口膜吗（Parafilm)？这样的封口滤膜或者说Parafilm会不会不透气把细菌给憋死了，望指教。
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不是封口膜，是一种象塑料纸一样的东西，正方形，在纸的中央有一块圆形的滤纸，用于透气。很多公司都有买。这个在做酵母表达的时候是很好用的东西。
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不是封口膜，是一种象塑料纸一样的东西，正方形，在纸的中央有一块圆形的滤纸，用于透气。很多公司都有买。这个在做酵母表达的时候是很好用的东西。这个东西好像叫 封瓶膜，我不记得我们买的是哪个公司的，当时是鼎国代理的，16×16cm/500张好像是70元，很好用
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一般都还是装容器体积的20%，不要贪心，多了反而效果不好。多摇一瓶的效果还好些。不过我们一般都是用8层纱布。在灭菌的时候会在外面包上一层牛皮纸，不过接上菌，就不用牛皮纸了，可以达到较好的通气效果。
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谢谢各位大侠的热情帮助，感觉自己对这个问题越来越明白了。不知各位谁有关于质粒大量提取的好的实验步骤，要求产量要高，纯度可以达到转染级别，并且一次操作下来时间不要太长，谢谢各位热心人拉。
当然拉，关于摇菌封口的问题，谁有更好的方法，可以继续提供，小弟还望各位不吝赐教！
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要求产量要高，纯度可以达到转染级别，并且一次操作下来时间不要太长，太贪心了哦，那最好买试剂盒。
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呵呵，寂静之声取笑我拉，我也想用试剂盒啊，可是老板要求做很多，次数少还可以，次数比较多，试剂盒用不起啊，不过如果你有好的质量大量提取的方法步骤，恳请你帮忙传上来给我看一下啦！
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我们摇菌就直接用牛皮纸包瓶口的，也可以阿！
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hysong 我们摇菌就直接用牛皮纸包瓶口的，也可以阿！不知道透气效果和纱布以及封瓶膜相比如何？能不能给出你的本人实际效果？
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呵呵，没有比较过。我们实验室一直都用牛皮纸包的，实验照样可以做出来啊！
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我们一直用锡箔纸。也不错。
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请问像大肠杆菌之类兼性厌氧菌是不是可以密封呀
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关于丁香园您的网站因未备案或涉及违规被禁止访问，请及时联系实际接入商办理备案.摇菌为何越摇越清亮(摇菌,温度,抗生素,何越) - DNA技术 - 生物秀
标题: 摇菌为何越摇越清亮(摇菌,温度,抗生素,何越)
摘要: [摇菌为何越摇越清亮(摇菌,温度,抗生素,何越)] 近半个月来，我们实验室总是出现摇菌越摇越清亮的现象，不论LB中是否加有抗生素(antibiotic)，都会出现这种现象! 摇4个小时左右时，OD值能达到0 4，但继续摇时就越来越清亮了，但时间很长的话，又出现混浊，本人认为此时已是杂菌了!温度测了是37度，转速为200-270rpm。有时甚至出现，用1 5ML的ml管可以摇混，但用7ml的管时就会出现上述情况!唉，一年过去了，还没出半点成绩，真是急 关键词:[摇菌 抗生素 温度 何越]……
近半个月来，我们实验室总是出现摇菌越摇越清亮的现象，不论LB中是否加有抗生素(antibiotic)，都会出现这种现象! 摇4个小时左右时，OD值能达到0.4，但继续摇时就越来越清亮了，但时间很长的话，又出现混浊，本人认为此时已是杂菌了!温度测了是37度，转速为200-270rpm。有时甚至出现，用1.5ML的ml管可以摇混，但用7ml的管时就会出现上述情况!唉，一年过去了，还没出半点成绩，真是急死人了，还请各位大侠指点!3Q
回复可能是被噬菌体污染了吧？回复也有可能是污染了酵母菌。回复我们实验室提的质料总一条恒定的带，单双切都存在，这是不是进一步说明是酵母菌污染了？可我们实验室没用过酵母菌呀!回复可能是噬菌体，也可能是别的杂菌，总之不正常。后来的浑浊建议镜检一下，多半是杂菌。去年我们实验室也有一段时间老染菌，后来用新洁而灭大面积消毒过后就好了。建议可以消毒试试！回复谢谢，看来仅用紫外杀菌还不行，我打算用新洁尔灭来试试，来一次大的彻底的消毒!回复给你个建议，在加有抗生素(antibiotic)的培养基里长出来的菌在丢弃之前最好是先灭菌或是在沸水中煮30分钟，这样以后就可以减少被污染的机率。另外，在接种之前要是能先用75%的酒精先擦拭一下超净台内部，再用紫外灯照射20分钟后使用可以减少被污染的机率。回复我也出现过这样情况，而且对混浊的菌体用碱裂解抽提，发现菌体并不裂解，但过一段时间后这情况又没了回复我觉得霉菌的可能性更大一些，一些绿霉菌属的菌株生长条件在这个温度和时间段最容易生长，所以对接种的超净台和培养室的空气灭菌也很重要，给你个比较土的办法但效果还不错，5平米的房间大约使用15ml福尔马林+40g高锰酸钾的空气灭菌，不过2天之内不要进入，这样灭菌后一段时间，污染的机率会很小的，但是不要过量，否则会很麻烦。
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【求助/交流】关于摇菌的问题
昨天晚上摇菌，结果摇了三个小时后摇菌的机子停了，不在摇动了，但是温度不变，到我发现时已经七个小时没摇了，这样对菌有问题？
呵呵~lz的摇床应该是定时的吧？要不也不能知道摇床停止的时间，我以前也遇见过这样的问题。
这样长出来的菌还是不要用的好，因为既然是摇菌那肯定是好氧菌，静止培养所获得的氧气不足，很多代谢通路都改变了。
如果是用来做感受态，那就更不能用了。
如果是用菌的基因组做模板进行PCR的话，应该还可以用。
不知lz用来做什么？
摇瓶需要摇动的原因是因为要加强溶氧，证明你的菌是好氧的，所以长时间没有摇动可能导致菌体停滞生长，死亡，本人认为大部分菌体可能已经提前老化了。
测序用的，还能再用吗？
测序应该问题不大，是测全基因组么？还是换新鲜的菌比较保险，免得结果不好分析。
能用，遗传物质不会变的
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