超电子衍射公式分辨极限的提出及推导

——第5期:什么是超分辨

日常苼活中,我们看的超清电视电脑屏幕,照相机拍的照片都有像素一说,比如像素越高,表示图像质量越接近于原始图像如果把低潒素的图片放大到一定程度,图片会非常模糊类似于马赛克的情况。

上面说的图像都是经过机器或者系统得到的图片那么问题来了,洳果直接用人眼观察某一个物体会出现上面类似马赛克的情况吗?答案是也会虽然非常非常小(纳米量级),这就是我们常说的电子衍射公式极限所谓电子衍射公式极限就是,由于光的电子衍射公式特性一个物点发出的光会形成一个弥散斑(也称艾里斑),当二个粅点靠近的时候达到一定程度就不能再区分开来,通常我们把200


2 电子衍射公式极限(图片来源于网络)

那么电子衍射公式极限的大小(即分辨率的大小)又是由谁决定的呢现在我们来看看电子衍射公式极限的公式(本来我是极不情愿在科普文章里面写公式的,霍金曾说過加一个公式就会少一半的读者,好吧为了看清两者之间的关系,最后还是决定加上):

式中δ表示显微镜可分别的最小刻度,λ表示光的波长,NA表示显微镜的数值孔径一般不会超过2。显而易见分辨率的大小与波长λ成正比,波长越小,说明能看清的最小刻度越小。比如,蓝光的波长比红光要小,所以相对应蓝光的最小分辨率要优于红光。可以想到既然波长决定了分辨率的极限,那用更小的波长不僦好了比如紫外光、X射线甚至γ射线(电磁波波长分布见第3讲:详解电磁辐射),这回答没有毛病但是波长越短能量越强,会对被观察的物体产生损伤尤其是活细胞,这自然是我们不愿意看到的那么问题又来了,有没有波长又很短但是能量却不强,不会对观测目標造成伤害的回答是:还真有,电子显微镜电子显微镜采用的是电子束,而不是可见光一般可见光波长范围在300~750 nm,但是电子束的波长當加速电压为50~100 kV时可以达到0.0053~0.0037 nm。所以电子显微镜的分辨率可达到0.1~0.2 nm,远优于可见光的200 nm别高兴得太早,凡是有利必有弊电子显微镜的樣本必须在真空环境中才能够被观察,so活细胞之类的都不行应用局限性太大。
      看到这里各位看官不要着急,我们肯定有办法能够超过電子衍射公式极限的当然,之前的讨论也不是没有用处的至少让我们明确一点,电子衍射公式极限并不是目标物体天然存在着分辨率極限而是我们还没有这个水平看得更细、更清楚。那么在介绍超分辨技术之前先来一探为什么我们不能看得更细的物理本质吧!

前面提到,由于光的物理特性(电子衍射公式特性)的存在导致点光源形成艾里斑,重叠以后就难以分辨这一电子衍射公式特性本质上来源于量子光学里的不确定性原理(即海森堡的测不准原理)。不确定性原理表示你不可能同时知道粒子的位置和速度(动量),动量不確定性越小位置不确定度越大,反之亦然换句话说,当一个光子在某个方向的动量范围确定的情况下其分辨率也就确定下来了。根據光子动量的公式p=h/λ,波长λ越小,动量不确定度Δp越大那就意味着位置不确定度越小,分辨率就越高其实与公式(1)相吻合。
然后我們再从傅里叶理论的角度来分析解释下:学摄影或者图像处理的都知道携带物体信息的光波,高频部分代表细节低频部分代表轮廓。那如果我们分辨不出图像的细节只能说明物体高频部分的信息丢失了。为什么呢由于光有很宽的频谱范围,而光频率的较高部分当滿足一定的相位匹配条件,会形成倏逝波而倏逝波的特点是光的幅值在垂直深度方向指数衰减,这意味着物体含有高频部分的光走了波長量级的路程后就衰减没了只有低频部分的光到达成像面,因此导致信息(细节部分)的丢失
      而关于上面加黑的那句话“高频部分代表细节,低频部分代表轮廓”有人可能不太理解那么我们再引入点扩展函数和傅里叶理论融会贯通。
      点扩展函数是以空间频率为变量传遞的像的调制度和相移的函数顾名思义,点扩展函数从频域上来说是以频率为变量而时域上是如图2的脉冲图像。接下来我们再来看看傅里叶级数的变化吧。
如图3所示(a)图是N=1,表示频率ω的正弦函数,(b)图表示频率ω和频率3ω的叠加,(c)表示频率ω、频率3ω、频率5ω、频率7ω的叠加,(d)表示10个不同频率的叠加显然,当高频率叠加得越多叠加后的时域图形越接近于矩形(其实脉冲上升沿的斜率就代表着细节高频成分的多少)。想象一下如果如图2的点光源,时域脉冲是一个矩形的样子而不是一个高斯线型,那么分辨率还會因为艾里斑叠加而看不清吗当然,这只是一个非常理想的愿望永远也不可能实现,例如现在的激光器追求的光束质量品质因子就是這样要求尽量小的光束发散角,但永远也不可能不发散


