求土壤里腐殖酸含量测定方法和提取方法尽量给能在大学实验室能完成的方法,
土壤学上有关“有机质”、“腐殖质”、“腐植酸”的概念非常混乱.一般认为,能溶于碱性溶液的土壤有机质就是腐殖质,实际上与腐植酸是同义词.我介绍的下述《土壤腐殖质组成的测定》,实际就是腐植酸（包括胡敏酸和富里酸）的测定方法.你提问的腐植酸的提取方法,也可参考本方法中的6.2等的操作部分.因本格式对Word中的公式、表格等格式不相容,故有许多错误之处.请直接在网上搜索”土壤腐殖质组成的测定”主题词,可查到原文.
土壤腐殖质组成的测定—重铬酸钾氧化法1 范围本方法适用于土壤腐殖质组成的测定.2 原理土壤腐殖质由胡敏酸、富啡酸和存在于残渣中的胡敏素等组成.采用焦磷酸钠-氢氧化钠浸提液提取腐殖质,浸提液具有极强的络合能力,能将土壤中的难溶于水和易溶于水的结合态腐殖质,结合成易溶于水的腐殖酸钠盐,从而较完全地将腐殖质提取到溶液中.取一部分浸出液测定碳量,作为胡敏酸和富啡酸的总量.再取一部分浸出液,经酸化后使胡敏酸沉淀,分离出富啡酸,然后将沉淀溶解于氢氧化钠中,测定碳量作为胡敏酸含量.富啡酸可按差数算出.留在土样残渣中的有机质胡敏素,由腐殖质测定中的全碳量减去胡敏酸和富啡酸的含碳量算出.碳量的测定采用重铬酸钾氧化外加热法.3 试剂3.1 浸提液：0.1mol/L焦磷酸钠-0.1mol/L氢氧化钠混合液,称取44.6g焦磷酸钠(Na4P2O7·10H2O)和4.0g氢氧化钠,用水溶解,再用水稀释至1000mL,溶液pH在13左右.3.2 氢氧化钠溶液：0.05mol/L,称取2g氢氧化钠,用水溶解,再用水稀释至1000mL.3.3 硫酸溶液：0.5mol/L,取28mL硫酸（ρ1.84g/mL）,缓慢注入水中,再加水稀释至1000mL.3.4 硫酸溶液：0.025mol/L,取20mL 0.5mol/L硫酸溶液,用水稀释至1000mL.3.5 重铬酸钾标准溶液：0.8000mol/L,称取经150℃烘干2h的39.2248g重铬酸钾（K2Cr2O7）,精确至0.0001g,加400mL水,加热溶解,冷却后,加水稀释至1000mL.3.6 硫酸亚铁铵标准溶液：0.2mol/L,称取80g硫酸亚铁铵[Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O],溶解于水,加15mL硫酸（ρ 1.84g/mL）,再加水稀释至1000mL.标定：吸取10.00mL重铬酸钾标准溶液置于250mL锥形瓶中,加入40mL水和10mL(1+1)硫酸,再加3滴~4滴邻菲啰啉指示剂,用硫酸亚铁铵标准溶液滴定至溶液由橙黄色经蓝绿色至棕红色为终点.同时做空白试验.硫酸亚铁铵标准溶液浓度按下式计算：1211VVVCC−×=式中：C——硫酸亚铁铵标准溶液浓度,mol/L；C1——重铬酸钾标准溶液浓度,mol/L；V1——重铬酸钾标准溶液体积,mL；V2——硫酸亚铁铵标准溶淮用量,mL；V0——空白试验消耗硫酸亚铁铵标准溶液体积,mL.3.7 邻菲啰啉指示剂：称取1.485g邻菲啰啉（C12H8N2·H2O）和0.695g硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）,溶于100mL水中,形成的红棕色络合物贮于棕色瓶中.3.8 石英砂,黄豆大小.3.9 硫酸,（ρ 1.84g/mL）.3.10 硫酸银,研成粉末.4 仪器4.1 油浴锅,内装固体石蜡或植物油.4.2 水浴.14.3 铁丝笼架,形状与油浴锅配套,内设若干小格,每格内可插一支试管.4.4 硬质试管,25mm×100mm.4.5 注射器,5mL.4.6 温度计,250℃.4.7 锥形瓶,250mL.4.8 振荡机.5 试样制备取10g未磨过的均匀风干土样,挑去砾石和植物残体,研磨,并通过0.149mm 筛孔,装于小广口瓶中备用.