补体的特性总补体偏高是什么病啊

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-09-27 08:59 标签： 补体c3偏低是什么病
优秀研究生学位论文题录展示鸡补体C3部分生物学特性的研究专　业: 预防兽医学关键词: 鸡 补体C3 21肽 大肠杆菌 免疫增强 细菌性疫苗分类号: S858.31　
S852.4形　态: 共 93 页　约 60,915 个字　约 2.914 M内容阅　读: 内容摘要补体是动物体液中重要的免疫物质，由40多种蛋白质组成，广泛存在于血清、组织液和细胞膜表面，是具有精密调控机制的蛋白质反应系统，其活化过程表现为一系列丝氨酸蛋白酶的级联酶解反应。多种微生物成分、抗原-抗体复合物以及其他外源性和内源性的物质可通过3条途径经典激活途径、旁路激活和途径MBL激活途径激活补体，这3条途径以裂解C3形成C3b相互交叉，由C3b形成不同的C5转化酶C4b2a3b、C3bBb，激活补体C5开始共同的终末反应过程，最后形成膜攻击复合物MAC插入靶细胞，通过破坏靶细胞局部磷脂双层而形成渗漏斑，或形成穿膜的亲水性孔道，导致靶细胞崩解。可见补体C3是补体系统发挥免疫作用的关键分子。在以上理论的指导下，本课题对鸡补体C3的主要生物学特性进行了研究，探明了鸡体内补体C3的分子量、含量以及C3的作用、作用原理进行了研究.1.探明了鸡与哺乳动物对细菌性疫苗免疫效果不同的原因。在实验中，将078大肠杆菌活化，扩大培养，以甲醛灭活，蜂胶为佐剂制备大肠杆菌颗粒性疫苗，免疫11日龄海蓝褐蛋用公雏，制备大肠杆菌抗血清；将大肠杆菌抗血清中的补体灭活，使之与已定数量的大肠杆菌反应，形成抗原抗体复合物，然后加入不同动物的新鲜血清，通过细菌计数，观察不同动物血清补体对大肠杆菌的清除能力；建立了微量血凝法测定动物血清补体效价，并对鸡和几种哺乳动物新鲜血清中的补体总活性进行测定。结果表明，单纯抗体与活菌结合后，对细菌的清除作用影响微弱，而加入补体后，抗体杀灭细菌的能力明显增强；经比较，哺乳动物血清中的补体对细菌的清除能力明显高于鸡；而豚鼠的补体的杀菌能力又明显高于其他哺乳动物；对不同动物血清补体总活性的测定结果表明，成年SPF鸡的补体总活性为25，低于兔、猪、牛、羊、豚鼠等哺乳动物，在这几种哺乳动物中，豚鼠的血清补体总活性为28。由此证明：不同动物体内补体活性的差异是哺乳动物和鸡对细菌性疫苗免疫效果不同的原因。2.抗鸡补体C3IgG的制备。按照鸡补体C3的α链上羧基端第1272位到1292位的21个氨基酸残基序列人工合成模拟C3分子的21肽，以戊二醛作为交联剂，与牛血清白蛋白载体偶联结合，制成人工合成抗原复合物。将此人工合成抗原与弗氏佐剂混合乳化成油乳剂疫苗免疫注射家兔，制备成抗21肽血清，并用硫酸铵沉淀法提取抗血清中的IgG；采用间接ELISA方法测定抗21肽血清和IgG的抗体效价。结果表明，人工合成的C3分子的21肽复合抗原具有较强的免疫原性，制成的抗血清中的抗体效价达210，从抗血清中提取的IgG的抗体效价达215。3.不同动物体内补体C3的含量的测定。利用纯化的抗21肽IgG，以间接ELISA方法测定鸡和几种哺乳动物体内补体C3的含量，结果表明，鸡、猪、山羊、牛、豚鼠五种动物血清中的补体C3含量分别为0.34±0.005mg/ml、1.47±0.008mg/ml、1.70±0.005mg/ml、1.78±0.007mg/ml和4.18±0.008mg/ml。以上结果显示，鸡体内的C3含量明显低于其他几种动物，差异极显著p＜0.01.4.