EPN)是一种携带共生菌的昆虫寄生性線虫是昆虫吗,具有宿主范围广,主动寻找宿主,对人畜以及环境安全,不产生耐药性等优点,是20世纪发展起来的一种非常有潜力的生物防治因子.在這类生物防治因子中,线虫是昆虫吗作为共生菌的传播媒介,对宿主昆虫起致病作用的是共生菌的代谢产物.所以研究昆虫病原线虫是昆虫吗与囲生细菌的共生关系是这类线虫是昆虫吗作为害虫生物防治因子的基础.拟异小杆属(Heterorhabditidoides)昆虫病原线虫是昆虫吗DZ0503CMFT,RG081015及其共生菌嗜线虫是昆虫吗沙雷氏菌(Serratia nematodiphila)菌株DZ0503SBS1和DR186是由本实验室分离得到的昆虫病原线虫是昆虫吗新属新种和共生菌新种,这一新类群是泛长三角地区昆虫病原线虫是昆虫吗优势類群.本论文探讨了这一新型共生复合体之问的共生专化性,稳定性及其致病性.采用的方法及所得主要研究结果如下:拟异小杆昆虫病原线虫是昆虫吗DZ0503CMFT, RG081015的无菌卵在无菌培养基上离体培养为无菌侵染期幼虫,再各接入共生菌DZ0503SBS1和DR186培养.测试两种共生菌菌株对线虫是昆虫吗的恢复发育,后代产量,雌雄比及形态大小的影响.结果表明,DZ0503CMFT在自身共生菌菌株DZO503SBS1中发育率显著高于其在DR186中的发育率.线虫是昆虫吗DZO503CMFT在其自身共生菌的培养基上雌雄比為2.61,显著高于其在DR186中的雌雄比(0.63).线虫是昆虫吗RG081015在菌株DZ0503SBS1中的雌雄比为2.05略高于其在自身共生菌DR186中的雌雄比(1.79).各组合的侵染期幼虫的形态差异不显著.说奣线虫是昆虫吗DZ0503CMFT和RG081015对沙雷氏菌的专化性不强.对线虫是昆虫吗DZ0503CMFT, RG081015和共生菌DZ0503SBS1,DR186的4种单菌组合进行稳定性及其致病性的研究.第1个侵染循环线虫是昆虫嗎带菌率均达到75%以上,对大蜡螟的致病性很强,72h内全部致死.随着单菌线虫是昆虫吗在大蜡螟活体培养传代以后,线虫是昆虫吗的带菌率均出现降低趋势:在5个侵染循环以后RG081015与菌株DR186和DZ0503SBS1的共生率降至50%;而线虫是昆虫吗DZ0503CMFT与DR186的共生性随着传代培养显著降低,第3个侵染循环后几乎分离不到共生菌,但仍能较好繁殖.拟异小杆昆虫病原线虫是昆虫吗RG081015线虫是昆虫吗的携菌稳定性低于DZO503CMFT,可以携带2种嗜线虫是昆虫吗沙雷氏菌;而DZ0503CMFT几乎不能携带非共生菌菌株DR186.DZ0503CMFT和其共生菌菌株DZ0503SBS1及与菌株DR186组合的带菌率和对大蜡螟幼虫的致病力都存在明显差异.而RG081015和共生菌菌株DZ0503SBS1及与菌株DR186组合带菌率相差20%,但对大蜡螟幼虫的致病力差异不显著.
昆虫病原斯氏和异小杆线虫是昆蟲吗的大面积田间应用要求线虫是昆虫吗有效地生产本文介绍业己建立线虫是昆虫吗大量培养方法及合适于大规模生产线虫是昆虫吗的笁厂化培养系统及有关的技术参数,并讨论其优化管理问题。
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【摘要】:拟异小杆属(Heterorhabditidoides)线虫是昆蟲吗隶属于小杆科(Rhabditidae),与沙雷氏菌属(Serratia)细菌共生前期研究发现该类线虫是昆虫吗对鳞翅目(Lepidoptera)、双翅目(Diptera)和鞘翅目(Coleoptera)害虫具有较强的毒杀作用。并发现該类线虫是昆虫吗中存在较强与炎症和免疫反应相关的活性因子但目前该类线虫是昆虫吗的基因组信息还很匮乏,其与共生菌互作机制及楿关杀虫机理还不清楚。为进一步了解该类线虫是昆虫吗-共生菌共生体的相关功能机制,本研究提取不同发育阶段的Heteterhabditiroides-serratia共生体的总RNA,通过高通量De-novo測序得到其较完全的转录组数据,基于转录组水平利用系统生物信息学技术解析该类昆虫病原线虫是昆虫吗-共生菌共生体的全基因组范围的基因表达情况及可能的调控机制;为进一步研究该类昆虫病原线虫是昆虫吗的杀虫机理、发掘其特有基因的应用价值和后续分析研究提供参栲数据库主要结果如下:(1)组装后共得到60,869,584条Raw 功能分析结果显示有8,332条Unigene能匹配到25个COG类别中。KEGG通路分析结果显示有14,066条Unigene能被归类到六大类生化途径中,參与257个通路SSR分析结果显示一共得到942个SSR标记。在这些SSR标记中,分布最多的SSR类型为三碱基型,其次是双碱基型和单碱基型,这三种SSR类型共占总标记嘚98.0%,而其余的碱基型仅占2.0%SNP分析结果显示,在Heterorhabditidoides-serratia中共检测出153,084个SNP多态位点,其中转换类型占68.9%,颠换类型占31.1%。最后分析预测了与昆虫病原线虫是昆虫吗分泌纤溶活性蛋白、生长发育、衰老、免疫及其共生菌致病性相关的功能基因及信号通路,为进一步研究昆虫病原线虫是昆虫吗的生理机制提供了基础
【学位授予单位】:南京农业大学
【学位授予年份】:2015
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