基因工程基因工程工具酶作用特點主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶五大类具体解释如下:
1、DNA限制性内切酶
生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的┅种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用这样可以保护细胞原囿的遗传信息;
它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键;
系专司生物催化合成脱氧核糖核酸和核糖核酸的一类酶的统称;
核酸酶有DNase、RNase、核酸酶S1等可水解相应的DNA和RNA,核酸酶S1可降解单链DNA和RNA用量增大也可降解双链核酸,它可用于切去ds-cDNA合成中产生的发夹环;
体内有些酶可在其他酶的作用下将酶的结构进行共价修饰,使该酶活性发生改变这种调节称为共价修饰调節。
基因工程工具酶作用特点的相关应用——多重放大技术:
为了获得更高的检测灵敏度将多种信号放大技术结合起来使用是一种有效途径。基于切刻内切酶与DNA聚合酶组合作用的等温循环链置换放大技术是近年来被广泛使用的一种基因工程工具酶作用特点组合信号放大技术。
该技术的基本原理是:通过碱基的互补配对杂交形成切刻内切酶的识别位点后切刻内切酶在该位点对其中的一条核酸链进行切刻莋用产生3′端为羟基的切口。
聚合酶识别该切口的3′端以未切割的序列为模板,沿着3′到5′的方向复制聚合置换被切割链的另一段序列最后形成一条完整的双链结构。形成的双链DNA再次被切刻内切酶识别剪切启动聚合酶反应。
基因工程中主要的基因工程工具酶作用特点有限制性核酸内切酶和DNA连接酶
限制性核酸内切酶用来切割运载体和目的基因两端;而DNA连接酶则是将目的基因与运载体的黏性末端连接在一起。
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基因工程工具酶作用特点:限制性核酸内切酶(多用二型)
单链核酸外切酶:核酸外切酶七型
双链核酸外切酶:核算外切酶三型,
单链核酸内切酶:S1核酸酶
单链内切双链外切的核酸酶:Ba131核酸酶
末端脱氧核苷酰转移酶碱性磷酸单酯酶(实验室常用的大概十几种,基因工程工具酶作用特点好像有五十来种)