抗鸡补体C3bIgG的制备。利用菊糖能够从旁路途径激活补体的特性，使菊糖与新鲜鸡血清反应，补体激活过程中生成的补体C3b分子通过共价键与菊糖分子形成菊糖-C3b，分离反应液中的菊糖-C3b，用于免疫注射家兔制备抗鸡补体C3b血清，并利用ProteinA-SepharoseCL-4B作为层析介质，以亲和层析方法从抗C3b血清中分离纯化抗C3bIgG。应用间接ELISA方法测定抗C3b血清和IgG的抗体效价。结果表明，制成的抗血清中的抗体ELISA效价达212，从抗血清中提取的IgG的抗体效价达218。5.鸡补体C3b的分离纯化。按照说明书，将纯化的抗C3bIgG连接于CNBr-activatedsepharose4BFastFlow的活化位点上，制备以抗C3bIgG为配体的亲和层析柱，用活化SPF鸡血清重复过层析柱，以0.1mol/L氨基乙酸-HCl缓冲液PH2.8洗脱，ELISA检测洗脱液中含有C3b的组分，将分离到的C3b经非变性的PAGE电泳检测，得到单一条带的电泳图谱，经变性的PAGE-SDS电泳检测，电泳图谱上显示两条蛋白带，分别为C3b的α链β链，表明分离到了纯度较高的补体C3b蛋白。6.鸡补体C3b对免疫增强作用的验证。以戊二醛作为交联剂，将分离到的C3b蛋白与大肠杆菌抗原偶联，制备成大肠杆菌-C3b抗原复合物；免疫注射SPF鸡，对照组鸡免疫注射弗氏完全佐剂大肠杆菌疫苗。分别在免疫后的第2、3、4、5、6、7、8、9周采血，用ELISA方法测定血清中的抗体含量，同时测定血清中总补体活性。结果表明，免疫后3周，弗氏佐剂大肠杆菌疫苗诱导鸡体产生的抗体效价高于C3佐剂疫苗组，但至第4周，弗氏佐剂疫苗组的抗体水平达到高峰OD值=0.270±0.004，然后迅速下降，到第九周降至0.200±0.005，而C3疫苗组鸡免疫后的抗体水平持续上升，从免疫后第二周的0.098±0.003上升到第八周的0.275±0.002.证明C3能够促进免疫记忆细胞的产生，并能够使细菌抗原给予免疫细胞持续稳定的刺激，从而使鸡体维持高水平抗体的时间延长。为研制有效的细菌性疫苗，防制诸如鸡大肠杆菌病和鸡沙门氏菌病等细菌性疫病提供理论依据和科学方法..……全文目录符号说明摘要英文摘要前言试验一不同动物血清补体对大肠杆菌杀灭效果的研究试验二抗鸡补体C3抗体的制备试验三鸡与哺乳动物补体总活性与C3含量的比较试验四兔抗鸡C3b抗体的制备试验五鸡体补体C3b成分的分离纯化研究试验六补体C3对大肠杆菌疫苗的免疫增强作用研究结论参考文献相似论文,44
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补体理化的性质
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补体的大多数组分都是糖蛋白，且多属于&球蛋白，约占血清球蛋白总量的10%；C1q，C8等为&球蛋白；C1s，C9为&球蛋白。
正常血清中各组分的含量相差较大，C3含量最多，C2最低。各种属动物间血中补体含量也不相同，豚鼠血清中含有丰富的补体，故实验室多采用豚鼠血作为补体来源。
补体性质不稳定，易受各种理化因素影响，如加热、机械振荡、酸碱、酒精等均可使其失活；在0℃～10℃下活性只保持3～4天，医|学教育网搜集整理冷冻干燥可较长时间保持其活性；加热56℃30min可使血清中绝大部分补体组分丧失活性，称为灭活或灭能。
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