称样测定时,同时另称样测吸附水,最后换算成烘干样计算结果.6 操作步骤6.1 腐殖质中全碳量的测定：同F-HZ-DZ-TR0046土壤有机质的测定（重铬酸钾氧化外加热法）.6.2 待测溶液的制备：称取5.0000g土样（精确至0.0001g）置于250mL锥形瓶中,加入100.00mL浸提液,加塞,振荡5min后,放在沸水浴中加热1h.摇匀,用慢速滤纸过滤.如有浑浊,可倒回重新过滤.如过滤太慢,也可用离心机离心澄清,清液收集于锥形瓶中,加塞,待测.弃去残渣.6.3 胡敏酸和富啡酸中总碳量的测定：吸取5.00mL~15.00mL浸出液（视溶液颜色深浅而定）,置于盛有少量石英砂的硬质试管中,逐滴加入0.5mol/L硫酸溶液中和至pH7（用pH试纸试验）,使溶液出现混浊为止.将硬质试管放在水浴上蒸发至近干,然后用重铬酸钾氧化外加热法测定胡敏酸和富啡酸总碳量,操作步骤同F-HZ-DZ-TR-0046土壤有机质的测定（重铬酸钾氧化外加热法）5.6.4 胡敏酸中碳量的测定6.4.1 胡敏酸和富啡酸的分离：吸取20.00mL~50.00mL浸出液（视溶液颜色深浅而定）,置于250mL锥形瓶中,加热近沸,逐滴加入0.5mol/L硫酸溶液中和至pH1~1.5（用pH试纸试验）,此时应出现胡敏酸絮状沉淀.将锥形瓶在80℃水浴上保温半小时,使胡敏酸充分分离.冷却后,取慢速滤纸,先用0.025mol/L硫酸溶液湿润滤纸,过滤,用0.05mol/L硫酸溶液洗涤锥形瓶和沉淀,直到滤液无色为止,沉淀即为胡敏酸.弃去滤液.6.4.2 胡敏酸的测定：沉淀用热的0.05mol/L氢氧化钠溶液少量多次地洗涤溶解于100mL容量瓶中,直到滤液无色为止,用水稀释至刻度,摇匀.吸取10.00mL~25.00mL溶液（视溶液颜色深浅而定）,置于盛有少量石英砂的硬质试管中,逐滴加入0.5mol/L硫酸溶液中和至pH 7（用pH试纸试验）,使溶液出现混浊为止.将硬质试管放在水浴上蒸发至近干,然后用重铬酸钾氧化外加热法测定胡敏酸中碳量,操作步骤同F-HZ-DZ-TR-0046土壤有机质的测定（重铬酸钾氧化外加热法）5.注：测定土壤腐殖质与土壤腐殖质组成的样品必须采用同一个样品,测定前在放大镜下将肉眼能看清的全部有机残体挑选干净,然后磨细通过0.149mm筛孔.7 结果计算土壤腐殖质全碳量按（1）式计算,胡敏酸和富啡酸总碳量按（2）式计算,胡敏酸碳量按（3）式计算,富啡酸碳量按（4）式计算,胡敏素碳量按（5）式计算：腐殖质全碳量(g/kg)=.0)(00.××××−××KmVVV……(1)胡敏酸和富啡酸总碳量(g/kg)= .0)(00.×××××−××KmtVVV……(2)2胡敏酸碳量(g/kg)=.0)(00.×××××−××KmtVVV……(3)富啡酸碳量(g/kg)=胡敏酸和富啡酸总碳量(g/kg)―胡敏酸碳量(g/kg)……(4)胡敏素碳量(g/kg)=腐殖质全碳量(g/kg)―胡敏酸和富啡酸总碳量(g/kg)……(5)式中：0.8000——重铬酸钾标准溶液浓度,mol/L；5.00——重铬酸钾标准溶液体积,mL；V0——空白试验消耗硫酸亚铁铵标准溶液体积,mL；V1——测定腐殖质全碳量消耗硫酸亚铁铵标准溶液体积,mL；V2——测定胡敏酸和富啡酸总碳量消耗硫酸亚铁铵标准溶液体积,mL；V3——测定胡敏酸碳量消耗硫酸亚铁铵标准溶液体积,mL；0.003——1/4碳原子的毫摩尔质量,g/m mol；1.1——氧化校正系数；t——分取倍数；m——风干土样质量, g；K——风干土样换算成烘干土样的水分换算系数.8 允许差样品进行两份平行测定,取其算术平均值,取一位小数.两份平行测定结果允许差按表1规定.
表1 腐殖质测定允许差
腐殖质量（g/kg）
允许差(g/kg)
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