3 傅里叶级数(图片来源于知乎,作者 Heinrich)

前面提到由于倏逝波的原因高频部汾的光只能传播波长量级的距离就衰减了,导致细节部分丢失分辨率最高一般只能在200 nm左右。那如果要实现超分辨的第一个办法就是:乘咜还没衰减之前就成像这就是传说中的近场成像,近场成像自然不受传统的电子衍射公式极限的限制分辨率能够高达纳米量级,但是茬应用上存在同样的问题如此贴近距离的测量,一则肯定不利于活细胞的观测二则视场被限制得很厉害,存在畸变失真
      那么相对于菦场成像,另外一个就显而易见了远场成像。通常我们所说的光学显微镜的超分辨成像技术指的就是远场成像,2014年诺贝尔化学奖授予叻美国及德国三位科学家Eric Betzig、Stefan W. Hell和William E. Moerner以表彰他们在远场超分辨成像技术领域取得的成绩。
远场超分辨成像技术可以分为两类:一类是基于单分孓定位技术的超分辨显微成像方法包括光激活定位显微技术(PALM)和随机光学重构显微技术(STORM);另一类是基于点扩展函数调制的超分辨显微成像方法,包括受激发射损耗显微技术(STED)和结构照明显微技术(SIM)植入广告:期刊《光学学报》于2017年3月份出版一期“超分辨成像”专题,如有兴趣嘚童鞋敬请关注
第一类,基于单分子定位的超分辨技术其基本原理是:通过技术手段标记细胞的蛋白质,然后利用激光器低能量照射細胞表面激活稀疏分布的几个荧光分子进行定位,再重复上百次然后拟合这些图像到一张图上,从而得到分辨率提到10倍以上的定位精喥这类技术从本质上来说并没有缩小点扩展函数,而是通过牺牲时间分辨率从而来提高空间分辨率。图4是随机光学重构显微技术(STORM)的发奣者美国霍华德-休斯顿研究所华裔科学家庄晓薇


4 美国华裔科学家庄晓薇(图片来源于网络)

第二类,基于点扩展函数调制的超分辨技術这一类是真正从源头上提高了图像的分辨率。例如2014年诺贝尔化学奖的受激发射损耗显微技术(STED)原理如下:通过添加一路激光(图5(a)),让这路激光和原先的激光艾里斑叠加(图5(b))但是新添加的激光光斑会有效抑制艾里斑边沿区域的激发态荧光分子发光(图5(c)),从而大大减小了光源的点扩展函数的半高宽分辨率极限可以达到16 nm。


5 STED原理图(图片来源于网络)

超分辨技术尤其是远场超分辨成潒技术越来越多地应用在生活当中,在生物医学方面除了静态样品的观测外,活体细胞等样品的观测也越来越成熟其他例如精细微结構的光刻、微纳加工等领域也都有着重要的应用。相信随着超分辨成像技术的进一步发展我们的世界会更加精细。

更清楚地看到原子世界-超快电子電子衍射公式取得重要进展

物理与天文学院张杰教授和向导教授课题组探索了一种利用库伦排斥力压缩相对论电子束脉宽以提高超快电子電子衍射公式时间分辨率的新方法该工作作为‘编辑推荐’(Editor's Suggestion)文章发表在2018年1月的《物理评论快报》 【Phys. Rev. Lett. 120, 18)】;作为本期的亮点文章之一(Featured in

超快电子电子衍射公式是广泛用于原子尺度超快结构动力学研究的技术: 在该技术中,首先利用激光去激发动力学过程随后利用有精确时間延时的超短电子束脉冲去测量原子的分布;通过改变电子束和激光的延时,可以获得原子在不同时间的信息进而在原子尺度重建超快結构动力学的全过程。在该技术中激光脉宽、电子束的脉宽和电子束相对泵浦激光的时间抖动决定了其时间分辨率。

由于电子之间的库倫排斥力电子在产生后会在时间上和空间上膨胀,该效应导致电子束脉宽较长降低了超快电子电子衍射公式的时间分辨率。过去20年盡管科研人员提出了多种用于电子束脉宽压缩的新技术,但是这些技术在把电子束脉宽压缩的同时都会增加电子束的时间抖动。上海交通大学超快电子电子衍射公式与成像课题组提出了一种新方法与传统方法试图减弱库伦排斥力的影响相反,该方法巧妙地利用库伦排斥仂来压缩电子束脉宽该方法在待压缩的电子束前后各引入一个驱动电子束,利用前后驱动电子束对中心待压缩电子束的排斥力不仅可鉯抑制待压缩电子束自身库伦排斥力对电子束脉宽的展宽,同时还能将待压缩电子束脉宽压短;此外该压缩过程不引入额外的时间抖动,大幅提高了超快电子电子衍射公式的时间分辨率使得科研人员可以更清楚的看到原子世界,并有望开辟超快科学新的机会

本工作主偠由基金委国家重大科研仪器设备研制项目(No. )、科技部青年973项目(No. )、上海市科委(No. 16DZ2260200)资助,博士生鲁超为文章第一作者上海交通大學为该工作的唯一完成单位。


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