三氧化二砷在异种胰岛移植中作用研究--《厦门大学》2014年硕士论文
三氧化二砷在异种胰岛移植中作用研究
【摘要】：背景：糖尿病可行有效的治疗方法之一是胰岛移植,现今临床同种免疫抑制剂得到极大发展使得部分移植患者术后长期生存过上类似正常人生活,但是依然有大部分患者达不到理想免疫抑制效果并且忍受着免疫抑制剂的诸多副作用。同时供体不足限制了胰岛移植的发展,异种移植就能解决这个问题。虽然异种来源的胰岛细胞较充足,但异种移植面临的排斥反应机制非常复杂,目前对异种移植排斥都没有得到充分的认识,限制了临床异种移植发展的进程。因此我们目前亟需认识同种和异种移植的差别并开发适用于异种移植的免疫抑制剂。
方法：我们提取出Lewis大鼠胰岛,然后进行Lewis大鼠到C57BL/6小鼠肾被膜下的胰岛移植。首先,我们尝试开发中药传统药物As2O3,研究其在异种胰岛移植中的作用。其次,为了达到更理想的效果,我们把As2O3和RAPA联合应用于异种胰岛移植,探讨两者联合应用效果及其机制。
结果：Lewis大鼠到C57BL/6小鼠(对照组)的胰岛移植物中位生存期(median survival time, MST)为12天, As2O3组中位生存期15天,两者比较差异有统计学意义(P0.05)。As203通过诱导脾细胞凋亡和降低血清中IFN-γ水平发挥作用。As2O3联合RAPA中位生存期28天,而前期同种移植联合用药组有2/6生存期超过100天。异种移植联合用药效果不如同种胰岛移植主要是因为异种胰岛移植排斥较同种胰岛移植强烈尤其是体液免疫更为明显。RAPA联合As203组在排斥时间点IgG抗体处于高水平。
结论：As203能够延长异种胰岛移植生存期；As203能够诱导脾细胞凋亡、降低部分细胞免疫水平,但不能降低体液免疫水平。异种胰岛移植As203联合RAPA应用不能对抗体液免疫反应。
【关键词】：
【学位授予单位】：厦门大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2014【分类号】：R657.5;R96【目录】：
摘要8-9Abstract9-11第一章 前言11-24 1.1 胰岛移植12-15
1.1.1 同种异体胰岛移植12-13
1.1.2 异种胰岛移植13-15 1.2 胰岛移植排斥反应15-19
1.2.1 T细胞与胰岛移植16-17
1.2.2 B细胞与胰岛移植17-19 1.3 胰岛移植中免疫抑制剂的应用19-22
1.3.1 化学免疫抑制剂：环孢菌素A他克莫司西罗莫司19-21
1.3.2 新型中药来源的免疫抑制剂的开发：雷公藤多苷、FTY-720、三氧化二砷(Arsenic trioxide,As_2O_3)21-22 1.4. 研究的目的、意义、内容22-24第二章 材料与方法24-37 2.1 实验材料24-26
2.1.1 实验动物24
2.1.2 实验仪器24
2.1.3 试剂24-26 2.2 实验方法26-36
2.2.1 大鼠及小鼠胰岛的分离与纯化26-27
2.2.2 胰岛DTZ染色27
2.2.3 胰岛细胞活性检测27-28
2.2.4 糖尿病小鼠模型建立28
2.2.5 胰岛肾被膜下移植28-29
2.2.6 用药方案29-30
2.2.7 细胞免疫学研究方法30-33
2.2.8 分子生物学研究方法33-36 2.3 统计学分析36-37第三章 结果与讨论37-55 3.1 胰岛移植模型的建立37-39
3.1.1 胰腺灌注、胰岛提取、胰岛移植过程37
3.1.2 胰岛形态学观察、纯度鉴定及活性检测37-38
3.1.3 糖尿病小鼠模型建立及胰岛移植38-39 3.2 As_2O_3在异种胰岛移植中的作用39-44
3.2.1 As_2O_3能够延长异种胰岛移植生存期39-41
3.2.2 As_2O-3能够诱导脾细胞凋亡41
3 2.3 As_2O_3用药后对受者淋巴结CD4、CD8比例影响41-42
3.2.4 As_2O_3用药后对异种胰岛移植Th1/Th2免疫类型的影响42-43
3.2.5 As_2O_3用药后对异种胰岛移植体液免疫的影响43-44 3.3 As_2O_3联合RAPA在异种胰岛移植中的作用44-55
3.3.1 As_2O_3联合RAPA在同种和异种胰岛移植中的生存期44-46
3.3.2 同种异体胰岛移植和异种胰岛移植对比研究46-54
3.3.3 As_2O_3联合RAPA用药后对异种胰岛移植体液免疫的影响54-55第四章 结论与展望55-57附录57-60参考文献60-69致谢69
