正向测序测成功，ie11 反向和正向缓存却测失败是什么原因

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-11-09 14:20 标签： ie11 反向和正向缓存
测序时,为何要有正向和反向之分?(测序) - DNA技术 - 生物秀
标题: 测序时,为何要有正向和反向之分?(测序)
摘要: [测序时,为何要有正向和反向之分?(测序)] 谢谢! 关键词:[测序]……
回复每个测序时每个反应能测出的长度是有一定限制的,比如说800bp,因此,如果我们要测一个2000bp左右的片段的话,一个反应是不够的,此时,通过正向和反向各测一次,结果合并就可以得到这个片段的序列.另外,正反测序还有一个重要的作用就是提高测序的准确率,相当于测了2次,起到了重复验证的作用回复顶起 最近也碰到这个问题。谁来帮忙解释下啊。。。回复用的引物不一样，自然就有正向和反向之分，其实测序跟PCR差不多的，假设双链DNA的两条链，与正向引物序列相同的链称为1，与反向引物序列相同的链称为2，正向引物测序时，正向引物与2结合，扩增出来的就是与2互补的1，因此，读出来的就1的序列，即正向的。反之亦然。回复用的引物不一样，自然就有正向和反向之分，其实测序跟PCR差不多的，假设双链DNA的两条链，与正向引物序列相同的链称为1，与反向引物序列相同的链称为2，正向引物测序时，正向引物与2结合，扩增出来的就是与2互补的1，因此，读出来的就1的序列，即正向的。反之亦然。正解!回复测序的原理是单引物的碱基终止的PCR反应过程，每次测序只有一个引物扩增，当然要分方向了，真是根本原因回复你也可以根据你的被测序列的碱基组成来选择正向测序还是反向测序
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正反向测序问题
本人最近将一外源片段和质粒利用EcoRV与MluI酶切后连接，挑去单克隆进行测序。分别设计正反向引物，反向引物测序结果显示目的基因后半部分正确，正向引物测序结果很乱（发现将正向引物测序结果和反向测序结果align后，这两个测序序列基本相同，将两个序列结果assemble测序显示目的基因后半部分正确，故得不到前半部分结果）。第一次怀疑引物设计出现问题，第二次利用T7通用引物再次正向测，结果同第一次。不知道问题出现在了哪里？
求高手指教。
这个我知道的，问题出现在了测序部分。
多送几个克隆去测，有时候模板质量不好也会有问题。
您好，想问一下，刚开始使用自己的引物正向测序，结果有几个碱基发生突变，有一个样品突变较多。第二次使用通用引物反向测序后结果很好，没有突变。那说明我的结果可以正常使用吗，还是需要做其他的。谢谢。
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