调节组织因子是第几因子都是有机分子吗

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PAGE PAGE 1 组织组织因子是第几因子、凝血酶受体和血栓调节蛋白在胰腺癌 【摘要】 目的 研究组织组织因子是第几因子(TF)、凝血酶受体(TR)和血栓调节蛋白(TM)在胰腺癌细胞中的表达方法 采用细胞培养、免疫细胞化学和Northern印迹分析方法。结果 每个抗原都在细胞膜及(或)细胞浆中有特征性的免疫反应TF和TR主要在细胞浆,TM在細胞膜TR表达越多,TM表达越少TRmRNA在野生型胰腺癌细胞株中表达,凝血酶和水蛭素均降低TRmRNA的表达量凝血酶可致人胰腺癌细胞株MiaPaCa-2和Panc-1DNA合成增加(P<0.05),在凝血酶刺激0.5和6h时达高峰结论 胰腺癌细胞的TF、TR和TM表达参与了胰腺癌的血液高凝状态。   胰腺癌有较高的弥漫性血管内凝血和血栓性并发症的发病率我们采用细胞培养、免疫细胞化学、Northern印迹分析等,研究组织组织因子是第几因子(TF)、凝血酶受体(TR)和血栓调节蛋白(TM)在人胰腺癌细胞中的表达探讨凝血酶和水蛭素对胰腺癌细胞DNA合成的影响。材料和方法   1.细胞培养:人胰腺癌细胞株MiaPaCa-2、Panc-1、BxPC-3和CaPan-2常规用RPMI1640含体积分數为10%小牛血清(FCSGibco)及1%L-谷氨酰胺和1%青、链霉素培养,维持在37℃含体积分数为95%O2和5%CO2的湿培养箱内细胞贴壁形成单层后,用胰蛋白酶-EDTA(Gibco)贴壁再用磷酸盐缓冲溶液(PBS液)洗。   2.免疫细胞化学检测:肿瘤细胞(3×104个)在玻片上生长过夜细胞贴于玻片,PBS淋洗室温干燥后将玻片-20℃保存至免疫染銫。丙酮固定浸于含体积分数为0.3%过氧化氢(H2O2)甲醇中。检测抗原的抗体有:(1)TF:TF多克隆抗体(伦敦血栓研究所TRI)为兔抗人TF抗体;(2)TR:TR单克隆抗体(剑橋大学)为兔抗人TR抗体;(3)TM:TM单克隆抗体(Dako),为鼠抗人TM抗体取60μl抗体(1∶50稀释)滴于玻片上,室温孵育1.5h加猪抗兔或兔抗鼠IgG(Dako)再孵育1.0h(1∶300稀释);PBS洗后再加ABC复合物(Dako,10mg/L抗生物素蛋白+2.5mg/L生物素-过氧化物酶)孵育45min;随后33′-二氨基联胺(DAB)和体积分数为0.03%H2O2进行颜色反应,再苏木素复染阴性对照,PBS代替第一忼体染色密

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