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基因测序工资待遇(上海松江2003年) - 仩海生工
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?1.DNA测序样品的要求 ??2.常用载体特征 ??3.PCR类型测序模板注意事项 ??4. DNA测序常见问题分析及解决办法总结??5. 测序常见问题分析 DNA测序样品的要求 未纯化PCR产物的要求 1. 片段大于200bp;2.请提供50ul PCR扩增产物(总量1ug-2ug);3.取3ul样品应该能够清晰的分辨出目的条带; 自带引物,引物浓度不低于5uM,并请注明 ?备注 ? 纯化后PCR产物的要求 1.PCR产物溶于蒸馏水中(请勿溶解茬TE溶液中);2.浓度大于20ng/ul,体积大于10ul长片段需适当增加量;3.电泳检测条带专一; 自带引物。 ? ? 所有模板均应提供相应的引物信息 自带质粒的要求 1.质粒溶于30~50ul ddH2O中(请勿溶解在TE溶液中)电泳检测浓度大50ng/ul;2. 建议用相关试剂盒提取质粒;3. 如有可能,同时提供1ml含有相应质粒的菌液备用; 4. 需注明載体和插入目的片段长度、以及测序要求 ? 菌样模板的要求 1.说明载体抗性类型,我们提供Amp, Kan, Tet及Chl四种抗生素;2. 其余类型抗生素需自备;应为高拷贝质粒对于低拷贝质粒,请直接提供约1mg纯化质粒;3. 提供1ml左右过夜培养(12h)的菌液加15%灭菌甘油,于Eppendorf管中封口保存防止交叉污染或渗漏;4. 大量样品测序,建议在一次性塑料培养皿固体培养基上穿刺培养;5. 建议尽量提供穿刺培养或斜面培养的菌种(装在EP管中) 自带引物嘚要求 1.浓度不低于5pmol/ul(或5umol/L),溶液体积15-50ul;2. 随机引物(RAPD引物)和简并引物以及引物长度不足15bp不能用于测序;3. 尽可能提供引物全序列、PCR退火温度以供参考。 ? 本公司提供如下通用测序引物: M13+M13-,T7, SP6, T7 terBGH rev, pGL3+, pGL3-,pGEX5’pGEX3’, 5’AOX3’AOX ,a-factor 其他引物请自带或提供序列由我们合成。 常用载体特征 载体