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3各系统安全操作规程
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预防高处坠落安全技术措施
建筑施工行业高空作业是建筑施工最突出的特点，施工作业人员多，即使是地下管道等工程施工也有深坑、深槽的防坠落问题。由于高处施工作业四边临空、条件差、危险因素多，伤害程度重。因此，预防高处坠落事故在建筑行业安全工作中是居第一位的工作。目前在安全技术上采取的安全措施综合起来有两种：一是设置防护栏、立网、铺满架板、盖好洞口等安全防护措施，从根本上避免人员坠落。二是架设安全平网，作为防止坠落者不受伤害或者减轻伤害的预防措施。现将施工现场安全生产规定如下：
一、安全“三宝”。安全帽、安全带、安全网
进入施工作业现场的员工必须带好符合标准的安全帽，帽衬帽壳之间必须保持4cm
―5cm的间隙，并要系好帽带，防止脱落、或者坠落物件把帽子打掉致伤头部。
2、凡在2米以上悬空作业人员须系好安全带。有的悬空作业点没有挂安全带的条件时，
应在施工组织设计中事先考虑安全措施，如设置挂安全带的安全拉绳、安全栏杆等。
3、凡无外架防护的施工，高处作业点的下方必须设安全网。一般必须在离地高度4米
至5米处设一层固定安全平网，以后每隔4层楼再设一道固定安全平网。并同时设一道随施工作业面逐层上升的安全网。安全网宜采用小孔网眼，并符合国家标准制造要求。
二、“四口”防护
在建、安装施工中，凡楼梯口、电梯口、井架口、预留洞口（包括垃圾口）必须设围
墙可盖板、架网。正在施工的建筑物深坑基础施工时，对深度在2米以上的基坑、槽的周围要设置围栏和防坠落物的安全网。
三、“周边”防护措施
在施工作业过程中，尚未安装栏杆的阳台周边，无外脚手架防护的屋面周边、框架工程楼
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焊接作业安全操作规程
    　　
　　一、气焊与气割作业安全操作规程：
　　(1)在氧气瓶嘴上安装减压器(推荐:换热器)之前，应进行短时间吹除，以防止瓶嘴堵塞。严禁使用未装减压器的气瓶；
　　(2)氧、乙炔瓶嘴部和开瓶的扳手上不得有油污；
　　 (3)氧、乙炔瓶应距明火lOm以上，氧、乙炔瓶之间的距离应在5m以上；
　　 (4)氧、乙炔瓶不得在烈日下曝晒，不得靠近火源与其他热源；
　　 (5)焊割炬点火前应检查连接处和各气阀的严密性。对新使用的焊炬和射吸式割炬还应检查其射吸能力；
　　 (6)焊割炬点火时应先开乙炔阀，后开氧气阀，嘴孔不得对着人；
　　 (7)焊炬、割炬的焊嘴因连续工作过热而发生爆鸣时，应用水冷却，如因堵塞而爆鸣，则应停用，剔通后方可继续使用；
　　 (8)在易燃易爆生产区域内动火，应按规定办理动火审批手续；
　　 (9)气焊与电焊在同一地点作业时，气瓶应垫上绝缘物，以防止气瓶带电。
　　二、手工电弧焊作业安全操作规程由于手工电弧焊利用的能源是电，同时电弧在燃烧过程中产生高温和弧光，药皮在高温下产生一些有害气体和尘埃。所以，在操作过程中存在触电、弧光和电热伤害、有毒有害气体侵蚀、火灾与爆炸等不安全因素。
　　手工电弧焊操作安全要求：
　　 (1)在下雨、下雪时，不得进行露天施焊；
　　 (2)在高处作业时，不准将焊接(推荐产品:宁波焊接)电缆放在电焊机(推荐产品:宁波焊接机)上，横跨道路的电焊线必须有防压措施。施焊前应先检查周围不得有易燃易爆品，并系好安全带；
　　 (3)二次线不宜过长，一般应根据工作时的具体情况而定；
　　 (4)在施焊过程中，当电焊机发生故障而需要检查时，须切断电源，禁止在通电情况下用手触及电焊机的任何部位，以免发生事故；
　　 (5)严禁将焊接电缆与气焊的胶管混在一起；
　　 (6)在容器内焊接时，应使用绝缘防护用具，通风、照明应良好；
　　 (7)在焊接时，不可将工件拿在手中或用手扶着工件进行焊接；
　　 (8)露天装设的电焊机应设置在干燥的场所，并应有棚遮蔽；
　　 (9)电焊机的外壳必须可靠接地，接地电阻不得大于机，不得多台串连接地；
　　 (10)严禁将电缆管、电缆外皮或吊车轨道等作为电焊导线。电焊导线不得靠近热源， 并严禁接触钢丝绳或转动机械。
收录时间:日 16:56:52 来源:国联资源网 作者:匿名
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