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北京百奥莱博专业生产销售Nt.AlwI切刻内切酶和外切酶价格我公司供應的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格欢迎新老客户垂询订购。
·SpeI限制性内切酶和外切酶
定量分析基因座内的5-hmC 和5-mC重复性好
与現有 PCR 技术相兼容
EpiMark 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒是一种简单快速试剂盒,能对特定 DNA 位点内的 5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)和 5-甲基胞嘧啶(5-mC)进行定性及定量这种酶学方法包括三步简单操作,利用了同裂酶 MspI 和 HpaII 对甲基化敏感性的不同
简述三步操作如下:基因组 DNA 用 T4 噬菌体β-葡糖基转移酶和 UDP-葡萄糖处理,将所有嘚 5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)糖基化;用限制性内切酶和外切酶 MspI 和 HpaII 消化 DNA,这两个同裂酶有不同的甲基化敏感性;然后用终点或实时 PCR 来定性和定量不哃的甲基化状态EpiMa r k 试剂盒的设计目的是简化甲基化分析,增加发现新生物靶标的可能性。
– T4 噬菌体 β-葡糖基转移酶
– 对照 DNA(未修饰的 5-羟甲基胞嘧啶和 5-甲基胞嘧啶)
– 正反向对照引物混合物
3? →5? 外切酶活性
制备用于双脱氧测序的单链底物
该酶作用于双链 DNA从 3? OH 末端方向逐步切去單核苷酸。每次酶与底物结合催化只有几个核苷酸被除掉,从而在 DNA 分子群内产生渐进缺失
尽管可以作用于双链 DNA 的切刻产生单链缺口,泹该酶最适底物是平齐末端或 3? 凹陷末端 DNA由于对单链 DNA 无活性,因此该酶无法切割 3? 突出末端3? →5? 外切酶活性对底物的切割程度随 3? 突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端完全不能被切割这种特性:可以用于对一端为抗性位点(3? 突出端),另一端是敏感位點(平端或 5? 突出端)的线性 DNA 核酸外切酶
III 的活性部分依赖螺旋结构并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。温度、盐浓度:和酶与 DNA的比例对酶活性影响很大应根据不同的反应调整反应条件:。
据报道核酸外切酶 III 也有 RNase H、3? -磷酸酶和脱嘌呤/嘧啶-核酸内切酶和外切酶活性。
热失活:70℃ 加热 20 分钟
核酸外切酶 III 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度
1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下30 分钟催化产生 1 nmol 酸溶性总核苷酸所需要的酶量。
核酸外切酶 III 不能切割硫代磷酸酯键因此,也可以通过引入一个 α-硫代磷酸核苷酸将 DNA 分子的一端保护起来以進行单向切割。
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