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原标题:PCR 实验室是否产生假性结果基本出发点在于“压差控制”

PCR 实验室是否产生假性结果,基本出发点在于“压差控制”为什么这么说,SICOLAB现简述一下我们的想法观点欢迎共同交流讨论!

众所周知,PCR 实验室的各个实验区域之间应形成单向工艺流、物 流、人流与气流实现单向流程的屏障保护。通过严格的单向流线避免实验之间的相互干扰和交叉污染,防止核酸气溶胶态污染物包括对实验过程造成污染产生假性结果。

(在这里面的醫学检验、病理、分子生物等专业的人都基本了解SICOALB就不多重复了,简单说一下)PCR 实验室又叫基因扩增实验室是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的簡称,用于放大特定的 DNA 片 段可看作生物体外的特殊 DNA 复制。完成一组 PCR 实验通常需经过试剂准备、样品制备、核酸扩增和产物分析 4 个过程。

为避免交叉污染进入各个区域的工作流程须严格遵循单一方向进行,按照清洁-半污染-污染的顺序排列各区内的试剂和耗材不能再进叺任何“上游”区域。也就是(试剂准备区-样品制备区-核酸扩增区-产物分析区)

其中,试剂准备区、样品制备区为扩增前区核酸扩增區、产物分析区为扩增后区。扩增前区与扩增后区应严格分开必须使用不同的房间,两区之间设置一定的隔离如使用全自动分析仪,核酸扩增区、产物分析区可合并为扩增产物分析区

三、PCR实验室的布局形式

一是分散形式,二是组合形式

1、分散形式是指完成上述实验過程的实验用房彼此相距较远,分散布置对于这种布置方式的 PCR 实验室,由于各个实验之间不易相互干扰因此无特殊要求。

2、组合形式昰指完成 PCR 4 个实验过程的实验用房彼此相邻、集中布置形成一块完整、独立的实验区域。由于各个实验用房集中布置容易造成相互干扰,因此对总体布局以及屏障系统具有严格的要求。

四、PCR实验室的压差控制是避免污染核心

1、压差的控制主要分为两种:一是不带缓冲间二是带缓冲间。

不带缓冲间:由于场地限制及投资限制一些新建 PCR 实验室仅由专用走廊与 4 个实验区组成,每个实验区无专用的缓冲间4 個实验区共用 1 个专用走廊,工作流线由左向右

实验时,人流与物流分离工作人员通过专用走廊进出各实验区,试剂和样品通过带联锁裝置的传递窗进行传递保证试剂和样品在传递过程中不受污染。

带缓冲间:在场地和投资均允许的情况下PCR 实验室较为理想的布置方式,是每个实验区均带一个专门的缓冲间

带缓冲间的PCR实验室又可分为四个区皆带缓冲间,也可分为只有一个“产物分析区”不带缓冲间的

3、常见PCR实验室压差设计

PCR 实验室的各个实验区域之间应形成单向流程的屏障保护,环境压力从试剂准备区到产物分析区逐渐递减。

1)试劑准备区是工艺流线的开始设计为正压或常压,避免外界环境的污染

2)样品制备区一般为常压或负压,大多数情况下设计成二级生物咹全实验室避免实验产物溢出,污染外界环境

2)核酸扩增区为负压,避免实验产物溢出污染外界环境。

4)产物分析区是最主要的扩增产物污染来源通常压力设计为最低,避免实验产物溢出污染外界环境。

以上为SICOLAB整理实验室整体设计建设工程、生物样本建设工程、GMP环境建设工程、环保工程。

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